Гормональное исследование: ПАПП-А-белок

ПАПП-А - ассоциированный с беременностью протеин-А плазмы

ПАПП-А – белок вырабатывается у беременных плазмой крови. Согласно медицинской классификации называется РАРР-А - ассоциированный с беременностью протеин-А плазмы.

Гормональный анализ назначают с целью обнаружения патологических рисков внутриутробного формирования эмбриона в I триместре. Стандартное время проведения исследования: 12 недель.
Низкое содержание белка характерно и для мужской крови, а также выявляется у небеременных. При нестабильной стенокардии наблюдается повышение ПАПП-А-белка. У тех, кто вынашивает ребенка, значение ПАПП-А пролонгировано возрастает, что является нормой.

Что выявляется гормональным исследованием

Анализ является диагностически значимым для пренатальных исследований. Экспериментально и клинически было доказано, что показатели ПАПП-А-белка выступают маркерами хромосомных нарушений формирования эмбриона на первом этапе беременности. Поэтому результаты анализа дают специалистам возможность обнаружения аномальных отклонений хромосомного типа в первом триместре.
Гормональный анализ дает возможность оценить предполагаемые риски развития у плода синдрома Дауна и прочих хромосомных мутаций, предположить угрозу самоабортирования и замирания беременности на раннем сроке.
Диагностически этот анализ важен только в первом триместре, до срока в 12 недель, но по показаниям он может варьироваться от 11 до 14 недель.

Описание анализа

Для проведения анализа делают забор венозной крови. Специфическая подготовка не требуется. Уровень ПАПП-А-белка определяют в корреляции с общими показателями бета-ХГЧ, результатами УЗИ сканирования и учитывая возраст матери. Именно возраст является одним из самых серьезных факторов риска для возникновения предполагаемых патологий. Только комплексный подход позволяет получить достоверные данные и выявить хромосомные мутации в 95% случаев.

Важность исследования

В процессе формирования оплодотворенной яйцеклетки могут наступить хромосомные мутации, которые приводят к тяжелым генетическим патологиям. Важно выявить отклонения на ранних этапах развития при помощи лабораторных анализов. Один из них – оценка белка PAPP-A. Доказано, что его концентрация резко изменяется у беременных женщин в случае, если наблюдаются хромосомные патологии.

Анализ необходим для получения следующей информации:

• общая оценка состояния беременности;
• риск самопроизвольного прерывания беременности, выкидыша;
• определение риска развития синдрома Дауна, при котором развивается умственная отсталость, пороки внутренних органов, внешние дефекты;
• риск синдрома Патау, сопровождающегося расщелиной губы и неба, лишними пальцами на конечностях, неправильным развитием половых органов, отклонениями в развитии головного мозга, глаз и других органов;
• риск синдрома Корнелии де Ланге – наличие пороков развития со стороны множества внутренних органов;
• оценка состояния плаценты, возможность недостаточности ее функций;
• недостаточный набор массы тела плодом;
• отслеживание течения беременности в случае, если на ранних сроках были выявлены отклонения со стороны этого белка.

Максимальный период проведения теста – 14 недель. Если выполнять это исследование на более поздних сроках, достоверную информацию можно не получить, также присутствует риск постановки неправильного диагноза.

Назначение на исследование выдает лечащий врач (гинеколог), который ведет беременность женщины. Анализ проводят только для женщин, вынашивающих плод. Для других людей он не имеет диагностической значимости.

Предварительная подготовка

Тщательной предварительной подготовки к исследованию не требуется. Достаточно выполнить небольшой перечень рекомендаций:

• щадящий режим питания накануне анализа, рекомендуется исключить жирную пищу за 1 сутки;
• отсутствие тяжелых физических нагрузок и психоэмоционального напряжения, эти факторы способствуют выбросу в кровь большого количества биологически активных веществ;
• отсутствие употребления алкоголя за 2 суток;
• запрет курения за 1 час до сдачи крови.

Процедура сбора биоматериала простая. Для этого сдают венозную кровь в утренние часы. Предварительно недопустимо употреблять пищу на протяжении 8 часов, разрешено пить чистую и негазированную воду. После сдачи крови ограничения снимаются.

Особенности анализа

Для анализа венозной крови по обнаружению белка PAPP-A характерны следующие особенности:

• белок выделяется в плазму крови, поэтому для исследования проводят центрифугирование или добавляют разделительный гель, чтобы получить биологическую жидкость из цельной венозной крови;
• если возраст плода определен неправильно, тест покажет ложноположительный или ложноотрицательный результат, в зависимости от периода гестации;
• для оценки результата используют твердофазный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ, который по-другому именуется «сэндвич-методом»;
• суть теста сводится к образованию комплексов антиген-антитело, отмыванию лишних компонентов и вторичному связыванию иммунных комплексов, чтобы с точностью определить содержание биомаркера;
• анализ проводится на полуавтоматическом оборудовании, которое отслеживает точный уровень белка, поэтому результаты всегда получаются достоверными, по ним можно руководствоваться в ходе определения диагноза;
• обычно тест выполняют однократно, но если выявлены отклонения, может потребоваться измерять белок в динамике, чтобы отслеживать течение беременности (например, при выявлении фетоплацентарной недостаточности).

Анализ   назначают в профилактических целях каждой беременной женщине до 12-14 недель. Он входит в обязательный план диагностики.

Метод исследования

При выявлении белка PAPP-A используют твердофазный хемилюминесцентный иммуноферментный анализ. Тест сложный, проводится по этапам.

1. Полученный образец плазмы крови подготавливают для обработки. Его отбирают лабораторным шприцем с одноразовым наконечником, который меняется для каждой пациентки.
2. Подготовка реагента. Для этого в планшет опускают твердую фазу. На ней должны содержаться одни из видов антител – моноклональные, афинно-очищенные поликлональные.
3. Соединение плазмы с реагентом. Достаточно добавить к твердой фазе 1 мл плазмы крови. Для проверки точности результата рядом ставят контрольный образец с положительной и отрицательной пробой. Опытный образец размещают в инкубатор для быстрого образования иммунных комплексов. Затем проводят процедуру отмывания, чтобы не связавшиеся частицы устранились из биоматериала.
4. Внесение конъюгата. На этот раз используют те же виды антител, но с учетом добавления меченого фермента. Затем проводят повторную инкубацию и промывку.
5. Внесение субстрата. Благодаря ему происходит окрашивание образца. Для быстрого достижения результата проводят повторную инкубацию.
6. Оценка показателя в полуавтоматическом аппарате ИФА-ридер. Его действие основано на пропускании световых лучей, отражающихся только от иммунных комплексов. Длину этих лучей подбирают с учетом выявляемого показателя.

Для проведения теста достаточно 1-2 дней. Период выдачи результатов зависит от загруженности лаборатории.

Важные критерии

При проведении лабораторного теста важно учитывать следующие критерии:

• риск увеличения белка PAPP-A возможен при наличии двух или более плодов, но это не указывает на хромосомную аномалию (поэтому результаты для пациентки с многоплодной беременностью оценить очень сложно);
• на основании только этих данных невозможно с точностью определить хромосомную патологию плода или дефекты беременности, требуется дополнительно учитывать симптоматику, наследственность, данные других исследований;
• если уровень белка PAPP-A находится в пределах нормы, проведение инвазивных диагностических процедур при беременности недопустимо, так как они несут опасность, поэтому риск не оправдан.

Результаты должен оценивать только лечащий врач. Если выявлены отклонения, требуется дополнительная консультация с генетиком.

Норма и интерпретация результатов

Абсолютной нормы для показателей белка ПАПП-А не существует. Даже если результаты демонстрируют отклонение от среднестатистических показателей, это еще не говорит о безоговорочном пороке развития.

Показатели нормы концентрации белка ПАПП в кровяной сыворотке при скрининге врожденного порока равна:

• 8 недель - 1,86 мг/л;
• 9 недель - 3,07 мг/л;
• 10 недель - 5,56мг/л;
• 11 недель - 9,86 мг/л;
• 12 недель - 14,5 мг/л;
• 13 недель - 23,4 мг/л;
• 14 недель - 29,1 мг/л.

Причины повышения белка ПАПП-А:

• многоплодная беременность;
• крупный плод и увеличенная масса плаценты;
• низкое расположение плаценты.

Пониженные показатели белка ПАПП-А свидетельствуют о:

• риске развития хромосомных отклонений у эмбриона;
• синдромах Дауна, Эдвардса, Ланге и Корнели;
• угрозе прерывания беременности;
• замирании плода.

Если результаты исследования демонстрируют очень низкие цифры, то у ребенка в 100% случаев диагностируется трисомия 18.

ПАПП-А тест относится к диагностически важным белковым анализам, необходимым для установления хромосомных патологий плода. Однако результаты можно использовать только комплексно с АПФ, ТБГ, ХГЧ и иными белками.