Анализ авидности антител IgG к цитомегаловирусу

Анализ авидности антител IgG к цитомегаловирусу (CMV) - лабораторный тест, позволяющий оценить степень давности заражения цитомегаловирусной инфекцией. Так, низкоавидные антитела можно обнаружить в биологических жидкостях в течение 3-4 месяцев после первого контакта с чужеродным агентом, после чего они сменяются высокоавидными.
Авидность IgG - это прочность связи иммуноглобулинов класса G с соответствующими антигенами. По ходу развития ответа иммунной системы после первичного заражения IgG постепенно эволюционируют, благодаря чему увеличивается их соответствие антигенам возбудителя, также увеличивается прочность их связи. Таким образом, авидность антител увеличивается.
Цитомегаловирус является представителем семейства вирусов герпеса. Инфицирование происходит при контакте с кровью, мочой, спермой, слюной вирусоносителя. При нормальной иммунной защите первичный контакт с возбудителем протекает практически бессимптомно. Однако этот вирус может стать причиной осложненной беременности и внутриутробных патологий (микроцефалия, церебральная кальфикация, увеличение печени и селезенки).

Зачем нужен тест на авидность антител к CMV?

Скрининг эффективный при:

диагностике заражения цитомегаловирусной инфекцией;
необходимости определения времени первичного инфицирования герпесвирусом 5 типа;
сборе и аналитике сведений относительно давности заражения CMV;
потребности в дифференциальной диагностике раннего заражения цитомегаловирусом, подтверждения / исключения хронического инфицирования, а также активной разновидности CMV в фазе обострения;
необходимости определения наличия либо отсутствия недавнего заражения герпесвирусом 5 типа у женщин, планирующих материнство, или беременных, параллельно с другими анализами на цитомегаловирус.

Предназначение анализа

Показаниями к назначению исследования являются:

необходимость установления периода давности инфицирования герпесвирусом 5 типа на фоне позитивного теста на lgG иммуноглобулины;
важность реализации дифференциальной диагностики риска возвращения инфекции;
необходимость обследования на первичное заражение цитомегаловирусом беременных женщин.

Когда делают анализ авидности антител IgG к цитомегаловирусу

Анализ авидности IgG антител к CMV рекомендуется врачом для подтверждения текущей цитомегаловирусной инфекции либо инфицирования в прошлом. Помимо этого, показаниями к назначению анализа являются:

симптоматика инфекции, которая схожа с цитомегаловирусной;
беременность либо ее планирование для определения возможного риска осложнений, при нарастании симптоматики инфекции либо обнаружении во время УЗИ каких-либо нарушений развития плода;
нарастание симптомов цитомегаловируса у людей с иммунодефицитом: субфебрильная температура тела, боль в горле, увеличение лимфоузлов, воспаление сетчатки, колит и эзофагит;
признаки мононуклеоза при отрицательных результатах на вирус Эпштейн-Барра.

Что включает в себя анализ?

Серологическое исследование на авидность IgG антител базируется на методе разделения низкоавидных и высокоавидных иммуноглоулинов с применением обработки образующихся комплексных структур «антитело-антиген» вызывающим денатурацию белка раствором карбамида. После подобного влияния происходит нарушение связи с антигеном низкоавидных иммуноглобулинов, но при этом сохраняется связь с антигеном высокоавидных антител.

Авидность иммуноглобулинов IgG в диагностируемом образце анализируют при помощи индекса авидности – вычислительного критерия, который характеризуется соотношением результата определения количества антител IgG, включающего фазу обработки диссоциирующим агентом, к показателю вычисления титра иммуноглобулинов IgG без подобной специфической обработки.

В качестве образца биоматериала используется венозная кровь, полученная посредством забора из вены. Низкий критерий авидности показывает вероятность инфицирования герпесвирусом 5 типа за 90-120 дней до проведения манипуляции. Высокий критерий авидности подтверждает инфицирование в период, превышающий 16 недель до обследования. С целью исключения первичного инфицирования при средней величине авидности требуются вспомогательные тесты.

Как проводится анализ

Авидность IgG к цитомегаловирусу определяется путем проведения иммуноферментного анализа сыворотки крови. Медработник проводит венепункцию, после чего помещает кровь в центрифугу. Таким образом, удается отделить сыворотку от плазмы.
Полученную сыворотку разводят и переносят в ячейки ИФА-планшета, на стенках которого закреплен белок цитомегаловируса, то есть антигена. При присутствии в сыворотке соответствующих антител образуются комплексные соединения. После этого в ячейки вносится мочевина, которая способствует ослаблению белковых связей. Если авидность низкая, большая часть иммунокомплексов разрушится. Ячейки промываются, а разрушенные комплексы удаляются.
Следующими вносятся меченные пероксидазой антитела к иммуноглобулинам, которые присоединяются к оставшимся IgG. В результате изменяется окрашивание исходного раствора.
Таким образом, чем выше авидность антител, тем больше IgG останется в ячейках и более интенсивным будет окрашивание раствора. Показатель интенсивности окрашивания определяется спектрофотометром и сравнивается с эталонным значением.

Параллельно проводится такое же исследование, но без добавления мочевины. На основании полученных данных выводится индекс авидности.

Расшифровка анализа

Иммуноглобулины класса G продуцируются иммунной системой в наибольшем количестве. При первичном заражении их титр быстро увеличивается в течение первых недель после контакта с инфекционным агентом.
Результаты анализа приводятся в виде рассчитанного индекса авидности, по которому можно судить о давности инфицирования:

менее 0,15 подтверждает циркуляцию низкоавидных антител, поэтому есть высокая вероятность первичного инфицирования на протяжении последних 4 месяцев;
от 0,15 до 0,25 считается сомнительным результатом, проводится повторный анализ крови;
больше 0,25 наблюдается при присутствии высокоавидных антител, что позволяет исключить первичный контакт с цитомегаловирусом в течение 4 месяцев до обследования.

О чем говорит высокая авидность G антител к цитомегаловирусной инфекции?

Анализ на обнаружение в плазме высокоавидных иммуноглобулинов lgG предназначен для исключения раннего первичного инфицирования возбудителем герпеса 5 типа (CMV).

Основное предназначение теста на авидность – отличить первичное заражение от повторного возникновения инфекции в хронической форме. В момент повторного «пробуждения» хронической инфекции иммуноглобулины lgG отличаются высокой степенью авидности. Высокий показатель авидности указывает на «старость» специфических иммуноглобулинов, что в свою очередь говорит о снижении риска первичного заражения и острой фазы инфицирования.

Причины возможного искажения результатов диагностики

Недостоверное обследование может быть получено в следующих случаях:

При обнаружении у детей возрастом до полугода материнских IgG иммуноглобулинов к CMV (анализ на авидность в этом случае становится проблематичным и нецелесообразным).
При продолжительном периоде болезни с момента раннего заражения возбудителем.
По причине низких тиров lgG антител (ложные показатели диагностики часто встречаются у пациентов с иммунодефицитом, заболеваниями иммунной системы и ВИЧ; для обнаружения у таких людей цитомегаловирусной инфекции предусмотрены вспомогательные скрининги).

Достоверную медицинскую расшифровку результатов анализа нельзя получить при показателе авидности, соответствующему «серой зоне». При сомнителных результатах теста рекомендуется пройти повторную диагностику через 14-28 дней.

Критерии оценки

При низкой авидности показатель антител lgG к цитомегаловирусу находится в пределах 45 %.
При высокой степени авидности показатель иммуноглобулинов lgG превышает или равен 55 %.
Авидность lgG антител в «серой области» составляет 45-54,9 %.

Низкий критерий авидности подтверждает возможность раннего заражения герпесвирусом 5 типа на протяжении последних 12 недель. У иммунокомпетентных больных инфекция диагностируется в среднем через 4-5 месяцев с момента появления первых симптомов. Выявление высокой степени авидности позволяет исключить первичное заражение в период последних трёх месяцев.

В процессе формирования обострения инфекции во времени вероятны индивидуальные потенциальные погрешности. Иногда показатели низкой авидности диагностируются через полгода и позже с момента заражения. Следовательно, низкий критерий авидности не говорит об отсутствии давнишнего заражения.

Преимущества анализа

Полученные в ходе исследования сведения имеют высокую информативность для диагностики пациенток, планирующих беременность, которые до зачатия не сдавали анализ на наличие антител к цитомегаловирусу.

Выявление в плазме иммуноглобулинов lgG не является основанием для определения периода заражения, потому определить вероятность инфицирования ребёнка герпесвирусом 5 типа нет возможности.

Скрининг на авидность антител к CMV упрощает проведение дифференциального обследования обострения инфицирования цитомегаловирусом, а также первичного заражения в ранний период.

Сам по себе факт обнаружения иммуноглобулинов lgG с низкой степенью авидности не может расцениваться как критерий достоверного подтверждения раннего заражения, потому оценивается комплексно в совокупности с результатами других серологических тестов, предназначенных для подтверждения / исключения диагноза «цитомегаловирус».

МЕДИЦИНСКИЕ АНАЛИЗЫ

Авидность IgG к цитомегаловирусу