Анализ генетического риска развития тромбофилии, тромбоэмболии

Анализ генетического риска развития тромбофилии и тромбоэмболии проводится с целью выявления предрасположенности к заболеваниям сердечно-сосудистой системы.

Тромбофилия и тромбоэмболия В организме здорового человека поддерживается постоянство гомеостаза (само-регуляции равновесия процессов жизнедеятельности). Одним из важных факторов этой системы является тромбообразование, необходимое для формирования тромбоцитарного гемостатического агрегата, который образуется при повреждении стенки сосуда и предотвращает кровопотерю.

Однако этот процесс не должен препятствовать нормальной циркуляции крови – эту функцию обеспечивают определенные компоненты противо-свертывающей системы, способствующие рассасыванию кровяных сгустков. Совместная правильная функциональная деятельность компонентов обоих систем поддерживает процессы гемостаза в норме.

При наличии у человека различных патологий в системе кровеносных сосудов образуются тромбы, препятствующие нормальному кровотоку. Это явление связано с наследственной тромбофилией - повышенной склонностью к патологическому тромбообразованию, обусловленному генетическими аномалиями.

Тромбофилия может привести к развитию тромбозов, ишемии сердечной мышцы, инфаркта миокарда, эмболии - острой закупорке просвета сосуда тромбом, который оторвался от места своего образования и попал в циркулирующее кровяное русло.

Наиболее значимыми генетическими дефектами, приводящими к тромбофилии, являются полиморфизмы:

1. Arg353Gln G>A 13q34 - гена белка проконвертина (F VII).
2. с. -455 G>A 4q31.3 - гена бета-цепи фибриногена - предшественника фибрина.
3. Val35Leu G>T 6p25.1 - гена F XIII, отвечающего за конечные реакции гемокоагуляции.
4. Arg506Gln G>A 1q24.2 - гена F V (активатора реакции преобразования протромбина в тромбин).
5. 807 C>T 5q11.2 - гена тромбоцитарных рецепторов.
6. 675 5G>4G 7q21.3-q22 - гена белка, подавляющего процесс фибринолиза.
7. Leu59Pro T>C 17q21.32 - гена рецептора, обеспечивающего взаимодействие фибриногена с тромбоцитами.

8. Генов тканевого фермента - ключевого звена реакции преобразования метионина из гомоцистеина:

Ala222Val C677T 1p36.3;
Glu429Ala А1298С 1p36.3.

Выявить генетическую предрасположенность к тромбофилии и тромбоэмболическим патологиям поможет проведение молекулярно-генетического анализа, позволяющего оценить полиморфизмы генов и провести рациональный курс лечебно-оздоровительных мероприятий.

Когда делают анализ

Практикующие врачи рекомендуют проведение генетического анализа крови риска развития тромбофилии и тромбоэмболии при:

подозрении на наличие у пациента наследственной предрасположенности к патологическому тромбообразованию;
варикозной болезни;
тромбозе глубоких вен;
тромбоэмболических патологиях у женщин в период вынашивания ребенка и после родов.

Методика проведения анализа

Для выполнения анализа риска развития тромбофилии и тромбоэмболии необходим образец венозной крови, забор осуществляют в медицинском центре в утреннее время.

Накануне пациенту рекомендуется:

Исключить стрессы, физическое перенапряжение, прием алкоголя.
Ограничить курение и пищевую нагрузку.
В день сдачи биоматериала не завтракать.

Молекулярно-генетический анализ проводят с помощью ПЦР метода с использованием способа рестрикции.

Важность исследования

Тромбофилия и тромбоэмболия несут значительный риск для состояния сердечно-сосудистой системы, всего организма в целом. Основная опасность связана с тем, что один или сразу множество тромбов могут возникнуть в любом участке сосудов, распространяясь по системному кровотоку. Если произойдет закупорка сосуда, разовьется недостаточность кровоснабжения тканей или целого органа. В результате формируется некроз.

Анализ генетического риска развития тромбофилии Это чревато развитием следующих патологий:

инфаркт – некроз сердечной мышцы;
инсульт – омертвление участка головного мозга;
тромбоэмболия легочной артерии – нарушение кровоснабжения респираторного тракта, что быстро заканчивается летальным исходом;
гангрена конечностей – нарушение кровоснабжения тканей верхних и нижних конечностей, что требует ампутации.

Это лишь часть осложнений, которые развиваются на фоне тромбофилии или тромбоэмболии. Закупорка сосуда может возникнуть не только в каком-либо отделе организма, но также сразу во множестве его очагов. Например, такое отклонение развивается при ДВС-синдроме. Обычно его провоцирует хирургическая операция, осложненные роды.

Если заподозрить склонность к тромбофилии или тромбоэмболии на ранних этапах развития, можно назначить комплекс лабораторных анализов, чтобы подтвердить предрасположенность. Именно в этих целях проводят исследование по определению генетического риска развития тромбофилии и тромбоэмболии. Определяют наличие или отсутствие мутантных генов, которые приводят к нарушениям различных этапов свертывающей системы. Если результат по любому из выявляемых критериев будет положительным, врач своевременно назначит методы терапии, чтобы предупредить повышенное тромбообразование. Этим опосредована основная важность проведения анализа.

Для чего необходим анализ

Выделяют ряд причин, при наличии которых врачи рекомендуют оценивать генетический риск развития тромбофилии и тромбоэмболии:

возможность развития тромбоза у пациентов из группы риска в профилактических целях (негативная семейная наследственность, наличие сердечно-сосудистых заболеваний);
оценка возможности повторного тромбоза;
риск тромбофилии или тромбоэмболии для пациентов, которые планируют беременность или роды, хирургическое вмешательство, продолжительный прием некоторых лекарственных средств;
причины уже выявленных эпизодов тромбофилии или тромбоэмболии в анамнезе;
потребность в назначении профилактических методов, препятствующих повышенному тромбообразованию;
потребность в лечебных мероприятиях, направленных на предотвращение риска развития тромбоза и сопутствующих осложнений;
возможность передачи дефектного гена потомству в случае, если у родителей присутствуют сердечно-сосудистые заболевания, тромбоз, тромбофилия в анамнезе.

Оценку потребности в проведении анализа по выявлению генетического риска развития тромбофилии, тромбоэмболии определяет лечащий врач. Чаще это гематолог, кардиолог, хирург, акушер-гинеколог.

Метод диагностики

Для выявления генетического риска тромбофилии, тромбоэмболии используют ПЦР методику. Это современный и совершенный тест, который всегда предоставляет данные по молекулярно-генетическому анализу изъятого биоматериала. В данном случае используют венозную кровь или буккальный эпителий, взятый методом соскоба. Как только биоматериал получен, его сразу же подвергают исследованию, чтобы не допустить изменений в клеточной и молекулярной структуре.

Подготовка биоматериала. Венозную кровь или буккальный соскоб обрабатывают, чтобы получить небольшой образец с высокой концентрацией ДНК. Достаточно содержания даже небольшого количества генетического материала, так как аппаратура обладает высокой степенью чувствительности.
Денатурация. На биоматериал воздействуют высокой температурой до 96°. В таких условиях водородные связи между нитями в цепочке ДНК разрушаются, поэтому она делится на отдельные фрагменты. Сразу после достижения цели температуру снижают до 72°.
Введение праймера. Это лабораторный реагент, который встраивается в разъединенные нити ДНК, выделяя именно ту область, которую требуется идентифицировать.
Синтез новых цепочек ДНК. Используют фермент ДНК-полимеразу, которая стимулирует образование новой генетической информации того участка, где был введен праймер. Таким методом получают достаточно биоматериала, чтобы в дальнейшем определить его принадлежность.
Определение ДНК. Первоначально вводят ДНК-зонды, на которых находится специальная метка, встраиваемая в структуру ДНК. Затем используют автоматический анализатор, который выявляет точную разновидность генетического материала, на которой содержится данная метка.

Перечисленные этапы теста повторяют для отслеживания каждого маркера, по которому можно заподозрить риск развития тромбофилии, тромбоэмболии.

Важные особенности

При использовании исследования по определению генетического риска развития тромбофилии и тромбоэмболии учитывают ряд особенностей:

в процессе диагностики требуется выявить множество маркеров, поэтому тест могут выполнять продолжительно, вплоть до 10 дней;
вне зависимости от выбора биоматериала (буккальный соскоб или венозная кровь), результаты всегда получаются точными и достоверными;
достаточно провести тест лишь однократно, чтобы выявить мутантный ген;
на основании полученных данных невозможно установить дифференциальный диагноз, для этого требуются другие лабораторно-инструментальные методы, оценка истории болезни и клинической симптоматики, другие сведения.

Если выявлен лишь мутантный ген, но при этом симптомы отсутствуют, достаточно проводить профилактические меры. В случае дополнительного проявления негативных симптомов назначают лечебные мероприятия для препятствия повышенного тромбообразования.

Расшифровка анализа

Заключение комплексного анализа генетических дефектов компонентов системы гемостаза составляет квалифицированный врач-генетик, основываясь на итоговые данные генотипов значимых маркеров, позволяющих оценить генетическую вероятность развития у пациента тромбофилии и тромбоэмболии.