Иммуногистохимическая диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации)

Иммуногистохимическое исследование биоптата эндометрия

Иммуногистохимическая диагностика хронического эндометрита (фаза пролиферации) – лабораторный метод диагностики, направленный на выявление специфических маркеров, указывающих на хроническое воспаление эндометрия матки, который выстилает ее внутренний слой. Чаще состояние проявляется на фоне бактериальной или вирусной инфекции, что приводит к накоплению иммунных комплексов. Важно своевременно определить патологию, чтобы не допустить дальнейших осложнений вплоть до формирования злокачественного процесса или бесплодия. Если провести иммуногистохимическую диагностику на ранних этапах, можно устранить очаг поражения консервативными тактиками.

Цель исследования

Иммуногистохимическое исследование необходимо для получения следующих данных:

• наличие или отсутствие хронического эндометрита на основании выявленных иммунных комплексов в образце изъятой ткани;
• дифференциальная диагностика между различными патологиями матки, которые могут вызывать кровотечение вне менструального цикла;
• выявление первичного повреждающего фактора, который может привести к отсутствию оплодотворения или проблемам с вынашиванием плода (выкидыш на ранних сроках, преждевременные роды);
• дифференциальная диагностика между лимфопролиферативным заболеванием и другими патологиями, имеющими схожие симптомы;
• оценка причин проявляющейся негативной симптоматики – боль в нижней части живота, кровотечение из матки, усиление дискомфорта во время менструации;
• наличие маточных кровотечений в совокупности с распространенными факторами риска, приводящими к хроническому эндометриту – установка маточной спирали в качестве контрацепции, продолжительные воспалительные процессы в половых органах, недавно проведенная инвазивная процедура или хирургическое вмешательство на области матки, беременность.

Исследование рекомендуется проводить только при наличии строгих показаний, так как для него требуется взять кусочек ткани, которую размещают в парафиновый блок. То есть для сбора биоматериала требуется инвазивная процедура, которая имеет ряд ограничений. Из-за этого фактора тест не проводят в профилактических целях, его назначают только при необходимости лечебных манипуляций.

Общая информация об исследовании

В норме внутренний слой матки выстилает слизистая оболочка – эндометрий. Ее основная функция заключается в прикреплении оплодотворенной яйцеклетки, из которой развивается плод. Эндометрий периодически обновляется благодаря менструальному циклу. Поэтому иммуногистохимическую диагностику хронического эндометрия рекомендуется выполнять в фазу пролиферации с 5 по 14-й день менструального цикла.

Хронический эндометрит – патология эндометрия матки воспалительного характера, которая чаще всего встречается у женщин репродуктивного возраста, но в некоторых случаях может формироваться и при климаксе. Болезнь развивается под влиянием следующих факторов:

• хронические воспалительные процессы любых отделов половой системы;
• малоинвазивные хирургические вмешательства на матке;
• беременность, которая могла закончиться искусственным или естественным разрешением;
• патогенная флора, включающая бактерии или вирусы.

Под действием повреждающих факторов развивается воспалительный очаг внутри матки, из-за чего появляются периодические кровотечения, не связанные с менструальным циклом.

Иммуногистохимическое исследование – это основной метод диагностики, благодаря которому можно выявить наличие или отсутствие хронического эндометрита. Для его проведения требуется провести биопсию, чтобы получить небольшой кусочек ткани из очага воспаления. Через анализ определяют следующие маркеры:

• плазматические клетки;
• нейтрофилы;
• лимфоцитарный инфильтрат;
• небольшое количество эозинофилов;
• гистиоциты с содержанием гемосидерина.

Основной маркер – плазматические клетки, которые выявляют посредством иммуногистохимического исследования, чтобы подтвердить достоверный диагноз.

Специальной подготовки к анализу не требуется.

Когда назначается исследование?

Выделяют следующую группу показаний для назначения иммуногистохимического исследования по выявлению хронического эндометрита:

• периодические эпизоды маточных кровотечений в совокупности с факторами риска, которые могут приводить к воспалительному процессу эндометрия матки;
• периодически возникающие маточные кровотечения без развития менструации;
• бесплодие неясной этиологии;
• беременность, заканчивающаяся выкидышами или преждевременными родами;
• подготовка для гормональной стимуляции или экстракорпорального оплодотворения, чтобы судить о качестве приживления зародыша.

Основным показанием является предположение о наличии хронического эндометрита. Только посредством иммуногистохимической диагностики можно подтвердить точный вид патологии, чтобы быстро приступить к лечению.

Метод исследования

Иммуногистохимическое исследование – сложный анализ, который проводится по этапам:

1. Получение биоматериала. Образец ткани берут посредством биопсии. Его обрабатывают парафином, чтобы клеточная структура не менялась.
2. Удаление парафина. Процедуру проводят уже в лаборатории, перед непосредственным выполнением теста.
3. Восстановление антигенной активности образца ткани. Это необходимо для выявления иммунных клеток, которые образуются в очаге поражения при воспалительном процессе.
4. Удаление частей, в которых не содержится большое количество антигенов. Это сужает спектр исследуемой области, позволяет получить более достоверные данные.
5. Внесение реагента. Этап необходим для формирования иммунных комплексов антиген-антитело, которые будет выслеживать анализатор. Препарат инкубируют, чтобы иммунные комплексы появились в короткие сроки.
6. Добавление еще одного реагента. В нем содержатся иммунные клетки с метками на основе флюоресцентного или ферментного компонента. В обоих случаях они присоединяются к иммунным комплексам, поэтому анализатор более точно оценивает полученные данные.
7. Окрашивание. Для этого на препарат наливают краситель, выдерживают 20-40 минут, затем смывают. В таком виде все содержащиеся иммунные комплексы будут окрашены в определенный цвет, поэтому их легче рассмотреть и идентифицировать.
8. Просмотр препарата. Для этого используют люминисцентный микроскоп. С его помощью в точности рассматривают исследуемые ткани, оценивая клеточную структуру. Также выявляют флюоресцентные клетки, наличие которых свидетельствует о хроническом воспалительном процессе в эндометрии.

Все увиденные данные врач заносит в лабораторный бланк. Оценивают не только наличие или отсутствие патологических маркеров, но и общее строение тканей эндометрия матки. Так можно выявить ее функциональность в пролиферативную стадию, определить соответствие фазе менструального цикла. Эта информация поможет не только в постановке диагноза хронического эндометрита, но и предположить другие возможные отклонения.

Что означают результаты?

С полученными результатами пациент должен обратиться к лечащему врачу. Обычно это гинеколог, в отдельных случаях может потребоваться консультация онколога. По результатам анализа можно судить о следующих данных:

• качество общей структуры эндометрия, который на этапе взятия биоматериала находился в фазе пролиферации;
• возможность развития каких-либо гормональных отклонений, которые влияют на эндотелий (одна фаза, удлинение фазы, ановуляция);
• нормальное состояние или обильное разрастание железистой ткани в области эндометрия, если присутствуют очаги гиперплазии слизистой оболочки;
• очаги активного воспалительного процесса, при котором возникают маточные кровотечения;
• наличие или отсутствие маркеров хронического эндометрита – плазматические клетки, лимфоциты в активированной форме.

Обнаружение специфических маркеров (натуральных киллеров CD56, B-клеток CD20), плазматических клеток (CD138) и активированных лимфоцитов (HLA-DR) в биоптате эндометрия в пролиферативную фазу свидетельствует о хроническом эндометрите.

Важно помнить, что результат требуется интерпретировать не только на основании иммуногистохимического анализа, но и других показателей. К ним относят клиническую симптоматику, историю болезни, анамнез, беременности и их исход, другие данные. Однако на основании иммуногистохимического исследования можно с точностью подтвердить предлагаемый диагноз, чтобы сразу приступить к лечению, предотвратив осложнения.