Гистологическое исследование биоптата

Классический гистологический метод анализа является основным этапом дифференциальных диагностических исследований патологических изменений в органах и тканях, прежде всего при онкологических заболеваниях.

Биоптаты представляют собой полученные прижизненно образцы биологического материала посредством различных способов биопсии, либо в ходе проведения оперативного вмешательства.

Забор биоптата должен проводиться со сведением к минимуму даже малейшей его деформации, с получением достаточного по размеру образца.

Взятие биоптатов производят из самых разных тканей (кожа, костный мозг, лимфоузлы, легкие, органы ЖКТ, печень, почки, предстательная железа, матка и другие).
Находят применение различные способы забора материала, заключающиеся в изъятии всего образования целиком либо его фрагмента, с использованием методов эксцизионной, инцизионной, пункционной, щипковой биопсии, путем иссечения тканей.

Описание гистологического анализа

Суть гистологического исследования:

заключается в проведении микроскопического анализа препаратов из биоптатов, извлеченных из тела обследуемого посредством биопсии, с целью исследования их морфологии и выявления патологических изменений;
основное требование к материалу, подлежащему анализу, состоит в максимальном сохранении прижизненного состояния структуры ткани;
полученный материал подлежит хранению и должен быть доступен в случаях, когда необходим повторный анализ;
проводится по стандартной методике, либо в ускоренном варианте по показаниям.

Стандартная методика процедуры включает этапы:

получения биоптата;
фиксации его специальными растворами, чаще всего формалином;
проведения дегидратации образцов с последующей пропиткой их парафином;
формирования гистологических блоков;
резки блоков с целью получения ультратонких срезов тканевых образцов при использовании микротома;
помещения полученных срезов на предметные стекла;
проведения окрашивания и подготовки препаратов для микроскопирования.

Ускоренная методика процедуры показана при экстренном заборе биоптатов при проведении операции, сводится к замораживанию образца и получению срезов тканей, подлежащих анализу.

Показания к проведению анализа

Анализ проводится:

при необходимости постановки диагноза онкологического заболевания, либо с целью его подтверждения;
при проведении исследований с целью дифференциальной диагностики состояний предопухолевого, опухолевого, неопухолевого характера;
при необходимости обоснования проведения тех или иных лечебных мероприятий, в том числе хирургических.

Важность исследования

Гистологическое исследование биоптата – оптимальное исследование, при помощи которого можно в точности изучить клеточную структуру тканей, что нельзя выполнить через другие анализы. Затрудненность методики заключается в необходимости предварительного получения небольшого образца ткани из очага поражения. Важность проведения именно гистологического анализа заключается в получении следующих данных:

оценка структуры тканей, изучение их точного клеточного состава;
степень дифференцировки клеток, чтобы определить возможность выявления малодифференцированных клеток, вызывающих злокачественные новообразования;
определение других включений, которые в норме не должны содержаться в тканях – патогенные микроорганизмы, посторонние клетки и ткани, кальцификация и многое другое;
дифференциальная диагностика многих патологий, если клиническая симптоматика не специфична (например, можно определить доброкачественную или злокачественную структуру опухоли);
подготовка к проведению хирургического вмешательства, чтобы оценить его необходимость и разновидность, а также подобрать дополнительные методики лечения;
структура дефектных тканей при их случайном выявлении в процессе хирургического вмешательства.

Если врач подозревает патологические процессы в тканях на клеточном уровне, всегда необходимо проводить гистологическое исследование. Чаще всего его выполняют при подозрении доброкачественной или злокачественной опухоли, которую выявляют в ходе других обследований. Например, если она развивается во внутренних органах, первоначально ее выявляют через УЗИ или МРТ. Однако методики лечения значительно отличаются в зависимости от степени дифференцировки клеток. Поэтому необходимо предварительно провести гистологическое исследование, чтобы определить потребность в назначении лишь одной операции или дополнительном применении лучевой и химиотерапии.

Для чего необходим анализ

Гистологическое исследование биоптата органов и тканей необходимо для получения следующих данных:

дифференциальная диагностика между злокачественной и доброкачественной опухолью;
отслеживание нормальной структуры ткани или посторонних включений в виде фиброза, кальцификации;
дифференциальная диагностика аутоиммунной природы воспалительного процесса;
подбор оптимальных методов терапии, которые будут воздействовать на заболевание патогенетически;
составление прогноза развития патологии, который бывает благоприятным и неблагоприятным, в зависимости от выявленного клеточного состава;
оценка эффективности проводимых методов терапии, чтобы по необходимости корректировать предварительно назначенные тактики в случае проявления низкого результата.

Для гистологического исследования необходимо взять небольшой кусочек ткани. Инвазивная процедура имеет ряд противопоказаний, ограничений, поэтому исследование выполняют по строгим показаниям.

Этапы подготовки

Этапы подготовки к анализу Перед проведением гистологического исследования биоптата органов и тканей каждый пациент должен пройти предварительную подготовку:

накануне процедуры употребляют легкий, щадящий ужин;
взятие образца тканей осуществляют строго на голодный желудок, последний прием пищи должен быть за 8 часов, а жидкости за 3 часа;
заранее отменяют употребление лекарственных препаратов, которые исключил лечащий врач (например, недопустим гепарин, он может вызвать кровотечение во время хирургического вмешательства);
запрещено употреблять алкоголь за 1-2 дня;
недопустимо курить за 1 час.

Если пациенту потребуется повторно проводить гистологическое исследование, все этапы осуществляют заново.

Особенности анализа

Для гистологического исследования биоптата органов и тканей выделяют ряд особенностей, которые должен учитывать лечащий врач и пациент:

сбор тканей допустимо осуществлять из любых внутренних органов и тканей, но только в таком объеме, чтобы не навредить структуре, функциям;
во время биопсии собирают ткани из разных участков патологического очага, чтобы не упустить малейших изменений;
для каждого среза ткани создают отдельный микропрепарат;
в случае выявления патологического очага сохраняют микропрепараты или их фотографии, чтобы сравнивать эти данные с новыми анализами для отслеживания динамики развития болезни.

Важно помнить, что проведение гистологического исследования в целях профилактики невозможно.

Создание микропрепарата

Изъятые кусочки тканей обрабатывают парафином, чтобы их структура сохранилась до момента изготовления микропрепарата. Как только образец попадает в лабораторию, приступают к следующим этапам:

удаление парафина;
нарезание кусочка ткани на тончайшие срезы, каждый из которых распределяют на стерильное предметное стекло;
нанесение небольшого объема спирта, затем удаление дистиллированной водой (методика фиксирует клетки, предотвращает дальнейшие изменения);
нанесение красителей, каждый из которых выдерживают 20-30 минут, затем смывают обычной водой;
сушка в естественных условиях на открытом воздухе, но не под прямыми солнечными лучами.

Как только закончилась процедура сушки, микропрепараты в подписанном виде доставляют к врачу-цитологу.

Микроскопия

Микроскопия На данный момент в клинической практике применяют усовершенствованные микроскопы. С ними выполняют приближение каждого микропрепарата на максимальном уровне, чтобы в точности рассмотреть полноценную структуру клеток. То есть оценивают мембрану, цитоплазму, органеллы, ядро, ядрышки. Изучают степень дифференцировки клеток, которая должна быть присуща данной ткани. При изучении клеток дополнительно можно осуществлять фотофиксацию. То есть снимают выведенное изображение при помощи встроенной камеры, которое в дальнейшем сохраняют на карту памяти. Так данные сможет изучить не только цитолог, но и другой врач. Например, онколог.

Результаты анализа и их интерпретация

С учетом полученных данных в результате проведения гистологического анализа препаратов из биоптатов исследованного органа или тканей выдается бланк, содержащий описание процедуры, перечень выявленных патологических изменений, диагноз.

Диагноз может носить характер заключительного, ориентировочного, описательного.
Если данных для постановки диагноза недостаточно, приводится лишь описание данных микроскопического анализа. Данная ситуация может быть обусловлена недостаточным объемом материала, техническими погрешностями анализа, недостаточным качеством препаратов. Может быть рекомендовано повторное прохождение исследования, либо повторный микроскопический анализ имеющихся препаратов при достаточном уровне их качества.

Важность данного метода заключается в возможности получения достоверной информации о наличии злокачественного новообразования.