Генетическая предрасположенность к целиакии

Диагностика целиакии (типирование HLA DQ2/DQ8)

Типирование генов HLA 2 класса (гаплотипы DQ2/DQ8) – лабораторный метод диагностики, посредством которого можно обнаружить гены, в которых закодирована информация по возможности содержания поломок, в результате которых образуется целиакия. Так как данное заболевание часто передается по наследству, важно своевременно выявить отклонение в генах у ребенка, чтобы ввести диету и другие методы терапии для полного контроля, стойкой ремиссии, предотвращения риска осложнений.

Цель исследования

Анализ генетической предрасположенности к целиакии проводится лишь однократно. С его помощью выявляют наличие или отсутствие дефектных генов, из-за которых может развиться целиакия. Это патология, при которой происходит непереносимость белка злаковых продуктов, что проявляется в форме энтеропатии. В результате воспалительного состояния кишечника нарушается всасывание питательных веществ, происходит стойкая диарея, боль в животе. Если заболевание развивается у детей, но со временем его лечение не происходит, начинается отставание в росте и психоэмоциональном развитии. Поэтому так важно своевременно проводить генетическое исследование, чтобы выявлять риск развития целиакии.

Выделяют некоторые другие цели анализа:

• дифференциальная диагностика целиакии в случае, если другие тесты не предоставляют точных данных (на основании генетического исследования можно исключить другие виды патологий);
• возможность передачи патологического гена по наследству среди близких родственников;
• исключение целиакии в случае, если симптомы неспецифичны;
• составление оптимального плана терапии, чтобы предупредить осложнения, что особенно важно в раннем детском возрасте;
• профилактическое отслеживание многих генетических патологий, в том числе целиакии, в случае, если у пациента выявляют негативный анамнез по поводу аутоиммунных патологий.

Важно помнить, что лишь одного генетического исследования по поводу предрасположенности к целиакии недостаточно. Это связано с тем, что патологический ген может содержаться у пациента, но сама симптоматика заболевания не проявляется. И наоборот, признаки нарушения обмена веществ и аутоиммунной патологии могут развиваться по типу целиакии (симптомы энтеропатии), хотя у пациента можно обнаружить другое заболевание в ходе развернутой диагностики. Поэтому важно выполнять комплексное обследование.

Показания для анализа

Анализ генетической предрасположенности на основании типирования генов выполняют при наличии следующих показаний:

• выявление среди близких родственников диагноза целиакии, так как данная патология может передаваться генетически;
• комплексная оценка возможности развития целиакии, если у пациента проявляются негативные симптомы, которые одновременно указывают на воспалительное поражение кишечника и аутоиммунные процессы;
• исключение риска развития целиакии, если симптомы напоминают этот диагноз, но развивается другое заболевание.

Часто бывают случаи, когда на гистологическом исследовании обнаруживают признаки, указывающие на целиакию. Для таких пациентов требуется подтвердить диагноз, чтобы начать патогенетическую терапию. Если этого не сделать, лечение может быть проведено неверно, что приведет к усугублению клинической симптоматики и повышению риска развития осложнений. Поэтому необходим анализ, на основании которого можно провести дифференциальную диагностику. Именно таким анализом является определение генетической предрасположенности к целиакии на основании типирования генов.

Исследование чаще всего назначают в лечебных целях. Но также его можно пройти профилактически, чтобы исключить любые риски развития целиакии. Например, подобную диагностику можно использовать для пациентов, у которых часто наблюдается расстройство пищеварения на фоне употребления каких-либо продуктов питания. Благодаря полученным сведениям составляют правильную диету, которая не вызывает повышенной нагрузки на организм, а в случае выявления целиакии не приводит к повторным аутоиммунным реакциям в отношении тканей кишечника.

Как подготовиться к анализу

Генетики не предоставляют строгих требований по предварительной подготовке к проведению анализа. Достаточно выполнить общие советы перед сбором венозной крови, чтобы повысить достоверность:

• последний период употребления пищи за 4 часа до процедуры;
• сдача крови в утреннее время, в первые несколько часов после сна;
• исключение стрессовых ситуаций за несколько дней;
• исключение употребления алкогольных напитков за 1 сутки.

Так как на генетический набор не влияет употребление лекарственных препаратов, алкогольных напитков, физическая нагрузка и многие другие факторы, достаточно выполнить лишь эти требования.

Метод исследования

Для диагностики генетической предрасположенности к развитию целиакии проводят лабораторную диагностику на основе полимеразной цепной реакции или ПЦР. Анализ выполняют на основании венозной крови, которую собирают в кабинете медсестры, затем сразу же передают в лабораторию, где выполняют следующие этапы:

• денатурация – разделение цельной спирали ДНК на отдельные нити через уничтожение водородных связей при помощи повышения температуры до 96°;
• снижение температуры до 60°;
• введение праймеров, которые встраиваются в одну цепочку ДНК, чтобы выделить именно тот участок, который подвергают остальным этапам диагностики;
• повторное увеличение температуры до 72° для следующего этапа;
• размножение генетического материала, которое длится ровно столько времени, чтобы произошло многократное увеличение ДНК для формирования достаточного объема генетической информации с целью детекции ее структуры;
• как только начинается новый цикл обработки биоматериала, заново повторяется процедура увеличения и уменьшения температуры, денатурации, отжига, удлинения (для одного анализа требуется примерно 30 циклов, чтобы получить генетическую информацию);
• введение получившего биоматериала в автоматический анализатор, на котором задают длину волны, характерную именно для оценки искомых фрагментов генетического материала;
• включение аппарата, который самостоятельно идентифицирует данные, затем выдает информацию по наличию или отсутствию гаплотипа DQ2/DQ8.

В ходе проведения ПЦР исследования можно получить одновременно качественные и количественные данные. Но в данном случае достаточно лишь получения качественных сведений, чтобы судить о наличии или отсутствии патологического гена.

Как только диагностика завершится, произойдет распечатка лабораторного бланка. В нем будет содержаться информация о содержании гаплотипа DQ2/DQ8. С этими сведениями требуется обратиться к врачу-генетику для расшифровки. Реже определением болезни занимается гастроэнтеролог. В случае выявления патологического гаплотипа требуется пройти и другие методы диагностики, чтобы подтвердить дифференциальный диагноз, а также наличие или отсутствие симптоматики целиакии.

Расшифровка анализа

В норме гаплотип DQ2/DQ8 обнаруживаться не должен, так как информация содержится в дефектном гене. Только в таком случае можно с точностью сказать, что у пациента отсутствует целиакия на данный момент, а также в будущем е развитие невозможно. В случае выявления патологического гена можно судить о двух формах патологии:

• наличие патологического гена, но отсутствие самого развития болезни;
• наличие патологического гена и явное проявление признаков целиакии при употреблении пациентом злаковых продуктов.

Важно помнить, что подтвердить диагноз целиакии на основании данного исследования можно даже в самых сомнительных случаях. Например, когда признаки патологии не проявляются ярко, а лабораторно-инструментальные анализы не подтверждают диагноз. Это связано с тем, что целиакия может развиваться до различной степени тяжести, в зависимости от тяжести реакции иммунитета, состояния пищеварительного тракта и в отдельности кишечника, периода употребления злаковых продуктов и многих других факторов. Поэтому в современной лабораторной диагностике анализ генетической предрасположенности по типированию генов является основополагающим.