Chlamydia trachomatis (ПЦР мокрота)

ПЦР анализ мокроты на Chlamydia trachomatis

Анализ мокроты методом ПЦР с выявлением ДНК Chlamydia trachomatis позволяет подтвердить факт инфицирования больного. Обследование рекомендуется специалистом в рамках дифференциальной диагностики хламидиозов.
Chlamydia trachomatis – внутриклеточный паразит рода Хламидий. Заражение происходит преимущественно половым путем, реже контактно-бытовым. Провоцирует этот тип паразита развитие урогенитального хламидиоза и конъюнктивита, легочного хламидиоза.

Когда делают анализ

Показаниями к проведению ПЦР диагностики являются следующие проявления, которые могут указывать на развитие хламидиоза:

• бесплодие неустановленной этиологии;
• «привычное» невынашивание беременности в анамнезе;
• заболевания мочеполовых органов воспалительной природы, которые плохо поддаются стандартному лечению;
• конъюнктивит невыясненной природы;
• приступы сильного сухого кашля, который может сопровождаться чувством удушья, свистящим дыханием, воспалением слизистой горла и гортани.

Методика проведения анализа

Исследованию подлежит образец мокроты. Биоматериал доставляется в лабораторию, где его переносят в пробирку термостата-амплификатора для проведения полимеразной цепной реакции. Содержимое нагревают и охлаждают на протяжении нескольких циклов. На этой стадии денатурации происходит разрушение водородных связей между нитями ДНК.

Перед добавлением специального праймера биоматериал охлаждают до температуры ниже плавления используемой рестриктазы. Это соединение прикрепляется к специфическим для исследуемого микроорганизма участкам генома, выделяя их. На следующем этапе вносится фермент ДНК-полимераза, катализирующая многократное воспроизведение выделенного участка генетического материала. Обнаружение ДНК-фрагментов проводится спектрофотометрически.
Процедура сбора мокроты проводится утром до приема пищи. Предварительно с врачом следует обговорить целесообразность применения отхаркивающих препаратов. Перед процедурой рот следует прополоскать водой, после чего прокашляться и собрать отделившуюся мокроту в специальный стерильный контейнер. При необходимости сбор мокроты следует повторить через 4 часа, однако процедура также проводится натощак.

Важность исследования

Хламидия трахоматис – это внутриклеточный паразит, который часто вызывает осложнения. Поэтому важно идентифицировать его на ранних этапах развития, чтобы не допустить необратимых отклонений. Для выявления хламидии трахоматис используют полимеразную цепную реакцию. Важность теста опосредована следующими факторами:

• выявление даже незначительного количества хламидий в минимальном объеме биоматериала;
• оценка степени распространения патогенного микроорганизма, что коррелирует с его объемом в биологическом материале;
• дифференциальная диагностика между различными видами возбудителей, которые могли спровоцировать воспалительные процессы в респираторной системе (например, они могут проявляться при ОРВИ, бронхите и пневмонии вирусной или бактериальной природы);
• оценка потребности в назначении специфической антибактериальной терапии с максимальной степенью чувствительности именно для хламидии трахоматис;
• определение эффективности лечения в процессе его применения, чтобы врач смог своевременно корректировать виды или дозировки препаратов, направленных против патогенного микроорганизма;
• профилактическое отслеживание пациентов, которые контактировали с людьми с диагнозом хламидиоз, поэтому могли заразиться микроорганизмом;
• профилактическое отслеживание пациентов, которые ранее пережили хламидиоз, затем прошли лечение и перешли в этап выздоровления, в данном случае тест покажет возможность рецидива.

Полученные данные всегда достоверные, по ним можно с точностью определить наличие или отсутствие хламидиоза. Исследование назначает инфекционист, пульмонолог терапевт. Этот же врач должен проводить расшифровку, чтобы по полученным данным не только подтвердить факт заражения хламидией трахоматис, но и подобрать специфическое лечение.

Для чего необходим анализ

Большинство врачей выбирает ПЦР для выявления хламидии трахоматис в мокроте, получая следующую информацию:

• определение причин проявляющейся негативной симптоматики – заложенность носа, боль и першение в горле, повышение температуры тела, сухой или влажный кашель с выделением мокроты (эти симптомы не специфичные, могут проявляться при заражении разными видами возбудителей, поэтому требуется подтверждение дифференциального диагноза);
• исключение заражения хламидиозом перед планированием беременности, так как сам патогенный микроорганизм и препараты против него могут повлиять на состояние зародыша (требуется предварительно пройти специфическое лечение, затем выждать несколько месяцев, только после этого рассмотреть вопрос беременности);
• оценка риска распространения хламидии по организму в случае незащищенного полового акта или возможности взаимодействия с зараженным человеком контактно-бытовым путем.

Для лечения патологии используют антибиотики, к действующим веществам которых чувствительна именно хламидия трахоматис. Многие пациенты тяжело переносят эти средства, они часто вызывают побочные реакции. Поэтому предварительно требуется подтвердить факт заражения хламидиозом, после чего приступать к специфическому лечению.

Этапы подготовки к анализу

Недопустимо проводить исследование без предварительной подготовки, иначе оно может показать недостоверные данные. Если патогенный микроорганизм будет продолжительно сохраняться в теле человека, это может спровоцировать осложнения для мочеполовой и респираторной системы. Поэтому при назначении анализа врач предупреждает о потребности предварительной подготовки:

• передача врачу полного списка употребляемых лекарственных средств, чтобы он исключил те из них, которые могут повлиять на микроскопический состав мокроты или всю респираторную систему в целом;
• запрет употребления антибактериальных и антисептических средств системного или местного действия за 1 неделю, чтобы сохранить целостность микрофлоры во всех частях организма, в том числе в дыхательной системе;
• сбор биоматериала строго натощак, недопустимо употреблять пищу или разные виды жидкости.

Так как анализ сдают натощак, лучше всего использовать утренние часы, чтобы собрать мокроту. Так образец не подвергнется внешним воздействиям, а у лаборанта появится больше времени для быстрого исследования.

Особенности исследования

Для ПЦР методики исследования мокроты на предмет хламидии трахоматис выделяют следующие особенности:

• достаточно небольшого фрагмента биоматериала, чтобы с точностью подтвердить наличие или отсутствие патогенного микроорганизма;
• в биоматериале определяют только микроорганизм хламидию трахоматис, он будет выявлен даже в случае, если в мокроте содержатся его микроскопические фрагменты;
• основа теста заключается в выявлении генетического материала возбудителя инфекции, в котором закодирована вся информация о нем;
• максимальный период исследования составляет 2 дня;
• расшифровка простая, так как в результатах уже будет указано наличие или отсутствие инфекции, при ее выявлении требуется дополнительная консультация у врача.

Хламидиоз может распространяться не только в мокроту, но и мочеполовую систему. Поэтому при подозрении патологии важно дополнительно исследовать другие биологические жидкости.

Расшифровка анализа

Результаты обследования выдаются в виде «выявлено» или «не выявлено». Положительный результат анализа с обнаружением фрагментов генома микроорганизма Chlamydia trachomatis подтверждает факт инфицирования больного. В этом случае врач назначит этиотропную терапию, направленную на уничтожение патогена. Через неделю по окончанию лечения обследование проводится повторно, что позволит подтвердить его эффективность.
Отрицательный результат анализа наблюдается при отсутствии заражения Chlamydia trachomatis.

Факторы, влияющие на результат

Чаще всего наличие патогенного микроорганизма всегда будет выявлено в ходе ПЦР диагностики. Однако на результат могут повлиять следующие факторы:

• объем изъятого биологического материала;
• правильность прохождения предварительной подготовки;
• степень распространения инфекции, например, ее можно не выявить, если она концентрируется в глубоких отделах легких, а мокрота выделяется из верхних частей бронхов.

Также важно помнить, что хламидиоз не всегда вызывает воспалительную реакцию. В некоторых случаях она может быть спровоцирована другими патогенными микроорганизмами.