Посев на грибы (анализ мокроты)

Диагностика грибковых инфекций дыхательных путей

Посев мокроты на грибы — это микробиологическое исследование для выявления и идентификации грибковых патогенов в нижних дыхательных путях. 

Ключевые аспекты:

1. Кому нужно сдавать? Исследование показано пациентам с длительным кашлем, кровохарканьем, болью в груди и неэффективностью стандартной антибактериальной терапии, особенно иммунокомпрометированным лицам (с ВИЧ, онкологическими заболеваниями, после трансплантации органов).

2. Что выявляет? Обнаруживает патогенные грибы (Candida spp., Aspergillus spp., Cryptococcus neoformans) в мокроте, оценивает их концентрацию и резистентность к лекарствам.

3. Как проводится? Мокрота собирается утром после туалета полости рта, транспортируется в лабораторию и высевается на питательные среды с последующей микроскопией и идентификацией колоний.

4. Зачем нужен? Анализ диагностирует микозы легких и бронхов, включая кандидоз, аспергиллез и пневмоцистоз, определяя вид гриба и его чувствительность к антимикотическим препаратам.

5. Нормы и отклонения:

Источники:

1. Никола М. Парри Новые рекомендации по лечению аспергиллеза (2016)
2. У. В. Лукаш, А. В. Власова, В. В. Горев, О. А. Тиганова, А. А. Быстрова, М. М. Каменев, К. А. Хасанова, Н. П. Денисенко, Д. А. Сычев Опыт внедрения протокола у детей с риском инвазивного микоза (2024) Научный медицинский журнал РНИМУ имени Н. И. Пирогова

Подробнее об этом — ниже:

Посев на грибы (посев отделяемого дыхательных путей мокрота) – лабораторный метод диагностики, определяющий наличие или отсутствие грибковой инфекции в отделяемом из респираторного тракта. Исследование оценивает точную локализацию инфекции, для этого могут понадобиться дополнительные инструментальные методики. Благодаря тесту одновременно оценивают точный состав микрофлоры и подбирают оптимальные препараты, которые быстро вызовут эффект. Особенно важно проводить такое исследование при инфекционно-воспалительных заболеваниях дыхательной системы, так как отсутствие своевременного лечения приводит к дальнейшему распространению патогенного микроорганизма вплоть до альвеол легких.

Для чего необходим анализ

Посев мокроты на грибы необходим для получения следующих данных:

• оценка микроскопического состава мокроты, при этом патогенные микроорганизмы могут присоединяться на различных участках – легкие, бронхиальное дерево, трахея, зев;
• дифференциальная диагностика между бактериальной и грибковой инфекцией, так как эти патологии сопровождаются схожей симптоматикой, но отличаются лечением;
• оценка точной разновидности грибковой инфекции, а также определение ее количественного содержания;
• выявление патогенных грибов, которые в норме не должны содержаться в респираторном тракте;
• определение чувствительности грибковой инфекции к разным группам лекарственных средств, чтобы подобрать оптимальный препарат для лечения;
• исключение приема препаратов, к которым грибок не имеет чувствительности, чтобы не допустить усугубления патологического процесса;
• исключение употребления противогрибковых препаратов с низкой степенью чувствительности, такое лечение уничтожит лишь часть инфекции, поэтому со временем болезнь может развиться повторно.

Благодаря исследованию получают сразу несколько видов информации, что значительно упрощает диагностику и назначение оптимальных методов терапии. Врачи рекомендуют первоначально проводить исследование. Но в данном случае инфекция может быстро опускаться вниз по респираторному тракту, поэтому до момента получения результатов уже начинают терапию. Как только результаты будут получены, ее смогут откорректировать в нужном направлении, чтобы быстро наступило выздоровление.

Показания для анализа

Посев мокроты на грибы проводят при наличии следующих показаний:

• наличие негативной симптоматики, указывающей на инфекционное поражение респираторного тракта – продуктивный кашей (первоначально он может быть сухим), повышение температуры тела, покраснение и боль в горле, интоксикация организма (сопровождается ломотой в теле, головной болью, недомоганием), боль за грудиной, тяжелое дыхание;
• сохранение негативной симптоматики после антибактериальной терапии, что свидетельствует о возможном риске присутствия других патогенных микроорганизмов, в том числе грибов;
• сниженная функция иммунитета на фоне соматических патологий, иммунодефицита врожденного или приобретенного типа (недостаточность иммунитета часто приводит к грибковому поражению различных участков организма);
• продолжительное употребление препаратов, подавляющих активность иммунитета (глюкокортикостероиды, цитостатики);
• первоначальное содержание грибковой инфекции в полости рта или ЛОР-органах, откуда она могла спуститься в дыхательную систему, вызвав вторичное заражение;
• завершение терапии грибковой инфекции респираторного тракта с потребностью проверки эффективности и исключения риска рецидива.

Важно помнить, что в дыхательной системе может присутствовать небольшое количество грибковых микроорганизмов, которые выделяются вместе с мокротой. Но если их концентрация возрастает за пределы референсных значений, это показание к проведению анализа и фунгицидной терапии.

Как подготовиться к анализу

Перед сбором мокроты для исследования пациент должен пройти предварительную подготовку, чтобы результаты были достоверными:

• исключение употребления антибактериальных, антисептических, противогрибковых препаратов за 5-7 дней до исследования;
• отказ от употребления других лекарственных средств, которые могут повлиять на состав микрофлоры респираторного тракта минимум за 1 неделю (например, на фоне употребления стероидов концентрация грибка резко возрастает);
• запрет орошения зева местными антисептическими, растительными и иными средствами в день сбора биоматериала;
• отказ от употребления пищи с утра и вплоть до сбора образца;
• исключение употребления жидкости за 1-2 часа;
• допустима чистка зубов, но при отсутствии полоскания полости рта и горла стоматологическими растворами;
• запрет курения за 1 час до исследования.

После завершения терапии может потребоваться повторить исследование. Тогда все перечисленные правила используют повторно. Запреты, ограничения исключают сразу после сбора биоматериала, эту процедуру осуществляет медсестра.

Метод исследования

Пациент приходит в назначенное время в процедурный кабинет. Медсестра предоставляет стерильную емкость, куда он должен откашляться. Затем контейнер сразу же плотно закручивают крышкой, чтобы внутрь не просачивались посторонние микроорганизмы и иные вещества. Биоматериал доставляют в лабораторию, где приступают к посеву.

1. Заполнение питательной среды. Используют среду на основе агар-агара, которым заполняют чашки Петри. За счет содержащихся питательных веществ рост микрофлоры происходит в короткие сроки. Мокроту распределяют по поверхности среды, затем обеспечивают необходимые условия. Для этого сверху устанавливают крышку, настраивают свет, влажность и температуру. Даже в благоприятных условиях рост микроорганизмов может наблюдаться около 3-4 дней. Затем будут образованы колонии микроорганизмов с округлой формой.
2. Изготовление микропрепаратов. В мокроте содержится множество микроорганизмов, для их определения создают микропрепарат, подлежащий микроскопии. Небольшое количество выросшей микрофлоры размещают на предметное стекло. Сверху капают спирт для предотвращения дальнейшей жизнедеятельности микроорганизмов. Его смывает только дистиллированной водой. Затем наносят краситель, который выдерживают до 30 минут, после чего смывают проточной водой. Таким методом приготавливают 3-5 стекол. Их оставляют в естественных условиях при отсутствии распространения прямых солнечных лучей, чтобы просушить окрашенную зону.
3. Просмотр под микроскопом. Каждое стекло по очереди устанавливают под микроскопом, просматривая содержимое первоначально на дальнем увеличении для оценки общего состава микрофлоры. Затем выбирают окуляр с иммерсионным маслом, чтобы в точности рассмотреть морфологию клеток. При обнаружении грибковой инфекции проводят ее точный расчет на автоматическом анализаторе.
4. Определение чувствительности грибов к фунгицидным средствам. Это завершающий этап исследования, при котором готовят диски, пропитанные разными действующими веществами противогрибковых препаратов. Их прикладывают к поверхности выросших микроорганизмов. Засекают время. После его истечения диски убирают, определяя, какая часть микрофлоры подверглась некрозу. Данные фиксируют в таблице.

Результаты выдают пациенту или врачу в удобной форме. Внутри содержатся данные по всем выявленным грибкам, их точному количеству и чувствительности к разным действующим веществам фунгицидных средств.

Расшифровка анализа

В норме в мокроте может присутствовать небольшое количество грибковых микроорганизмов. Но эти значения не должны превышать 104 КОЕ. Только в таком случае исключают грибковую инфекцию респираторного тракта. При ее выявлении определяют чувствительность к фунгицидным средствам, которая бывает в следующей форме:

• отсутствие – грибок резистентен к действующему веществу препарата, его недопустимо применять для лечения;
• низкая – препарат уничтожает лишь части инфекции, оставшийся грибок может спровоцировать рецидив воспалительного процесса;
• высокая – оптимальный препарат для лечения, который полностью уничтожает выявленной грибок.

Врач должен назначать препараты, руководствуясь результатами исследования. Тогда лечение поможет в короткие сроки, наступит полное выздоровление.