Ureaplasma spp. (ПЦР слюна)

Алексеев Андрей Викторович
Алексеев Андрей Викторович Врач клинической лабораторной диагностики,

ПЦР диагностика слюны на Ureaplasma spp.


Ureaplasma spp.
ПЦР диагностика слюны на Ureaplasma species – проводится с целью определения двух возможных возбудителей уреаплазмоза в слюне. Полимеразная цепная реакция позволяет выявить наличие бактерий по нескольким молекулам нуклеиновых кислот. Она основана на технологии копирования присущих антигену нуклеотидных цепочек до определяемого специальными маркерами количества. Такое копирование (амплификация) возможно
только при наличии искомых фрагментов возбудителя в образце.

Ureaplasma species собирательное понятие для двух видов уреаплазмы: parvum, urealyticum. Оба вида способны вызывать патологические процессы в организме. Уреаплазма – особый микроорганизм, называемый мембранным паразитом. Он может обнаруживаться и у здоровых людей. К развитию болезни – уреаплазмоза, может приводить массивное заражение возбудителями, ослабленный иммунитет, нарушение баланса местной микрофлоры.

Показания к назначению анализа


Анализ на Ureaplasma species назначают при наличии подозрения на уреаплазмоз. Определение микроорганизмов методом ПЦР показано в следующих ситуациях:
  • воспалительный процесс слизистой ротовой полости неясной этиологии;
  • наличие неприятного запаха изо рта;
  • подготовка к беременности;
  • иммунодефицит, ВИЧ-инфекция.

Методика проведения анализа ПЦР


Анализ слюны на Ureaplasma spp.
Для исследования слюну собирают в контейнер. Методика забора материала: перед сбором слюны необходимо трижды прополоскать полость рта физиологическим раствором хлорида натрия. Количество забираемого материала не должно быть меньше 1,0 мл. Пробы для анализа помещают в стерильные пробирки для одноразового использования (объем 2 мл), плотно закупоривая их крышками. В предварительной обработке образцы не нуждаются.

Условия хранения проб: комнатная температура – до 6 ч; температура от 2 до 8°С – 24 часа; температура -20°С – 1 неделя; температура -70°С – долгое время. Замораживание и оттаивание образца может быть только однократным.

Искомый участок ДНК выделяют из слюны, используя реагенты. Полимеразную цепную реакцию проводят в специальном приборе – амплификаторе. В результате взаимодействия полученного материала и специфических маркеров обнаруживают искомый фрагмент ДНК, если он присутствует в образце.

Расшифровка анализа


Результаты анализа готовы через несколько дней. Существует два варианта ПЦР-анализа: качественный и количественный. В первом случае определяют только наличие Ureaplasma spp. Ответ может быть либо положительным – ДНК-фрагменты, принадлежащие этому типу микроорганизмов обнаружены, либо отрицательным – инфекция исключена. ПЦР для выявления уреаплазмы имеет высокие показатели чувствительности (96%) и специфичности (98%).

Проведение количественной ПЦР-диагностики позволяет определить число копий в миллилитре или пробе. Наличие 104 копий и менее характерно для здорового носительства. При более высоком количественном показателе существует вероятность уреаплазмоза, но диагноз может быть выставлен только на основании результатов комплексного обследования.