Адреногенитальный синдром

Генетическая диагностика адреногенитального синдрома

Адреногенитальный синдром (АГС) — это группа наследственных ферментопатий с нарушением синтеза гормонов коры надпочечников. Дефицит ферментов (чаще 21-гидроксилазы) приводит к недостатку кортизола и альдостерона, избытку андрогенов и аномалиям полового развития.

Ключевые аспекты:

1. Какая причина? Мутации в генах, кодирующих ферменты стероидогенеза (CYP21A2 – 95% случаев).
2. Диагностика? Определение уровня 17-ОН-прогестерона, АКТГ, кортизола, электролитов, кариотипирование и молекулярно-генетическое тестирование.
3. У кого может быть? Диагностируется у новорожденных (сольтеряющая форма), детей с преждевременным половым развитием и женщин с вирилизацией.

При подозрении на АГС необходим срочный анализ на 17-ОН-прогестерон в сыворотке крови и консультация эндокринолога/генетика.

Источники:

1. Congenital Adrenal Hyperplasia Due to Steroid 21-Hydroxylase Deficiency: An Endocrine Society Clinical Practice Guideline (2018)
2. Клинические рекомендации Минздрава РФ «Врожденная дисфункция коры надпочечников у детей» (2021).

Подробнее об этом — ниже:

Адреногенитальный синдром (делеция и дупликация CYP21A2, конверсия CYP21A2, -113bp, I2G, P30L, 8bp, F306+T, I172N, I236N, M239K, P453S, Q318X, R356W, V237E, V281L) (15) – патология, которая образуется в ходе генетических поломок, именно их выявляют при проведении лабораторного исследования. Важно с точностью установить диагноз на основании полученных данных, чтобы подобрать оптимальные методы терапии, которые будут регулировать состояние пациента на фоне нарушения функциональности ферментов, участвующих в метаболизме кортизола, альдостерона. Для анализа применяют современный метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Тест предоставляет точные и достоверные данные, на основании которых можно подтвердить диагноз, заподозренный лечащим врачом по клиническим симптомам.

Для чего необходим анализ

Адреногенитальный синдром – это аутосомно-рецессивная патология, которая проявляется в виде нарушения метаболизма альдостерона и кортизола. Ее невозможно устранить, но допустимо контролировать при помощи симптоматической терапии. Для этого требуется подтверждение диагноза. С точностью определить его можно только на основании генетической диагностики, использующей ПЦР. Это предоставляет следующие возможности:

• подтверждение или опровержение диагноза адреногенитального синдрома, который первоначально можно заподозрить по клиническим проявлениям и результатам других лабораторно-инструментальных исследований (подтверждение диагноза возможно только при выявлении дефекта определенных генов);
• выявление точных мутаций, которые могли возникнуть в генах, отвечающих за ферментативные реакции кортизола и альдостерона;
• оценка потребности в составлении симптоматической терапии, которая будет сдерживать проявления именно адреногенитального синдрома;
• назначение профилактических методов лечения, которые исключают развитие осложнений адреногенитального синдрома;
• исключение других неверных диагнозов, чтобы устранить потребность в употреблении ненужных лекарственных препаратов, которые не только не вызовут эффект, но и могут привести к побочным реакциям (например, можно устранить диагноз бесплодия, поликистозных яичников, гиперандрогенемии, гирсутизма, нарушения менструального цикла, акне на фоне гормональных перестроек и изменений).

Важно понимать, что дефект генов, ответственных за развитие адреногенитального синдрома, устранить невозможно. Это означает, что мутация постоянно присутствует в организме человека, нарушая активность кортизола и альдостерона. Поэтому тесты для подтверждения генетических дефектов используют лишь однократно. Если диагноз уже установлен, повторять его нет необходимости. Для отслеживания развития адреногенитального синдрома потребуются другие лабораторно-инструментальные исследования, оценивающие состояние гормонов, половых функций.

Показания

Единственное показание для проведения генетического исследования – подозрение диагноза адреногенитального синдрома. Обычно его предполагают по наличию следующей негативной симптоматики:

• развитие половых признаков, не соответствующих варианту нормы (например, увеличенные полового члена у новорожденных мальчиков, разрастание клитора у новорожденных девочек);
• нарушение менструального цикла у женщин – отсутствие регулярности, полное исчезновение;
• повышенная скорость роста в подростковом периоде, что впоследствии может вызвать гигантизм, отслеживаемый в сравнении со сверстниками;
• увеличение уровня половых гормонов у лиц мужского и женского пола;
• гирсутизм у женщин, то есть появление волосяного покрова по мужскому типу (на лице, туловище, спине);
• небольшой размер груди у женщин;
• угри в виде высыпаний, вызванных изменением половых гормонов, не устранимых при помощи стандартных средств;
• раннее половое развитие мужчин, которое сопровождается быстрым огрубением голоса, разрастанием мышечной массы тела;
• обильное выведение калия и увеличение натрия в организме, что приводит к сильной дегидратации, артериальной гипотензии, судорогам и спазмам мышц (подобные патологии развиваются на фоне дефекта уровня андрогена, который регулирует водно-электролитный баланс);
• задержка полового развития, которая проявляется в виде замедленного образования вторичных половых признаков, в норме образующихся в подростковом возрасте.

Также исследование рекомендуется проводить при развитии неспецифических симптомов, которые могут возникать как при адреногенитальном синдроме, так и вследствие других дефектов организма:

• синдром поликистозных яичников – нарушение уровня гормонов у женщин репродуктивного возраста, что приводит к изменениям менструального цикла, гирсутизму, неправильному появлению волос на теле, проблемам с кожей, увеличению массы тела, артериальной гипертензии;
• гиперандрогения – патология эндокринной системы с повышенным содержанием мужских половых гормонов у женщин, что вызывает нарушение полового развития, дефекты репродуктивной системы;
• бесплодие на фоне гормональных сбоев;
• гирсутизм – появление волос у женщин по мужскому типу;
• нарушение менструального цикла;
• акне, вызванные гормональными перестройками и дефектами.

Важно понимать, что адреногенитальный синдром образуется вследствие большого количества генетических поломок. В ходе исследования можно выявить каждую из них.

Правила подготовки

Так как тест определяет мутации в генах, для его проведения не требуется продолжительной и тщательной подготовки. Достаточно лишь соблюдать общие рекомендации перед сбором венозной крови:

• оценка употребляемых лекарственных средств лечащим врачом, чтобы он исключил применение действующих веществ, которые могут повлиять на результаты теста;
• отсутствие употребления пищи за несколько часов до исследования;
• исключение активной физической нагрузки и психоэмоционального стресса непосредственно перед исследованием;
• соблюдение водного баланса весь период подготовки;
• отказ от распития алкогольных напитков за 1 сутки;
• запрет курения сигарет за 30-40 минут до сбора крови.

Исследование можно пройти в любое время суток, на генетические факторы не влияют биоритмы. Но обычно кровь сдают в утром, чтобы соблюсти интервал голодания и быстро  приступить к исследованию.

Метод исследования

В ходе проведения ПЦР для выявления дефекта генов, ответственных за развитие адреногенитального синдрома, используют основной биологический материал в виде венозной крови. Благодаря тесту можно выделить отдельные фрагменты генов, которые затем подлежат этапам обработки.

1. Денатурация. Процедуру выполняют при подогреве биоматериала до 94-96° не более 2 минут. Это приводит к разъединению двух цепочек ДНК до отдельных цепочек. Водородные связи между ними разрываются, поэтому обратное соединение становится невозможным.
2. Отжиг. На этом этапе температуру уменьшают до 72°. Процедура длится не более 2 минут.
3. Амплификация. Разъединенные цепочки ДНК многократно копируют, чтобы создать достаточно генетического материала, необходимого для детекции. В этих целях используют ДНК-полимеразу. Процедуру выполняют не более 10 минут. Обработка ДНК может проводиться вплоть до 40 раз подряд.
4. Определение генетического материала. Используют секвенирование или методы гибридизации. Изъятые фрагменты ДНК определяют по принадлежности, записывая в лабораторный бланк точную разновидность мутации гена.

Методику проводят для каждого гена, который мог вызвать развитие адреногенитального синдрома. В конце исследования указывают об обнаружении или отсутствии мутантного гена.

Расшифровка

В норме ни одного из мутантных генов для развития адреногенитального синдрома выявляться не должно. Только в таком случае можно полностью исключить его развитие. Если выявлена мутация, ее заносят в таблицу. В завершении теста результаты передают лечащему врачу или пациенту. Расшифровкой анализа занимается генетик, гинеколог, андролог, эндокринолог. Вычисленную информацию требуется интерпретировать в соответствии с проявляющейся клинической симптоматикой, выявленными отклонениями. Только так устанавливают точный и достоверный диагноз, на основании которого назначают симптоматические, поддерживающие методы терапии.