Дополнительное изготовление гистологических препаратов (1 стеклопрепарат)

Изготовление дополнительных микропрепаратов образца ткани

Дополнительное изготовление гистологических препаратов (1стеклопрепарат) проводится с целью идентификации клеточного состава тканей из патологического очага любого отдела организма. Чаще методика рекомендована при выявлении опухоли, чтобы идентифицировать ее состав, оценить другие критерии. В некоторых случаях методику выполняют для оценки риска содержания вирусов, отслеживания клеточного состава в воспалительном очаге. В зависимости от предполагаемого диагноза исследование назначают разные специалисты – онколог, ревматолог, гастроэнтеролог, инфекционист.

Для чего используется исследование?

Для проведения анализа первоначально получают образец ткани, из которого изготавливают парафиновый препарат в виде тонкого среза на предметном стекле. В таком виде его можно хранить продолжительно, по необходимости подвергая повторному исследованию. Дополнительное изготовление микропрепарата необходимо в случае, если на основании первичного образца ткани для гистологического анализа требуется провести иммуногистохимическихй тест. Тогда можно получить следующую информацию:

• уточнение диагноза доброкачественной или злокачественной опухоли;
• оценка атипичных клеток – определение точного строения, степени упрощения дифференцировки, степени злокачественности;
• выявление возможности содержания специфических рецепторов, чувствительных к эстрогену, прогестерону;
• отслеживание маркера HER-2, по которому определяют степень тяжести патологии, при его наличии часто наблюдается негативный прогноз вследствие быстрого распространения метастазов (по маркеру можно подобрать качественные методы терапии, которые будут воздействовать на рецепторы атипичных клеток);
• отслеживание степени прорастания злокачественных клеток в окружающие здоровые ткани;
• выявление первичной ткани, из которой могла произойти опухоль, что напрямую влияет на подбираемые методы терапии (например, эпителий, железистая ткань);
• сравнение первичных результатов гистологического теста с повторным анализом, чтобы оценить степень разрастания опухоли и результативность терапии;
• дополнительное отслеживание риска содержания некоторых патогенных вирусов (хеликобактер пилори, Эпштейна-Барр, микобактерия туберкулеза, папиллома вирус).

Врачи часто выбирают гистологическое исследование за счет возможности визуального изучения клеток, проведения иммуногистохимического анализа. Из первично изготовленного микропрепарата можно создать еще один образец. Его можно просматривать неограниченное количество раз, что невозможно при других тестах.

Цель исследования

Основная цель дополнительного изготовления гистологического препарата заключается в проведении повторного исследования одних и тех же тканей для определения следующих данных:

• уточнение первичного диагноза;
• отслеживание вспомогательной информации помимо выявления доброкачественной или злокачественные опухоли (например, уточняют разновидность рецепторов на поверхности атипичных клеток, чтобы составить прогноз и подобрать терапию);
• проведение еще одной микроскопии для оценки клеточного состава ткани опухоли или иного патологического очага;
• проведение иммуногистохимического анализа.

Так как после обработки среза ткани различными реагентами и парафином микропрепарат сохраняет свойства продолжительно, его допустимо изучать повторно. Только при выполнении гистологического анализа сохраняется возможность дополнительного применения иммуногистохимического анализа.

Также повторное исследование назначают в случае, если первично созданный микропрепарат не принес качественных результатов. Например, если он был изготовлен некачественно, поэтому патоморфологическое исследование не дало результатов.

Общая информация об исследовании

Для выполнения гистологического анализа извлекают кусочек ткани из патологического очага. Это может быть опухоль или область с сильным воспалением. Затем образец подвергают обработке, создавая микропрепарат из среза ткани. В таком виде его хранят продолжительно. Если требуется повторно изучить данные или использовать вспомогательные исследования, допустимо дополнительное изготовление гистологических препаратов (1 стеклопрепарат).

Если требуется провести дополнительное исследование, из первичного микропрепарата создают еще один образец, который подвергают двум видам диагностики:

• повторное гистологическое исследование, при котором врач визуально оценивает содержащиеся клетки и посторонние элементы при помощи микроскопа;
• иммуногистохимический тест, на основании которого исследуют содержание специфических рецепторов на поверхности атипичных клеток, которые оценивают через определение комплексов антиген-антитело через лабораторный аппарат.

Уже на основании повторных сведений можно составить дифференциальный диагноз, определить комплекс методов лечения, которые смогут воздействовать на очаг поражения патогенетически.

Когда назначается исследование?

Дополнительное изготовление микропрепарата на основе первичных срезов тканей проводят по показаниям:

• недостаточно качественное изготовление первичного микропрепарата, на основе которого не удается установить достоверные данные патоморфологического исследования;
• потребность получения дополнительной информации по структуре клеток тканей, а также рецепторов на их поверхности;
• уточнение первичного диагноза.

Важно помнить, что если было проведено лечение после первично полученных тканей, дополнительное изготовление микропрепаратов может не дать результатов. Это связано с тем, что назначаемые методы терапии уже воздействовали на очаг поражения, поэтому в этой области произошли изменения. В таком случае для получения информации требуется повторно изъять кусочек ткани через биопсию.

Метод исследования

Для дополнительного изготовления гистологического препарата применяют первично созданный микропрепарат, который подвергают дополнительной обработке:

• изъятие первичного гистологического блока из архива;
• снятие первично нанесенного парафина;
• нарезание слайсов ткани из первичного образца;
• дополнительная микроскопия препарата, чтобы еще раз оценить клеточный состав, выявить доброкачественную или злокачественную пролиферацию, в последнем случае дополнительно изучают степень упрощения морфологии;
• нанесение лабораторного красителя по Романовскому-Гимзе, чтобы каждая клетка и ее внутреннее содержимое приобрело окрашивание;
• нанесение реагента, в котором содержатся специфические антитела, избирательно связывающиеся с рецепторами атипичных клеток, которые воспринимаются в качестве антигенов (так формируются иммунные комплексы антиген-антитело);
• обследование полученного образца на предмет содержания иммунных комплексов антиген-антитело, чтобы оценить возможность содержания рецепторов к эстрогену, прогестерону, выявить наличие маркера HER-2.

Полученные результаты заносят в лабораторный бланк, затем передают пациенту. Результаты должен идентифицировать лечащий врач.

Расшифровка анализа

При помощи дополнительного гистологического анализа выявляют следующие параметры:

• оценка доброкачественного или злокачественного состава новообразования;
• степень упрощения морфологии клеток;
• степень прорастания опухоли вглубь нормальных тканей;
• степень распространения атипичных клеток, которые указывают в крестах (чем их больше, тем активнее развивается опухоль).

По потребности врач назначает дополнительный иммуногистохимический анализ, через который получают следующие данные:

• составление прогноза развития опухоли, выявление специфических рецепторов указывает на тяжелое течение и быстрое прогрессирование новообразования;
• оценка потребности в гормональной терапии в зависимости от выявления рецепторов к эстрогену и прогестерону;
• оценка потребности в дополнительной таргетной терапии, основанной на препаратах, избирательно связывающихся с рецепторами атипичных клеток.

Также через анализ уточняют клеточный состав ткани в случае, если первичная диагностика не дала результатов в связи с некачественным изготовлением микропрепаратов.