Базовый анализ риска развития тромбозов

Анализ определения риска развития тромбозов (базовый, сокр.)

Базовый анализ определения риска развития тромбозов проводят для выявления наследственной предрасположенности к патологическому тромбообразованию и вероятности развития сердечно-сосудистых заболеваний.
Каскад реакций гемо-коагуляции зависит от функций свертывающих и противо-свертывающих компонентов гемостаза. В норме они находятся в уравновешенном состоянии и поддерживают физиологическое постоянство кровотока. Различные патологические процессы, которые происходят в сосудистой системе человеческого организма провоцируют образование кровяных сгустков (тромбов), блокирующих нормальную циркуляцию крови.

Самым частым и неблагоприятным проявлением повышенной предрасположенности к патологическому тромбообразованию являются генетические дефекты системы гемостаза.

В развитии тромбозов участвуют гены коагуляционных факторов и ферментов, которые контролируют обмен фолиево-кислых солей - его нарушение приводит к повышению концентрации в крови непротеино-генной аминокислоты (гомоцистеина). В результате этого развивается атеросклеротическое и тромботическое поражение сосудов.
Чаще всего вероятность патологического тромбообразования вызывают полиморфизмы:

• c.*96 G20210A 11p11.2 - гена F II, одного из основных компонентов гемо-коагуляции - протромбина. При его ферментативном расщеплении образуется тромбин, формирующий первичный кровяной сгусток.
• Arg506Gln G>A 1q24.2 - гена F V, активизирующего реакцию преобразования протромбина в тромбин.
• Ala222Val C677T 1p36.3 - гена внутриклеточного фермента, который необходим для процесса превращения гомоцистеина в алифатическую серосодержащую α-аминокислоту (метионин).
• 675 5G>4G 7q21.3-q22 - гена эндотелиального ингибитора (вещества, замедляющего функцию) активации плазмино-гена.

Для выявления наследственной предрасположенности к патологическому тромбообразованию необходимо провести базовый молекулярно-генетический скрининг.

Когда делают анализ

Практикующие специалисты - кардиологи, гематологи, генетики рекомендуют проведение генетического исследования для предупреждения развития тромбоэмболических патологий при наличии у пациента:

• гипер-гомоцистеинемии;
• нарушения сердечного ритма;
• стенокардии;
• атеросклеротических изменений сосудов.

Методика проведения анализа

Анализ определения риска развития тромбозов выполняют из образца венозной крови, забор осуществляется в медицинском центре в утреннее время.

Накануне манипуляции пациенту рекомендуется:

1. Исключить стрессы, физическое перенапряжение и прием алкоголя.
2. Ограничить пищевую нагрузку и курение.
3. В день сдачи биологического материала не завтракать.

Для исследования структуры дезоксирибонуклеиновой кислоты используют ПЦР метод, в ходе которого участки ДНК обрабатывают особыми ферментами - рестрикционными эндо-нуклеазами. Таким способом возможно получение рестрикционной карты определенных фрагментов ДНК и выявление генных мутаций.

Важность исследования

Различные сердечно-сосудистые патологии и поражение сосудов – распространенные заболевания, которые встречаются у многих пациентов. Они формируются под влиянием нескольких повреждающих факторов, в том числе наличия мутантных генов, в которых закодирована информация о состоянии сердечно-сосудистой системы. У пациента может проявляться одна или сразу несколько патологий. В последнем случае состояние становится более тяжелым, может приводить к массе осложнений. Для назначения правильных методов терапии недостаточно лишь выявить факт склонности к тромбозам, стенокардии, атеросклерозу. Необходимо выявить первопричину подобного поражения. Именно в этих целях выполняют анализ определения риска развития тромбозов. Его важность опосредована получением следующих данных:

• наличие или отсутствие мутантных генов, вследствие которых у пациента повышается риск сердечно-сосудистых патологий и атеросклероза;
• выявление первопричины негативной клинической симптоматики – боль за грудиной, приступы стенокардии, перепады артериального давления, затрудненность кровоснабжения сердца и головного мозга;
• риск развития сердечно-сосудистых патологий и атеросклероза в случае, если у пациента присутствует негативная наследственность, то есть его близкие родственники страдают идентичными отклонениями.

Если не провести диагностику своевременно, состояние пациента будет только усугубляться. На первых этапах симптомы отсутствуют, затем проявляются признаки тромбоза, атеросклероза. Классические методы терапии лишь немного тормозят патологический процесс, но заболевания продолжают развиваться. В итоге это приводит к осложнениям:

• инфаркт – омертвление части сердечной мышцы;
• инсульт ишемического типа – нарушение кровоснабжения пораженного участка уголовного мозга на фоне спазма или закупорки сосуда;
• тромбоз вен нижних конечностей;
• гангрена нижних конечностей с последующей ампутацией;
• тромбоэмболия легочной артерии, которая за считанные минуты приводит к летальному исходу.

Если генетическое исследование по выявлению риска тромбоза проведено своевременно, можно определить первичный повреждающий фактор на ранних этапах развития, чтобы вовремя начать правильное лечение. Это поможет значительно затормозить патологический процесс, предотвратить осложнения, вести пациенту привычный образ жизни.

Для чего необходим анализ

Исследование на определение риска развития тромбоза необходимо для получения следующих данных:

• профилактическое изучение генетических мутаций, которые могут привести к тромбозу, атеросклеротическому поражению сосудов (например, если близкие родственники пациента страдают идентичной патологией);
• причины уже случившихся эпизодов тромбоза, атеросклеротического поражения;
• возможность развития осложнений для сосудов при планировании беременности, родов, операции, назначении некоторых лекарственных средств;
• необходимость в составлении правильных профилактических методов, которые значительно снизят риск тромботического поражения сосудов (в этих целях используют диету, адекватную физическую нагрузку, физиопроцедуры и другие методики);
• составление правильных методов терапии, направленных на коррекцию состояния генов (обычно используют таргетное лечение, направленное на устранение дефектных генов без влияния на другие молекулы и клетки), а также уже развивающиеся заболевания;
• выявление носителей дефектных генов, чтобы судить о возможности их передачи по наследству;
• оценка уже проведенного лечения, чтобы судить об улучшении или подбирать вспомогательные тактики при низком результате.

Потребность в проведении генетического исследования определяет гематолог, кардиолог, хирург или другой лечащий врач, который заподозрил риск тромбоза. Но также тест можно пройти в профилактических целях самому пациенту.

Метод диагностики

Для отслеживания дефектных генов, провоцирующих риск тромбоза и атеросклеротического поражения сосудов, используют ПЦР-методику. Для ее проведения берут буккальный соскоб или венозную кровь. Полученный биоматериал сразу же обрабатывают, чтобы не допустить любых изменений, в том числе в молекулах ДНК.

1. Создание образца для исследования. Из биоматериала готовят образец, в котором сосредоточено большое количество ДНК. При этом молекулы могут содержаться в минимальном количестве, но ПЦР-аппарат найдет их в таком объеме.
2. Увеличение температуры биоматериала. Температуру увеличивают до 96°, чтобы разрушить водородные связи, соединяющие нити в цепочках ДНК. Затем температуру снижают, чтобы перейти к другим этапам теста.
3. Добавление праймера. Вещество встраивается в нити ДНК, чтобы пометить область, требующую идентификации. Для ускорения этапа опять немного повышают температуру.
4. Увеличение количества генетического материала. Добавляют фермент ДНК-полимеразу, которая приводит к копированию нити ДНК до 30 раз подряд. При получении достаточного количества генетической информации приступают к следующему этапу.
5. Детекция. В биоматериал добавляют ДНК-зонд. Это фрагменты, которые сможет идентифицировать анализатор. Как только произойдет соединение нити ДНК и зондов, приступают к исследованию на автоматическом анализаторе. Аппарат в точности определяет принадлежность генетического материала, оценивая риск развития мутации.

При помощи перечисленных этапов отслеживают в отдельности каждую мутацию в структуре ДНК, чтобы определить малейшую возможность дефекта системы гемостаза. В случае его выявления диагноз не устанавливают. В этих целях необходимо дополнительно проконсультироваться с врачом-генетиком для расшифровки. Он дополнительно учитывает симптоматику, результаты других исследований, семейный анамнез и многие другие параметры. Только так устанавливают точный диагноз, затем приступают к лечению.

Расшифровка анализа

По итоговым данным базовых молекулярно-генетических маркеров квалифицированный специалист-генетик делает заключение, которое позволяет оценить наследственную предрасположенность к тромбозам и спрогнозировать риск развития ассоциированных с ним заболеваний. Это помогает практикующим врачам разобраться в причинах имеющихся у пациента заболеваний и выбрать правильное направление лечебно-оздоровительных мероприятий.