Антитела к иерсиниям

Анализ на антитела к иерсиниям (03, 09)

Серологический анализ крови на антитела к иерсиниям биоваров 03, 09 считается маркером заражения больного 2 подвидами микроорганизмов рода Yersinia enterocolitica, которые провоцируют развитие иерсиниоза. Поражают они чаще всего слизистую пищеварительных органов, в частности желудка и кишечника.
 
Иерсиниозом называется острое бактериально-инфекционное заболевание, которое сопровождается токсико-аллергическими реакциями. Основной путь заражения человека фекально-оральный при употреблении загрязненной воды и продуктов питания, содержащих бактерии Yersinia enterocolitica. Источниками инфицирования могут стать коровы, свиньи, собаки. Период инкубации возбудителя длится не больше 7 дней. У взрослых часто протекает практически бессимптомно. Окончательный диагноз устанавливается только после обнаружения антител в биологических жидкостях больного.

Показатели 03, 09 в исследовании на иммуноглобулины к иерсиниозу диагностируются как маркеры заражения определёнными разновидностями бактерии кишечной формы иерсиниоза.

Патогенный микроорганизм иерсиниоза относится к грамотрицательным внутриклеточным бактериям, имеющим 31 серотип. Интестинальный иерсиниоз в основном провоцирует возбудитель Yersinia enterocolitica 03 и 09 сероваров. Подавляющее большинство изолятов причисляется именно к 03, 09 серотипам, первому из которых (03) свойственна высокая степень энтеротоксичности, в то время как второму (09) – высокая инвазивность.

Yersinia Enterocolitica 03 серовара содержат плазмиды патогенности, из-за чего чаще провоцирует распространение инфекционного процесса по всему организму. Этот возбудитель преимущественно поражает ЖКТ.

Когда делают анализ

Основными показаниями к назначению анализа на антитела к Yersinia enterocolitica являются:

• диагностика иерсиниоза при нарастании характерных симптомов в виде общетоксического синдрома, кожной сыпи в виде пятен с папулами, расстройства работы кишечника, обострения аппендицита, гепатоспленомегалии, артропатического синдрома;
• острая форма гастроэнтерита неясного генеза.

Для проведения анализа на антитела к иерсиниям требуется сыворотка крови обследуемого. Забор биоматериала осуществляется медработником путем венепункции. Кровь переносят в специальную пробирку и центрифугируют. Благодаря этому, происходит расслоение сыворотки и компонентов плазмы.

Дальнейшее серологическое исследование направлено на обнаружение антител в сыворотке крови. При этом определяются IgM, IgG, IgA. В крови антитела к иерсиниям можно обнаружить только через 5 дней после появления характерных признаков острой кишечной инфекции, максимальный титр наблюдается на 2-3 неделе инфицирования. При этом иммуноглобулины класса M перестают определяться в биоматериале к концу 4 месяца, IgA  - к концу 6 месяца, IgG могут выявляться через несколько лет после перенесения инфекции.

Основой серологической диагностики является реакция агглютинации с аутоштаммами бактерий. По ходу реакции можно выявить иммуноглобулины класса G и M. Более высокая точность полученных результатов обеспечивается положительной динамикой титров агглютинов.

Специально готовиться к процедуре пациенту не нужно. Процедура проводится утром, желательно не есть в течение 8 часов до манипуляции. Следует отказаться от употребления спиртных напитков за сутки до проведения анализа.

Рекомендации относительно специфики проведения исследования

Специальных требований к проведению диагностики нет.

• Биоматериал для анализа целесообразно отбирать по истечении минимум 6-ти часов с момента последнего употребления еды.
• За 60 мин до диагностики пациентам рекомендуется исключить факторы, способные прямо или косвенно оказывать влияние на результаты исследования (вредные привычки, стресс, усталость, физическое напряжение).
• За сутки-двое до предполагаемой даты обследования исключить из рациона алкоголь и жирные блюда.
• Принимая лекарственные препараты, следует уведомить лечащего врача и лаборанта диагностического центра относительно целесообразности выполнения анализа на фоне терапии медикаментами либо их отмены. Продолжительность периода отмены лекарств устанавливается с учётом длительности их выведения из организма (в большинстве случаев, доктора рекомендуют сдавать тест по истечении 4-5 периодов полувыведения медикамента, обозначенного в инструкции).
• В случае когда приём какого-либо лекарства жизненно необходим и отменить его нельзя, информацию об этом необходимо сообщить лаборанту, проводящему исследование.
• Перед выполнением анализа детям младше 5 лет, обязательно перед манипуляцией (за 30 мин до проведения исследования) давать им тёплую кипяченую воду в объёме 150-200 мл жидкости.

Зачем нужен анализ?

Постановка заключения «иерсиниоз» ставится в соответствии с установленными высокими либо резко возрастающими концентрациями иммуноглобулинов в реакции пассивной гемагглютинации либо иммунологии (агглютинации) с корпускулярными антигенами из эталонных штаммов патогена соответствующих серогрупп (обычно 09 и 03). Данный анализ имеет низкую значимость из-за аккумуляции перекрёстно взаимодействующих иммуноглобулинов, индивидуальных свойств ответной иммунной реакции организма, а также скрытого периода возникновения иммунитета.

Анализ на иммуноглобулины к иерсиниозу рекомендован пациентам с целью:

• подтверждения / исключения диагноза «иерсиниоз»;
• диагностики острой формы гастроэнтерита неизвестного происхождения;
• выяснения причин напоминающих аппендицит болей в животе;
• подтверждения бактериального артрита на фоне перенесённой ранее кишечной инфекции.

Наиболее содержательным является диагностика различных типов антител (A, M, G классов) к генетически чужеродным антигенам патогенности иерсиний, в частности методом ИФА либо с помощью высокочувствительного иммуноблоттинга.

Анализ назначается как для уточнения постановки диагноза «иерсиниоз», выявления других зоонозных инфекций (бруцеллёза, псевдотуберкулёза) на фоне схожей с иерсиниозом симптоматики, так и с диагностической целью обнаружения вышеупомянутых болезней в районах с неблагоприятной эпидемиологической обстановкой и установления факта заражения в прошлом (за последние полгода). В отличие от микробиологических исследований, данный тест является наиболее точным.

Стадии проведения исследования

Обнаружение в сыворотке иммуноглобулинов классов G, A, M происходит посредством эритроцитарного анализа с вовлечением специфических антигенов. Диагностируются парные пробы крови: впервые тест осуществляется на 7-е сутки от начала болезни, в дальнейшем – после 21-го дня. Соотношение концентрации 1:200 и выше либо прирост антител в 4 и более раза по истечении семи суток подтверждает заражение.

Чтобы получить реакцию взаимодействия комплемента РСК, лаборант вносит к образцам плазмы с антителами соответствующие реагент и комплемент (совокупность принимающих в формировании устойчивой реакции иммунитета белков). В основе позитивной реакции связывания комплемента лежит взаимодействие с первоначально формирующимся составом «антиген-антитело», из-за чего реагент не претерпевает никаких изменений (окраска образца в пробирке сохраняет тёмно-красный оттенок).

Позитивная РСК свидетельствует о способности организма противодействовать заражению (высокой степени готовности иммунной системы бороться с инфекцией посредством комплекса защитных белков, обеспечивающих поглощение патогенных бактерий макрофагами).

Негативный результат РСК подразумевает отсутствие формирования комплекса «антиген-антитело», в результате чего под влиянием группы глобулярных белков происходит разрушение реагента, что является подтверждением низкого иммунитета организма против заражения иерсиниозом.

Расшифровка анализа

• В норме титр антител не должен превышать 0,8 Ед/мл. Это отрицательный результат, который подтверждает отсутствие инфицирования иерсиниозом.
• Концентрация антител от 0,8 до 1,1 Ед/мл является сомнительным результатом. В таком случае через 2 недели следует сдать анализ повторно.
• Титр больше 1,1 Ед/мл  -  положительный результат, который наблюдается при текущей инфекции либо инфицировании Yersinia enterocolitica в прошлом.

Более подробную интерпретацию результатов анализа на антитела к иерсиниям с назначением соответствующего лечения проведет врач.