Флороценоз (Соскоб)

ПЦР анализ соскоба на Флороценоз

Комплексный молекулярно-биологический анализ урогенитального соскоба «Флороценоз», выполненный методом Real-time PCR и позволяющий определить количественное содержание нормо- и условно-патогенной флоры, проводится для установления этиологической причины инфекции мочеполовых путей.

«Флороценоз» является комплексным лабораторным исследование микро-биоценоза урогенитального тракта, в ходе проведения которого возможно выявить, определить количество и соотношение палочек Дедерлейна (лакто-бактерий), кандид, стафило-, энтеро- и стрептококков, мега-сфер, хламидий, микоплазм, трихомонад, гарднерелл, уреаплазм, атопобиума, гонококков. Данные микроорганизмы могут вызывать бактериальный вагиноз (нарушение микрофлоры) и мочеполовые инфекции.

Нарушения баланса вагинальной микрофлоры провоцирует возникновение инфекционно-воспалительных процессов, характеризующихся следующими симптомами:

• изменением запаха, оттенка, консистенции и количества выделений из влагалища; 
• болезненными ощущениями внизу живота;
• дискомфортом при интимной близости;
• жжением при опорожнении мочевого пузыря;
• гиперемией и зудом в ано-генитальной области.

Урогенитальные инфекции могут осложняться развитием воспалительных заболеваний тазовых органов, оказывающих влияние на репродуктивную функцию.

Важность исследования

На поверхности слизистой оболочки влагалища присутствует множество микроорганизмов. Часть из них необходимы для поддержания баланса, защиты половых органов от распространения патогенной инфекции. Микрофлора должна присутствовать в оптимальном количестве, если этот баланс нарушается, происходит активная выработка условно-патогенных микроорганизмов. Это может привести к воспалительным процессам. При отсутствии их своевременной идентификации развиваются следующие осложнения:

• перемещение воспаления в половой системе с заражением фаллопиевых труб, матки, яичников;
• перемещение инфекции в мочевыделительную систему с воспалением уретры, мочевого пузыря, почек;
• влияние на способность к зачатию, что может вызвать бесплодие.

Опасность многих инфекционных процессов половой системы заключается в продолжительном отсутствии клинической симптоматики или формировании неспецифических признаков. Из-за этого женщина продолжительно не обращается к врачу, поэтому поражение продолжает распространяться, вызывая осложнения. Для исключения подобного результата каждой женщине детородного возраста рекомендовано проходить исследование Флороценоза в профилактических целях ежегодно. Тогда можно выявить любые отклонения на ранних этапах развития. Однако важно помнить, что тест допустимо сдавать только женщинам детородного возраста, так как после наступления климакса показатели нормальных параметров изменяются.

Для чего необходим анализ

Исследование Флороценоз необходимо для получения следующей информации:

• состояние нормальной микрофлоры половых путей, которая в основном должна состоять из лактобацилл;
• уровень условно-патогенных бактерий, которые не приносят вреда при содержании в пределах нормы, но вызывают воспаление при активном размножении;
• причины негативной симптоматики со стороны половой системы в виде дискомфортных ощущений (зуд, жжение, боль), выделений непривычной консистенции и цвета;
• оценка потребности в назначении антибактериальных средств и препаратов, поддерживающих нормальную микрофлору влагалища;
• эффективность терапии, чтобы в случае низкого результата врач мог назначить дополнительные средства.

Обычно назначение на анализ получают у врача-гинеколога. Но даже без его рекомендации женщина может пройти исследование самостоятельно, в профилактических целях.

Когда делают анализ на Флороценоз?

Молекулярно-генетическое исследование соскоба «Флороценоз» необходимо при:

• профилактических осмотрах;
• оценивании состояния микрофлоры;
• выявлении венерического заболевания у сексуального партнера;
• планировании рождения ребенка;
• бесплодии;
• подготовке к хирургическим манипуляциям на тазовых органах или экстракорпоральному оплодотворению;
• эктопической беременности;
• установлении причин острых и хронических заболеваний нижнего отдела мочеполовой системы;
• мониторинге проводимой антибактериальной терапии.

Правила подготовки к анализу

Биологический материал для исследования – отделяемое со слизистых покровов стенок влагалища, уретрального и цервикального каналов. Его отбор производят в условиях лабораторного центра, во время гинекологического осмотра.

Накануне процедуры пациентке следует:

• воздержаться от интимных контактов;
• отменить прием антибактериальных препаратов;
• исключить спринцевание и использование влагалищных средств.
• За 2 часа до взятия образца биоматериала нельзя опорожнять мочевой пузырь.
• Нежелательно проводить исследование в период ежемесячного кровотечения!

Особенности анализа

Для ПЦР-методики по определению Флороценоза характерны следующие особенности:

• материалом для лабораторной диагностики является соскоб с поверхности слизистой оболочки влагалища;
• для ПЦР-диагностики достаточно минимального количества биоматериала, так как анализатор является высокочувствительным, поэтому может обнаружить ДНК даже при наличии малейшего фрагмента микроорганизма;
• благодаря оценке генетического материала происходит подсчет одновременно нормальной и условно-патогенной микрофлоры, что позволяет судить о различных микроорганизмах на поверхности слизистой оболочки;
• исследование начинают проводить сразу после получения биоматериала, чтобы не допустить дальнейшей жизнедеятельности микроорганизмов;
• так как выявленная генетическая информация может содержаться в небольшом количестве, первоначально проводят подготовку биоматериала для многократного копирования ДНК, только затем проводят идентификацию определенного вида микроорганизмов;
• в процессе диагностики определяют сразу бактериальные и грибковые микроорганизмы, поэтому доступно определение разных видов инфекций;
• диагностику проводят в режиме реального времени, то есть информацию первоначально можно отследить на мониторе ПЦР оборудования, затем ее распечатывают на бланке;
• точный расчет микроорганизмов проводят только в случае их обнаружения;
• недопустимо проводить исследование без предварительной подготовки, так как многие внешние и внутренние факторы могут влиять на результат.

Благодаря учету всех перечисленных особенностей получают оптимальные и достоверные данные в короткое время. Чаще всего результаты можно получить уже на следующий день после сдачи биоматериала, так как анализ проводят быстро. При большой загруженности лаборатории этот срок может удлиняться до 3 дней.

Метод исследования

Для проведения исследования Флороценоза используют современную ПЦР методику в режиме реального времени. Тест проводят по этапам.

1. Получение биоматериала. Это осуществляет гинеколог, который берет соскоб с поверхности влагалища, размещая образец в стерильный контейнер. Его закручивают крышкой и отправляют в лабораторию.
2. Разрушение водородных связей ДНК. Генетический материал микроорганизмов представлен двумя цепочками, скрученными между собой. Их удерживают водородные связи. Для разъединения цепочек связи необходимо разрушить. Для этого биоматериал нагревают до 96°.
3. Применение праймера. Используют реагент, компонент которого встраивается в каждую цепочку ДНК, определяя ее начало и конец.
4. Применение ДНК-зонда. Эти частицы встраиваются в генетический материал, присоединяясь к области содержания праймера.
5. Копирование генетического материала. Выявленный участок ДНК многократно копируют, чтобы получить достаточный образец, подлежащий обследованию.
6. Диагностика на оборудовании. Используют автоматический анализатор, куда врачу-лаборанту достаточно внести исследуемый образец. Аппарат самостоятельно проводит определение вида микроорганизмов и их точную концентрацию.

Как только исследование завершается, происходит распечатка лабораторного бланка. В первой графе указана информация по определяемым микроорганизмам и их точной концентрации. Рядом прописывают норму, выход за пределы которой свидетельствует о патологическом процессе. Если обнаружено малейшее отклонение от варианта нормы, это прямое показание для обращения к врачу-гинекологу, который проводит расшифровку и назначает терапию.

Расшифровка анализа

Итоговые данные исследования содержат количество выявленных микроорганизмов, которое указывается в ГЭ/мл – геномных эквивалентах (объемах фрагментов генетического материала) на 1 миллилитр исследуемого образца, отражающего численность клеток инфекционного возбудителя. Клинически значимым считается выявление их ДНК в концентрации более 105 ГЭ/мл – это является критерием постановки диагноза.