Исследование цитокинового (интерлейкины) профиля в RT-PCR

(рабочие дни):
до 10 дн.
* Взятие биоматериала оплачивается отдельно
Анализ цитокинового профиля (интерлейкины) в RT-PCR
Цитокины – белково-пептидные медиаторы, отвечающие за межклеточное взаимодействие, регулирование эмбрионального развития, ряд физиологических функций, восстановление поврежденных тканей, защитные реакции в ответ на патогены и опухолевые процессы. Они участвуют в формировании иммунопатологических процессов, связанных с аллергическими, аутоиммунными и иными механизмами. Цитокины играют существенную роль как в нормальном функционировании организма, так и в течении патологических процессов. К цитокинам относится свыше 200 видов соединений: интерлейкины, интерфероны, хемокины, ростовые, колониестимулирующие факторы, фактор некроза опухолей и целый ряд других веществ.
Для чего назначают анализ цитокинового профиля (интерлейкины) в RT-PCR
Синтез цитокинов подвержен сложным механизмам регуляции, в связи с чем изменения экспрессии одного из них часто отражается на концентрациях других. При этом скорость образования цитокинов может различаться и определяться целым рядом физиологических особенностей организма и тем, как взаимодействуют главные адаптационные системы: эндокринная, нервная, иммунная. Поэтому определять разные цитокины в образцах биологических жидкостей лучше одновременно, применяя комплексный режим оценки, как в случае с анализом цитокинового профиля. Это позволит снизить риск ошибок при интерпретации результатов.
Что представляет собой цитокиновый профиль (интерлейкины)
Анализ цитокинового профиля является одним из важнейших иммунодиагностических инструментов. С его помощью оценивают функциональные соотношения базисных субпопуляций лимфоцитов Т-хелперов — Th1, Th2, Th17. Функциональные характеристики Th1-субпопуляции оценивают по продукции иммунными клетками интерферона-γ. Маркером Th2-субпопуляции является интерлейкин-4. Основным цитокином Th17-субпопуляции служит ИЛ-17А.
Цитокины участвуют в регуляции взаимодействия, размножения и функционирования клеток, участвующих в иммунных реакциях, связанных с воспалением. Эти медиаторы влияют на направление дифференцировки лимфоцитов, что ведет к развитию того или иного типа воспалительной реактивности. В частности, вирусная инвазия вызывает дифференцировку Т-хелперов с формированием субпопуляции Th-1 лимфоцитов, ответственных за выработку интерферона-γ, в то же время бактериальная инфекция активирует формирование субпопуляции Th-2. Цитокины не обладают антигенной специфичностью, поэтому с помощью цитокинового профиля или определения отдельных цитокинов нельзя провести специфическую диагностику инфекционных и аллергических патологий. Однако исследование цитокинового профиля помогает определить тяжесть воспаления, выявить синдром системной воспалительной реакции, дать прогноз заболевания. Определение соотношения процессов активации разных типов Т-хелперов на основании цитокинового профиля облегчает дифференциальную диагностику при инфекционных и иммунопатологических заболеваниях.
Что выявляют с помощью анализа и кому его назначают?
По показаниям содержание цитокинов может определяться не только в сыворотке крови, но и в других биологических жидкостях (в моче, бронхоальвеолярной жидкости, слюне, конденсате выдыхаемого воздуха, синовиальной жидкости и других). Дополнительные данные могут быть получены при исследовании способности клеток вырабатывать те или иные цитокины.
К воспалительным цитокинам относятся фактор некроза опухоли альфа, интерлейкины-1, -6, -8, -12. Противовоспалительными свойствами обладают интерлейкины-4, -10, -11, -13. Лекарственные препараты, подавляющие провоспалительные цитокины, назначаются с целью восстановления баланса между этими двумя группами цитокинов.
Исследование цитокинового профиля показано пациентам, имеющим одно из следующих патологических состояний:
- Инфекционные заболевания, аутоиммунные процессы, ревматологические патологии, ассоциированные с хроническим воспалением. Анализ может помочь в оценке тяжести и прогноза при атеросклерозе, сахарном диабете, хронической обструктивной болезни легких и некоторых других патологиях.
- «Цитокиновый шторм», связанный с инфекционным процессом или онкопатологией.
Когда назначают анализ?
Исследование интерлейкинов проводят как в рамках первичной диагностики для определения тяжести течения и прогноза заболевания, так и для контроля эффективности терапии.
Как правильно подготовиться к исследованию?
Перед взятием биологического материала для анализа на цитокиновый профиль (интерлейкины) специальной подготовки не требуется. Кровь берется натощак или не ранее, чем через 4 часа после еды. Разрешается пить обычную воду (без минерализации и газирования).
Метод исследования
К инновационным количественным методам, определяющим цитокиновую мРНК, относится полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией (RT-PCR). Методика отличается высокими показателями чувствительности и специфичности. Сегодня применяются различные модификации метода, в том числе ПЦР в реальном времени, микрочипы для одновременного анализа нескольких сотен генов и другие.
Что означают результаты?
При оценке результатов анализа цитокинового профиля опираются на сам факт повышения или понижения отдельных цитокинов у обследуемого пациента с конкретной патологией. Значимость полученных результатов можно определить только в ходе комплексной оценки всех имеющихся данных. Показатели цитокинового профиля позволяют оценить тяжесть заболевания и составить прогноз. С помощью исследования можно предположить, какая лечебная схема будет эффективна, а какая нет. Это поможет выбрать оптимальную тактику лечения в самом начале. Изучение показателей в динамике помогает определять реакцию иммунной системы на предпринимаемую терапию и своевременно вносить коррективы в лечение.