Mycoplasma pneumoniae (ПЦР мокрота)
(рабочие дни):
3 - 5 дн.
* Взятие биоматериала оплачивается отдельно
Анализ мокроты на Mycoplasma pneumoniae
Анализ мокроты методом ПЦР на обнаружение генетического материала микроорганизма Mycoplasma pneumoniae рекомендуется специалистом для подтверждения факта инфицирования больного, а также в рамках дифференциальной диагностики микоплазменной пневмонии.
Mycoplasma pneumoniae относится роду Микоплазмы. Эти микроорганизмы не имеют жесткой клеточной стенки, а от внешней среды они защищены плазматической мембраной. Паразитируют микоплазмы на мембранах клеток органов дыхания, провоцируя развитие трахеобронхита, бронхита, трахеита, атипичной пневмонии. Инфицирование происходит от больного человека либо бактерионосителя воздушно-капельным путем.
Когда делают анализ
Врач может назначить ПЦР анализ мокроты на Mycoplasma pneumoniae при появлении симптомов, свойственных микоплазменной инфекции:
- ринит, сухой кашель, боль и першение в горле, сохраняющиеся в течение 2-3 недель и плохо поддающиеся стандартной схеме лечения;
- стойкий длительный кашель, который сопровождается субфебрильной температурой;
- пневмонии, устойчивые к лечению антибактериальными препаратами;
- заболевания органов дыхания сопровождаются поражением слизистых оболочек и кожи;
- температура тела 37,5-38,0 сохраняется на протяжении длительного времени неясного генеза.
Важность исследования
Исследование мокроты на наличие Mycoplasma pneumoniae проводят на основании ПЦР исследования. По полученным данным врач определяет следующую информацию:
- наличие или отсутствие Mycoplasma pneumoniae в мокроте;
- уровень содержания микроорганизма в мокроте, так как инфекционный процесс развивается только при превышении его количества свыше референсных значений (Mycoplasma pneumoniae может содержаться в небольшом количестве в качестве условно-патогенной микрофлоры, не вызывая воспаление);
- дифференциальная диагностика между атипичной пневмонией, вызванной Mycoplasma pneumoniae и другими видами патогенных микроорганизмов, так как в этом случае симптоматика не специфична, может проявляться одинаково;
- выявление потребности в назначении инъекционных и перфузионных антибиотиков с чувствительностью именно для Mycoplasma pneumoniae;
- определение результата от введения антибиотиков в процессе их применения или после завершения терапии, чтобы определять результативность и оценивать возможность перехода в выздоровление (если подобранной схемы лечения будет недостаточно, по результатам исследования врач сможет назначить еще один антибиотик);
- профилактическая оценка отделяемого респираторного тракта, если ранее у пациента наблюдалась атипичная пневмония под влиянием Mycoplasma pneumoniae, затем наступило выздоровление (тест проводят через 1 месяц, чтобы подтвердить полное отсутствие микроорганизма и исключить возможность развития рецидива).
Так как для диагностики применяют ПЦР исследование, определяющее генетический материал возбудителя, можно получить достоверные и точные данные. Ни один другой тест не покажет схожие результаты. Сведения от диагностики приходят в короткие сроки, по сравнению с другими лабораторными анализами, поэтому можно быстро приступить к лечению, исключив возможность развития осложнений.
Для чего необходим анализ
Основное показание для проведения теста – это появление симптомов, указывающих на развитие атипичной пневмонии. Она может развиваться под воздействием разных микроорганизмов, поэтому требуется ПЦР-диагностика. Если анализ произведен своевременно, можно приступить к лечению на ранних этапах, чтобы исключить возможность развития следующих осложнений:
- обширные воспалительные процессы, которые постепенно распространяются из одной точки легкого, затем могут поражать крупные доли и переходить в двусторонний процесс;
- дыхательная недостаточность, при которой значительно замедляется поставка кислорода и выделение углекислого газа;
- сердечная недостаточность, развивающаяся на фоне поражения респираторного тракта;
- летальный исход в тяжелых случаях.
Благодаря исследованию подтверждают точный диагноз, выявляют причину негативной симптоматики и проводят контрольное исследование для подтверждения полного уничтожения инфекции.
Этапы подготовки к анализу
Полимеразная цепная реакция проводится посредством анализа мокроты больного в качестве биоматериала. Забор ее можно проводить в домашних условиях в специальный стерильный контейнер либо непосредственно в лаборатории.
Подготовка к сбору мокроты включает следование следующим рекомендациям:
- процедура проводится в первой половине дня;
- завтракать в этот день нельзя;
- последний прием пищи за 12 часов до сбора мокроты;
- нельзя чистить зубы, разрешается прополоскать рот кипяченой теплой водой;
- запрещено курить на протяжении 2 часов до процедуры;
- решение о необходимости приема отхаркивающих препаратов принимается вместе с лечащим врачом.
Лаборант переносит биоматериал в пробирку амплификатора. Здесь обеспечивается циклический нагрев и охлаждение содержимого до заданной температуры. Через 10 минут вносятся рестриктазы, которые прикрепляются к специфическим участкам генома. Чтобы стимулировать процесс «копирования» выделенных фрагментов, вносится ДНК-полимераза. Конечный результат оценивается с помощью спектрофотометра.
Содержание бактерии Mycoplasma pneumoniae в мокроте не должно подвергаться влиянию каких-либо факторов, поэтому врач предупреждает о необходимости подготовительного процесса:
- отсутствие приема антибиотиков или антисептиков, которые поступают непосредственно в респираторную систему или проникают туда через кровь (за 1 неделю);
- отсутствие приема других препаратов, которые могут повлиять на микрофлору или респираторную систему;
- сбор биоматериала сразу после пробуждения до употребления пищи или жидкости;
- отказ от алкоголя за 1 день до анализа;
- начало лечения только после получения результатов теста.
Для сбора образца мокроты недопустимо использовать любые емкости. Контейнер покупают только в аптеке, он должен быть стерильным. Собранную мокроту необходимо плотно закрутить крышкой, чтобы не допустить контакта с окружающей средой.
Особенности исследования
При выполнении полимеразной цепной реакции с целью обнаружения Mycoplasma pneumoniae в образце мокроты выделяют ряд особенностей:
- врач указывает необходимый объем мокроты, но ее количество может быть меньше, так как благодаря ПЦР методике можно обнаружить фрагменты микроорганизма в любых объемах образца;
- через исследование Mycoplasma pneumoniae будет найдена даже в том случае, если в мокроте она содержится в минимальных количествах;
- анализ количественный, то есть определяют одновременно сам факт наличия микроорганизма и его концентрацию;
- предварительную подготовку образца мокроты и его взаимодействие с реактивами выполняет лаборант, а оценку наличия Mycoplasma pneumoniae выполняют на оборудовании, что повышает достоверность данных.
Если пациент правильно подготовился, возможность получения недостоверных данных исключена. Сведения всегда верные и информативные.
Метод проведения
При исследовании образца мокроты через анализ полимеразной цепной реакции выполняют следующие этапы:
- размещение в одной пробирке амплификатора и небольшого количества мокроты;
- перемещение полученной пробирки в аппарат, внутри которого попеременно увеличивают и уменьшают температуру, чтобы разрушить водородные связи между цепочками ДНК (происходит их раскручивание);
- охлаждение биоматериала, после которого сразу же добавляют праймер, выделяющий один фрагмент ДНК;
- введения небольшого количества ДНК-полимеразы, которая копирует выделенный фрагмент множество раз;
- добавление биоматериала с реактивами в аппарат, который идентифицирует выделенный и размноженный участок, определяет его принадлежность к Mycoplasma pneumoniae.
Эти данные позволяют судить о нормальном содержании Mycoplasma pneumoniae в виде условно-патогенной микрофлоры или ее увеличенном количестве при развитии патологии в респираторном тракте. Но для постановки диагноза требуется учитывать и остальные данные, так как воспаление может вызывать не только микоплазма пневмония, но и другие виды микроорганизмов.
Расшифровка анализа
ПЦР в данном случае является качественным методом диагностики, поэтому результаты анализа выдаются в виде «обнаружено» или «не обнаружено».Положительный результат анализа подтверждает заражение Mycoplasma pneumoniae и развитие микоплазменной инфекции. В этом случае врач назначит соответствующую этиотропную терапию.
Отрицательный результат анализа наблюдается при отсутствии заражения. Однако при сохранении симптоматики анализ мокроты рекомендуется повторить через 3 дня, чтобы исключить вероятность получения ложного результата.