Бакпосев с поверхности раны на микрофлору

Алексеев Андрей Викторович
Алексеев Андрей Викторович Врач лабораторной диагностики,

Посев отделяемого раны с определением чувствительности к антибиотикам и бактериофагам

Бакпосев с поверхности раны на микрофлору – это специфическое микробиологическое исследование, направленное на обнаружение населяющих рану патогенных микробов, их вида, количества, качества, а также на определение восприимчивости к антибактериальным средствам, обеспечивающих результативное лечение.

Условно-патогенная биота, грамположительная флора, представленная кокками, и вредные микроорганизмы являются наиболее распространёнными причинами возникновения гнойно-воспалительных усугублений в зоне травматических повреждений кожи.

Анализ выполняется посредством культурального помещения биоматериала в условия питательной среды (высевание) с поддержанием в ней определённого температурного режима, характеризуется высокой специфичностью, требует ожидания роста микрофлоры.

Забор отделяемого из раны проводят перед назначением эмпирической антибактериальной терапии. Предшествующая антибиотико- или антимикотическая терапия может стать причиной получения ложноположительного результата.

Что подразумевает определение чувствительности к бактериофагам и антибиотикам?

Восприимчивость патогенов к антибактериальным средствам – это своеобразный лабораторный тест, главная задача которого заключается в расчёте чувствительности плохих микроорганизмов, полученных в ходе забора биоматериала, к установленному перечню противомикробных препаратов с целью определения наиболее эффективного медикамента, действующий состав которого можно использовать для лечения инфекционных воспалительных заболеваний у пациентов с ранениями. За счёт своеобразного высевания на специфические субстраты удаётся обнаружить специфику размножения определённых микроорганизмов среди всей возможной флоры.

Питательные субстраты готовятся на основании типовых базисных компонентов с добавлением к ним особых питательных соединений (сложного фосфопротеида казеина, жидкостной сыворотки, крови и пр.). Определение восприимчивости к антибактериальным препаратам способствует определению резистентности и чувствительности определённого возбудителя к группе антимикробных лекарств.

Определение восприимчивости к бактериофагам – это микробиологический тест, ориентированный на обнаружение неких бактериофагов, к которым способны проявлять чувствительность вредные бактериальные клетки. Сам термин «бактериофаги» подразумевает вирусы бактерий, способные вторгаться в бактериальные клетки и полностью съедать их.

Кому и когда назначают анализ?

Анализ рекомендован пациентам, нуждающимся в установлении разновидности микробиоты, обсеменяющей поверхность раны, в определении степени чувствительности к антибиотикам с целью назначения лечения, в оценке результативности терапии антимикробными средствами.

К исследованию целесообразно прибегать при необходимости:

  • проведения диагностики возможной инфекции;
  • оценки состояния ран после укуса;
  • диагностирования инфекционных болезней кожи, в т. эризипелоида;
  • своевременно, быстро распознать возможного патогена, вызванного инфекционным генезом;
  • выявления возбудителя гнойно-воспалительных ран (в частности, язв, ожогов, открытых инфицированных гнойников, пролежней);
  • подтверждения / исключения диагноза «целлюлит» (воспаление подкожно-жировой клетчатки);
  • составления схемы эффективной терапии в зависимости от выявленной в ране микрофлоры;
  • подбора антибактериальных препаратов для быстрого устранения инфекции.

Как правильно подготовиться к анализу?

Чтобы получить максимально точные результаты диагностики пациенту и врачу следует придерживаться определённых правил, позволяющих исключить ложные сведения:

  1. Нельзя вводить антибактериальные препараты и медикаменты с антисептическим действием местно, перорального или в виде инъекций.
  2. Запрещено промывать рану и окружающие её ткани любыми обеззараживающими растворами, в т. ч. антисептическими жидкостями, поскольку орошение травмированной зоны даже обычной водой может смыть часть вредоносных микробов и повлечь за собой ложноотрицательные результаты анализа.
  3. Нельзя механически очищать рану, удалять выделяющееся из её полости содержимое (кожераневой секрет должен сохраняться на поверхности, поскольку именно он содержит значительное количество патогенной микрофлоры).
  4. Следить за тем, чтобы с момента последней гигиенической манипуляции до проведения исследования прошло не менее 24 часов.

Придерживаясь данных рекомендаций, можно получить достоверные показатели, исключая неправдоподобность теста. Так как забор биоматериала для анализа осуществляется местно, проведение дополнительных исследований не требуется.

Метод исследования

Сразу же после взятия образца содержимого раны выполняется 3-этапная диагностика:

  1. Высевание биоматериала на питательный субстрат. Благоприятную для развития микроорганизмов почву (питательную среду) разделяют на несколько зон, каждую из которых засевают взятым из раны секретом. Разграничение на области нужно, чтобы в дальнейшем можно было быстро подобрать определённый антибиотик и оценить его эффективность на конкретного возбудителя инфекции. По окончании высевания биоматериала выжидается временной промежуток (как правило, до 72-96 часов). По истечении этого времени оценивается степень роста бактерий (если таковой имеется). Размножение микроорганизмов может протекать нормально, либо в высоком / низком титре. Результаты диагностики заносятся в специальный лабораторный бланк.
  2. Микроскопия (оценка содержимого с помощью микроскопа). Незначительное количество гнойного содержимого из раны, образовавшееся на питательном субстрате, тонким слоем распределяется на стерильном предметном стекле, после чего осматривается лаборантом диагностического центра под микроскопом большого увеличения. В процессе анализа подтверждается / опровергается наличие вредоносных штаммов микробиоты, различных видов бактерий. Как раз на этой стадии можно установить специфику титра их содержания (среднее, минимальное или высокое количество).
  3. Определение степени восприимчивости к противомикробным средствам (антибиотикам). Данный анализ проводится лишь для тех зон микробиоты, в которых отмечался обильный её рост. При диагностике используются все типы лекарственных препаратов, отличающихся антибактериальной активностью. В ходе исследования устанавливается, какие из медикаментов оказывают на выявленного патогена высокое, низкое или среднее влияние.

Все сведения, полученные во время проведения анализа, указываются в специальных графах бланка лабораторного заключения, который по завершении диагностики выдаётся на руки врачу или пациенту. Ознакомившись с результатами анализа, врач подбирает необходимый антибиотик для уничтожения инфекции с учётом того, чтобы действующее вещество не спровоцировало побочные реакции у пациента и не вызвало привыкания бактерий к медикаменту.

Расшифровка анализа

Результаты бактериологического исследования отделяемого раны содержат информацию относительно отсутствия / наличия инфекции, разновидности и рода патогенной микрофлоры, количества условно-патогенных микроорганизмов, степени устойчивости и восприимчивости высеянной биоты к различным антибактериальным препаратам.

Различают 4 стадии размножения патогена. I и II фазы характеризуются весьма слабым ростом и скудным количеством. Слишком низкие титры возбудителя не рассматриваются в качестве диагностического критерия из-за низкой информативности. III и IV стадии обсеменённости являются этиологически весомыми.

Выявление восприимчивости к антибиотикам не осуществляется при обнаружении размножения здоровой микробиоты, условно-патогенных микроорганизмов в незначительном количестве, неопасном для человека, т. к. не несёт никакой диагностической ценности.

Поскольку обнаруженные вредоносные микроорганизмы подвергаются влиянию различных антибактериальных средств, то к каждому из них устанавливается степень восприимчивости. Результат исследования может показывать:

  • нулевую чувствительность (в этом случае указанные медикаменты использовать нельзя, т. к. они не дают нужного эффекта терапии и могут вызвать у бактерий устойчивость к тому или иному лекарству);
  • среднюю восприимчивость (использование данных препаратов нежелательно, поскольку погибает только часть микрофлоры, остальные микроорганизмы продолжают находиться в ране);
  • высокую чувствительность (идеально подходящие для борьбы с возбудителем средства, которые должны назначаться в правильной дозировке лечащим врачом).

Неправильно подобранные дозировки медикамента чреваты развитием осложнений. Так в случае низкой дозы лекарства мгновенно развивается резистентность к назначенному препарату. Очень высокие концентрации действующего вещества губительны возникновением на местном и системном уровне побочных реакций у пациента.

В связи с продолжительностью размножения микроорганизмов в питательном субстрате ожидание результатов анализа на бакпосев секрета раны может затянуться до 7 дней. Однако в дальнейшем правильно подобранная терапия даёт очень хороший результат и способствует быстрому выздоровлению.