Mycoplasma spp. (соскоб)
(рабочие дни):
1 - 2 дн.
* Взятие биоматериала оплачивается отдельно
ПЦР диагностика соскоба на Mycoplasma spp.
Анализ соскоба на Mycoplasma spp. методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводится в рамках обследования пациентов с подозрением на развитие инфекционного заболевания микоплазмоза. Данный анализ является качественным молекулярно-генетическим методом изучения биоматериала, по ходу которого можно обнаружить ДНК микоплазм, что позволяет подтвердить/опровергнуть факт инфицирования.
Mycoplasma species (spp.) является мельчайшей бактерией семейства внутриклеточных прокариотических микроорганизмов, поражающей органы дыхательной системы, урогенитального тракта. Микоплазмы не имеют пептидогликановую стенку, поэтому они крайне устойчивы к воздействию β-лактамных антибиотиков и факторам иммунной защиты.
Когда делают анализ
- микоплазмозу с поражением урогенитальных органов, который может проявляться воспалением предстательной железы и яичек, негонококковым уретритом;
- в рамках комплексного обследования при заболеваниях органов малого таза воспалительной природы;
- пиелонефриту, циститу для выяснения причин развития недуга;
- для мониторинга эффективности проведенной терапии при урогенитальном микоплазмозе.
Методика проведения анализа
Биоматериал забирается путем урогенитального мазка, соскоба с поверхности шейки матки, зева в зависимости от симптоматики недуга. Подготовка к исследованию включает следование таким требованиям:
- женщины должны сдавать мазок либо до менструации, либо через 3 дня по окончанию выделений;
- мужчинам нежелательно опорожнять мочевой пузырь в течение 3-х часов до проведения соскоба;
- соскоб из зева проводиться до завтрака, предварительно можно ополоснуть рот водой.
Обнаружение генетического материала микоплазмы осуществляется полимеразной цепной реакцией в режиме реального времени. Данный метод отличается высоким показателем чувствительности и специфичности. Во время исследования можно обнаружить ДНК разных подвидов семейства Mycoplasma.
Полученный биоматериал помещают в амплификатор. ДНК-матрицу нагревают до 95 градусов для того, чтобы ДНК-цепи разошлись, то есть произошла денатурация водородных связей. После этого температура снижают и добавляют соответствующие праймеры, которые связываются с 1-цепочечной ДНК-матрицей. Данная стадия называется отжигом.
Энзим ДНК-полимераза удваивает бесконечное количество раз матричную цепь, используя добавленные ранее праймеры. Это стадия элонгации. После этого оценивается наличие бактериальной ДНК Mycoplasma spp.
Важность исследования
Для своевременного выявления микоплазмы требуется провести лабораторные тесты. Наиболее оптимальный из них – ПЦР. Метод в точности выявляет наличие или отсутствие простейшей бактерии в образце биоматериала, передавая эти данные в двух формах:
- график, построенный в режиме реального времени;
- результаты по наличию или отсутствию микроорганизма в распечатанном бланке, где можно увидеть положительный или отрицательный результат.
Важность проведения теста опосредована следующими сведениями:
- точное определение микроорганизма, даже если в образце содержится минимальное количество его генетического материала;
- практически полное отсутствие риска получения ложноположительных или ложноотрицательных данных;
- дифференциальная диагностика микоплазмоза с другими видами половых инфекций, грибковым заражением, иными патологиями урогенитального тракта со схожими симптомами;
- определение потребности в специфической антибактериальной терапии местными или системными средствами в зависимости от результатов ПЦР исследования, а также проявляющейся клинической симптоматики, данными от гинекологического и урологического обследования.
Так как на основе ПЦР можно провести дифференциальный диагноз, пациент сразу приступает к лечению. Достаточно лишь одного теста, выполнять множество различных анализов нет необходимости.
Для чего необходим анализ
При выявлении генетического материала микоплазмы ПЦР проводят для получения ряда важной информации:
- выявление наличия или отсутствия микроорганизма в образце соскоба из урогенитального тракта, чтобы в точности определить диагноз микоплазмоза;
- составление правильной схемы лечения, которая не только вызовет качественный эффект и полное уничтожение микроорганизмов, но также не приведет к побочным действиям, останется безопасным для пациента;
- определение эффективности терапии спустя 2-3 месяца после ее завершения, так как весь этот период времени следы бактерии могут оставаться в слизистом отделяемом;
- оценка потребности в проведении ПЦР-методики для выявления других половых инфекций, так как микоплазмоз часто сочетается со многими из них (в том числе и за счет снижения местного иммунитета).
Урологи и гинекологи предупреждают, что проводить лечение микоплазмоза без предварительной диагностики недопустимо. В первую очередь это связано с риском назначения неправильных методов терапии. Например, если перепутать симптоматику с грибковой инфекцией, фунгицидные средства не вызовут результат, могут привести к побочным реакциям. Поэтому предварительно проводят ПЦР, только затем приступают к терапии.
Особенности анализа
ПЦР обладает массой особенностей, которые необходимо учитывать при назначении:
- предварительно проходят этапы подготовки, без них результаты могут оказаться недостоверными (например, ложноотрицательный результат может появиться вследствие употребления препаратов);
- полученный биоматериал требуется хранить в стерильных условиях, для этого используют одноразовый контейнер с крышкой, чтобы не допустить проникновения посторонних веществ и микроорганизмов;
- к диагностике приступают незамедлительно, биоматериал не хранят продолжительное время, так как у микроорганизмов могут произойти необратимые трансформации с, что приведет к недостоверным сведениям;
- суть теста состоит в разделении двухцепочечной генетического материала на отдельные цепи, которые многократно клонируют, только затем определяют с помощью анализатора;
- в качестве анализатора выступает ПЦР аппарат, который первоначально выстраивает график на мониторе, затем распечатывает бланк с содержащими положительными или отрицательными сведениями;
- ПЦР-методика всегда точна и достоверна, наличие микроорганизмов можно определить даже в случае, если остальные тесты предоставляют ложные сведения в связи с недостаточным количеством биоматериала или низкой концентрацией бактерий;
- если пришли положительные сведения, дальнейшую расшифровку анализа проводит гинеколог или уролог.
Для определения микоплазмы допустим микробиологический тест. Но при его использовании микроорганизмы выявляют под микроскопом визуально. Это можно отнести к недостаткам, так как при взятии биоматериала можно не захватить участок с микроорганизмом, поэтому под микроскопом его не обнаружить. Если же применяют ПЦР, выявляют даже малейшие фрагменты присутствия микоплазмы.
Важные факторы
При использовании анализа учитывают некоторые факторы, без которых выявить и устранить микроорганизм невозможно:
- у некоторых пациентов микоплазма может входить в состав условно-патогенной микрофлоры, поэтому ее минимальная концентрация относится к пределам нормы;
- в отличие от других анализов, на результаты этого теста не влияют некоторые факторы, например, состояние иммунитета или тяжесть развития микоплазмоза;
- наличие микоплазмоза не исключает многие другие половые инфекции, они могут содержаться у пациентов в комплексе.
Также важно помнить, что отрицательный результат может проявиться не только при отсутствии микоплазмоза, но также при успешно проведенном лечении антибактериальными препаратами.
Расшифровка анализа
Нормальным считается отрицательный результат, что подтверждает отсутствие инфицирования микоплазмозом.
Положительный результат наблюдается при заражении микоплазмой и обнаружением бактериальной ДНК в изучаемом биоматериале.
Более детальную интерпретацию полученных результатов анализа соскоба на Mycoplasma spp. проведет врач. Только специалист сможет поставить верный диагноз и назначить соответствующую терапию.
