ПЦР диагностика гепатита - А, В, С.

Алексеев Андрей Викторович
Алексеев Андрей Викторович Врач клинической лабораторной диагностики,

ПЦР диагностика гепатита - А, В, С, качественный, количественный и генотипирование


ПЦР диагностика гепатита - А, В, С. Методы: качественный, количественный и генотипирование.
С проблемой поражения печени вирусной природы может столкнуться доктор любой специальности. Вирусные гепатиты сегодня - это очень важная проблема для здравоохранения всего мира. Их диагностика проводится с учетом клинических проявлений, инструментально-аппаратных (УЗИ, фиброскан) методов, лабораторных данных анализов крови и мочи. Особое место занимают специфические иммунодиагностические методы.

Что такое ПЦР- диагностика гепатитов


ПЦР - полимеразная цепная реакция, это современный и точный метод диагностики инфекционных болезней, заключается в поиске фрагментов ДНК возбудителя. Его проводят в тех случаях, когда иммуноферментный метод показал сомнительный результат, с помощью ПЦР находят:
  • вирус гепатитов А, В, С;
  • вирус герпеса;
  • вирус Эпштейна-Барра;
  • микробактерию туберкулеза;
  • хеликобактер пилори;
  • вирус иммунодефицита.

Различают такие молекулярно-биологические методы анализа:
  1. Качественное выявление ДНК/РНК  - определение наличия или отсутствия возбудителя;
  2. Количественное выявление ДНК/РНК (в реальном времени) - высчитывают количество микроба;
  3. Генотипирование (секвенирование) - выявление генотипа, субгенотипов и определение нуклеотидной последовательности вирусного генома.

Виды гепатитов


Вирусные гепатиты - группа заболеваний, которая включает в себя самостоятельные (гепатит А, В, С) формы, имеющие свой механизм развития болезни, клинические и эпидемиологические особенности. Все эти инфекции объединены резко выраженными проявлениями поражения печени.

Заподозрить заболевание можно по трем основным симптомам
:
  • чувство тяжести и боль в правом подреберье;
  • увеличение печени;
  • окрашивание слизистой, склер, кожи в желтый цвет (желтуха).
Гепатит А (генотип НАV) - это острое воспаление печени, которое передается энтеральным (орально-фекальным) путем, чаще всего предполагают у детей и молодого населения. Характерно: отсутствие аппетита, моча больного становится темного цвета, кал - бесцветным. Это легкий вид гепатита - полное выздоровление и восстановление деятельности печени наступает спустя два месяца.

Гепатит В (генотип HBV) и С (генотип HCV) - это парентеральные вирусные инфекции. Передаются половым путем, при бытовых гемо (кровяных) контактах, медицинских и немедицинских (вне стен лечебного учреждения, очень часто - это салоны татуажа) инъекциях, от мамы к ребенку.

Симптомы гепатита В могут носить «стертый» характер, желтуха развивается постепенно в течение 3-6 недель, характерным признаком являются боли в суставах - затрагивается иммунная система. Заболевание опасно осложнениями: острая печеночная недостаточность.

Гепатит С называют «ласковым убийцей», по клинической картине он напоминает легкое проявление гепатита А. 80% больных не обращаются к врачу и переносят болезнь «на ногах», и инфекция приобретает хроническую форму и вирус-носительство. Хроническая форма опасна перерождением в цирроз печени и рак печеночных клеток.

Когда назначается анализ на ПЦР и как к нему подготовиться


Гепатит может проходить без симптомов и переходить в более тяжелую - хроническую форму. С помощью ПЦР его можно определить на самой ранней стадии, это способствует скорейшему и благоприятному излечению.

Анализ может назначить терапевт, врач - инфекционист при таких симптомах как:

  • похудение, слабость;
  • горечь во рту;
  • кожный зуд;
  • тяжесть и боль в эпигастрии.
Биоматериал для исследования -  кровь из вены.

Перед анализом нужно пройти специальную подготовку:
  • за две недели до анализа прекратить антибактериальную терапию - антибиотики могут влиять на достоверность исследования;
  • ограничить жареную, жирную пищу, спиртные напитки;
  • ужинать накануне не позже 20 часов;
  • кровь сдавать утром с 8 до 10 часов, нежелательно даже пить воду, за 1 час до анализа не нужно курить.

Нормы и интерпретация результатов


Анализ на ПЦР  гепатита - А, В, С.

Качественный анализ выявляет наличие вируса в крови, его результат:
  • «обнаружено» означает, что в биоматериал выявлен фрагмент ДНК, характерного для вируса гепатита;
  • «не обнаружено» - это нормальное значение в анализе здорового пациента.
С помощью количественного анализа ПЦР выявляется уровень концентрации вируса в крови, параметры измеряются в цифрах.

Общепринятые нормы исследования: 400 тыс. МЕ/мл - 800 тыс. МЕ/мл. В результатах анализа может стоять:
  • «ниже диапазона измерения» - это значит, что вирус присутствует в организме в мало количестве;
  • «не обнаружено» - тест не обнаружил в пробах вирус;
  • «выше диапазона измерения» - высокая вирусная нагрузка.
Количественный анализ важен для оценки успешности и сроков проведения противовирусного лечения.

Генотипирование направлено на определение клинически значимых генотипов HCV (гепатита С). Результаты теста позволяют определить прогноз заболевания, предсказать длительность лечения.

Несмотря на успехи медицины, распространение болезней, связанных с поражением печени, остается очень высоким. В этой ситуации особое значение имеет современная лабораторная диагностика вирусных гепатитов, понимание патогенеза заболевания, форм течения болезни и стадий иммунного ответа.