Иммуногистохимическое исследование (9 антител)

Иммуногистохимия материала с использованием антител

Иммуногистохимическое исследование проводится при уже выявленной опухоли и проведенном гистологическом анализе, чтобы оценить особенности новообразования, подобрать оптимальные тактики терапии. Анализ назначает онколог. Несмотря на сложность диагностики, благодаря ей можно составить правильный прогноз, выбрать лечение, через которое значительно снижается риск рецидива и распространение метастазов.

Назначение иммуногистохимического анализа предоставляет следующую информацию:

• выявление точной разновидности новообразования;
• оценка степени злокачественности клеток, что напрямую влияет на прогноз развития болезни;
• оценка степени тяжести патологии, а также глубины распространения атипичных клеток вглубь нормальных тканей;
• дифференциальная диагностика между различными видами злокачественных новообразований;
• определение первопричины, которая спровоцировала развитие и разрастание опухоли (например, злокачественный рост могут спровоцировать специфические антигены, расположенные на поверхности атипичных клеток);
• составление правильных методов терапии, благодаря которым можно не только устранить опухоль, но и малейшие остатки атипичных клеток, что предотвращает возможность рецидива;
• отслеживание степени разрастания опухоли по пролиферации ее клеток;
• отслеживание рецепторного статуса при опухолях предстательной и молочной железы;
• выявление точного вида ткани, из которой произошла опухоль (например, железистая ткань или эпителий);
• определение пациентов из группы риска, для которых требуется тщательное обследование, а также периодическая повторная оценка состояния здоровья;
• выявление некоторых других болезней, помимо злокачественных новообразований – хеликобактериоз, вирус Эпштейна-Барр, папиллома вирус, туберкулез.

Так как для сбора биоматериала требуется проведение инвазивной процедуры с хирургическим вмешательством, тест не проводят в профилактических целях. Его используют при уже доказанной опухоли или для подтверждения диагноза, который невозможно выявить другими методами.

Цель иммуногистохимического анализа

Роль иммуногистохимического анализа высока. Его цель заключается в получении важных сведений:

• оценка различных показателей опухоли – нозология, первичный очаг прорастания, дифференциальная диагностика между доброкачественным и злокачественным составом клеток, прогноз развития новообразования, качество терапии;
• выявление специфических антигенов на поверхности антител, чтобы подобрать оптимальные методы терапии, чувствительные именно к данному маркеру;
• отслеживание некоторых видов вирусов, которые могут приводить к тяжелому ухудшению состояния здоровья вплоть до летального исхода (например, микобактерия туберкулеза).

Через исследование можно одновременно оценить атипичные клетки, а также специфические антигены на их поверхности. Благодаря иммуногистохимическому анализу был совершен значительный прогресс в подборе оптимальных методов лечения.

Общая информация об исследовании

Первоначально для диагностики опухоли получают ее небольшой кусочек. Его нарезают на тонкие слои, каждый из которых располагают на стерильном лабораторном стекле. Первоначально биоматериал подвергают гистологическому анализу. Если выявляют злокачественную опухоль, рекомендуется проведение иммуногистохимического анализа.

Для него свойственны следующие особенности:

• суть метода заключается в нанесении специфического реагента на поверхность биоматериала, в котором содержатся специфические антитела;
• антитела должны вступить с антигенами во взаимосвязь, образовав специфические иммунные комплексы;
• формирование иммунных комплексов вызывает окрашивание, по которому определяют наличие или отсутствие искомых антигенов.

В данном случае оценивают антитела, что значительно расширяет круг исследования. Так можно определить наличие или отсутствие определенных видов антигенов, к которым подбирают тактики терапии.

Когда назначается исследование?

Для проведения иммуногистохимического анализа с использованием антител выделяют следующие показания:

• сильная дисплазия или выявленная начальная стадия рака шейки матки;
• злокачественное новообразование в предстательной, молочной железе, желудке, чтобы оценить наличие или отсутствие антигенов, к которым будут чувствительны определенные лекарственные средства для таргетной терапии;
• новообразование в гипоталамо-гипофизарной системе;
• оценка степени снижения дифференцировки клетки, от чего зависит тяжесть болезни, злокачественность опухоли;
• составление положительного или негативного прогноза (присутствие антигенов на поверхности атипичных клеток ухудшает прогноз, но позволяет подобрать правильные методы терапии на ранних стадиях);
• отслеживание результатов назначаемого лечения;
• выявление первичного очага опухоли при развитии метастазов;
• оценка состояния тканей пищеварительного тракта при развитии целиакии (при условии отсутствия получения качественной информации от гистологического анализа);
• неполноценные данные от серологического, гистологического теста, чтобы получить развернутые данные.

Назначение на анализ получают у онколога, гастроэнтеролога, инфекциониста. Результаты должен расшифровывать этот же врач.

Метод иммуногистохимического исследования

Для иммуногистохимического исследования получают образец ткани из опухоли или другой изучаемой области. ИГХ выполняют только после проведения первичного гистологического анализа. 

Если подтвержден злокачественный процесс или не выявлены полноценные данные, приступают к исследованию по этапам:

• проведение хирургического вмешательства с выполнением биопсии, то есть отделение кусочка ткани из патологического очага, который затем размещают в стерильный контейнер;
• нарезание полученной ткани на тонкие слайсы;
• нанесение небольшого количества формалина на каждый кусочек среза;
• нанесение спирта на 8-10 часов, чтобы предотвратить естественные процессы отмирания клеток;
• обработка ткани различными веществами, чтобы она стала эластичной, не подвергалась видоизменениям – ксилол, парафин;
• создание препаратов, на которых должны располагаться тонкие срезы ткани с толщиной не более 5 мкм;
• устранение лишнего парафина с поверхности препарата;
• нанесение лабораторного красителя (гемотоксилин – эозин), чтобы сохранилась возможность просмотра структуры атипичных клеток;
• нанесение на поверхность среза ткани лабораторного реагента, содержащего специфические антитела;
• ожидание небольшого количества времени, чтобы антитела из реагента вступили во взаимосвязь с антигенами на поверхности атипичных клеток;
• диагностика полученного образца ткани при помощи лабораторного оборудования, чтобы выявить наличие или отсутствие связавшихся иммунных комплексов по специфическому окрашиванию.

Изученные препараты не выбрасывают. Их оставляют в таком виде продолжительно, чтобы у цитолога была возможность повторного изучения при выявлении патологии. Тогда можно сравнить данные первичного и повторного теста, чтобы отследить развитие болезни и эффект лечения.

Расшифровка иммуногистохимического исследования

Первоначально в ходе исследования оценивают структуру и степень распространения атипичных клеток. Их содержание помечают в лабораторном бланке в виде крестов. Чем больше крестов помечено в бланке, тем обильнее распространяются атипичные клетки по ткани.  Затем оценивают наличие или отсутствие специфических антигенов на поверхности антител. 

Их наличие свидетельствует о следующих критериях:

• тяжелая степень злокачественности;
• высокий риск распространения метастазов;
• возможность применения таргетной терапии, которая будет направлена именно на выявленные антигены, чтобы полностью ликвидировать атипичные клетки, предотвратив их распространение по организму (особенно эффективно такое лечение после хирургического вмешательства, чтобы предотвратить риск рецидива, развитие метастазов).

Если подозревается злокачественный процесс, расшифровкой должен заниматься только онколог. В случае выявления патологии он сразу же подберет дополнительные методы диагностики и патогенетическое лечение.