Анализ микробиоты кишечника у детей до 14 лет

Энтерофлор дети

Исследование состава микробиоты кишечника у детей методом ПЦР в кале (до 14 лет) – лабораторный метод диагностики, посредством которого оценивают микроорганизмы, содержащиеся на поверхности слизистой оболочки толстого кишечника в целях нормального переваривания пищи, всасывания питательных веществ, поддержания функции иммунитета. На подобные микроорганизмы могут влиять различные повреждающие факторы, вследствие чего меняется их состав. Важно оценить, какие именно изменения произошли в микрофлоре, чтобы подобрать оптимальные методы терапии. В этих целях используют тест, который подходит именно для детей до 14 лет, так как их микробиота отличается от взрослых людей.

Цель исследования

Основная необходимость исследования состава микробиоты кишечника у детей методом ПЦР до 14 лет направлена на получение следующей информации:

• состав нормальных и условно-патогенных микроорганизмов, которые в норме должны содержаться в микробиоте толстого кишечника;
• точная концентрация всех бактерий и грибков, которые обитают на поверхности слизистой оболочки толстого кишечника;
• степень влияния различных повреждающих факторов, которые могут изменить нормальный состав микрофлоры – продолжительный прием некоторых лекарственных средств, излучение, неправильное питание, заболевания пищеварительного тракта, или других отделов организма, снижение функции иммунитета;
• качество восстановления микробиоты после затянувшихся патологий кишечника или других отделов пищеварительного тракта;
• влияние различных повреждающих факторов на состав микрофлоры у новорожденных и детей до одного года жизни;
• потребность в назначении лекарственной терапии для восстановления состава микрофлоры;
• качество проведенного лечения для восстановления состава микроорганизмов кишечника, чтобы определить необходимость в применении дополнительных препаратов.

Многие люди не догадываются, что изменения в различных тканях и органах всего организма могут влиять на состав микрофлоры толсто кишечника. Это может вызывать различную симптоматику, начиная с диспепсических расстройств, заканчивая кожными высыпаниями и уменьшением массы тела. Эти признаки не специфичны, характерны для многих патологий, поэтому во многих случаях пациентам не назначают адекватные методы терапии. Состояние постепенно отягощается, развиваются осложнения. Если же своевременно провести исследование состава микробиоты кишечника у детей методом ПЦР фекалий до 14 лет, можно избежать многих из них.

В особенности важно проводить подобные исследования для детей до 14 лет, так как качество переваривания пищи и поступления питательных веществ в кровоток из кишечника влияет на их рост, развитие.  Своевременное предупреждение дальнейших отклонений, коррекция микробиоты – залог оптимального поступления питательных веществ в кровь для нормального развития организма.

Показания для анализа

Для проведения исследования состава микробиоты кишечника у детей до 14 лет выделяют ряд показаний:

• кишечные патологии, которые протекают длительно, переходят в хроническую форму;
• продолжительная терапия гормонами, антибиотиками, излучением;
• отсутствие восстановления нормальных физических показателей кала после любых инфекционных заболеваний;
• наличие в любых участках организма гнойных процессов, бактериемии, которые не поддаются терапии;
• подготовка к хирургическому вмешательству для пациентов с высоким риском дисбактериоза кишечника;
• гиперчувствительность иммунитета, тяжело поддающаяся методам терапии – крапивница, ангионевротический отек, анафилактический шок, атопический дерматит и многие другие;
• заражение плода инфекционными микроорганизмами внутриутробно или в процессе рождения;
• оценка отклонений, которые могут развиться при непереносимости грудного молока, искусственном вскармливании;
• продолжительное влияние факторов, подавляющих иммунитет, которые могут привести к поражению микрофлоры кишечника – врожденный или приобретенный иммунодефицит, вирусные инфекции;
• оценка причин отставания в развитии, низкой массы тела, инфекционных и воспалительных патологий полости рта.

Показания к назначению теста определяет гастроэнтеролог, иммунолог, аллерголог, другой лечащий врач, который заподозрил нарушения микрофлоры кишечника у ребенка до 14 лет. Расшифровкой и назначением терапии лучше заниматься гастроэнтерологу.

Как подготовиться к анализу

Для проведения лабораторного анализа и получения достоверных результатов придерживаются правил подготовки:

• пересмотр всех лекарственных средств, которые употребляет пациент, лечащий врач отменит препараты, влияющие на результат минимум за 1 неделю (например, это касается гормонов, антибиотиков, фунгицидов, пробиотиков, сорбентов, слабительных);
• щадящий режим питания с отсутствием употребления жирной, острой, жареной, чрезмерно соленой, копченой еды, фастфуда, алкоголя;
• исключение активной физической нагрузки, стресса за 2-3 дня;
• запрет проведения инструментальных методов диагностики, сопровождающихся излучением (рентгенография, компьютерная или магнитно-резонансная томография) за 5-7 дней;
• использование только стерильного контейнера из аптеки для сбора биоматериала.

Как только образец будет собран в контейнер, рекомендована моментальная передача в лабораторию. Максимально на транспортировку должно уйти до 2 часов, чтобы состав микрофлоры не успел измениться.

Метод исследования

Для проведения анализа используют ПЦР-методику, которую начинают проводить сразу после получения биоматериала по этапам:

• из образца фекалий готовят взвесь, которую обрабатывают в лаборатории для получения ДНК микроорганизмов;
• повышают температуру образца до 96°, чтобы в генетическом материале произошло разрушение водородных связей между цепочками ДНК;
• уменьшают температуру образца для проведения других этапов;
• добавляют реагент, в котором содержится праймер, его структура способна встраиваться в участки ДНК, чтобы определить именно тот фрагмент, который необходимо подвергнуть дальнейшим этапам анализа;
• повторный подъем температуры до 72°, введение фермента ДНК-полимеразы, чтобы скопировать выявленный фрагмент микроорганизма многочисленное количество раз;
• исследование подготовленного образца одним из выбранных методов (например, фотокалориметрия или электрофорез), чтобы оборудование идентифицировало точную разновидность микроорганизма и его концентрацию в биоматериале.

В конце анализа происходит распечатка лабораторного бланка. Данные в нем указывают в виде таблицы. В одной графе содержится информация по наличию или отсутствию определенного вида микроорганизма, в другой – его точная концентрация. Также для каждого показателя указывают пределы референсных значений, чтобы сравнить данные, выявив норму или отклонения.

Расшифровка анализа

С полученными данными обращаются к лечащему врачу, который сравнивает их с нормальными значениями, выявляя норму или патологию. Для состава микрофлоры толстого кишечника детей до 14 лет характерны следующие нормальные значения:

• общее количество бактерий (ОБМ) – > 6 Lg (ГЭ/г);
• нормальная микробиота – доля ≥ 80%, разнообразие, количество таксонов ≥ 10 шт.;
• Bifidobacterium spp. – общее количество > 6 Lg (ГЭ/г), метаболически активные виды, доля ≥ 10%;
• Lactobacillaceae – количество > 0,0 Lg (ГЭ/г);
• Bacteroidetes – наличие, соотношение Firmicutes/Bacteroidetes ≥ 1,5;
• дрожжевые грибы – количество < 6,5 Lg (ГЭ/г);
• условно-патогенная микробиота (патобионты) — доля < 20%.

В процессе расшифровки данных важно учитывать не один какой-либо выявленный критерий, а сразу все значения в комплексе. Они тесно взаимосвязаны между собой, оказывают прямое влияние друг на друга. В случае резкого увеличения или снижения показателя за пределы нормы требуется дополнительно учитывать данные других лабораторно-инструментальных анализов, возраст, качество питания, наличие сопутствующих заболеваний, весь анамнез и многие другие факторы. Только врач сможет учесть все перечисленные показатели, чтобы правильно составить диагноз, оценить потребность в терапии и составить представление о качестве работы толстого кишечника.