Gardnerella vaginalis (ПЦР спермы)

ПЦР диагностика спермы на Gardnerella vaginalis

ПЦР диагностика спермы на Gardnerella vaginalis является одним из наиболее современных методов лабораторного исследования биоматериала, которое определяет ДНК возбудителя недуга в составе микрофлоры.

Gardnerella vaginalis  - это условно патогенный микроорганизм, который обитает на слизистой оболочке половых путей. У женщин гарднерелла вызывает развитие бактериального вагинита, у мужчин - балантита (воспалительный процесс охватывает кожу головки полового члена) либо уретрита. Однако возбудителем недуга Gardnerella vaginalis становится только при совокупности благоприятных условий, среди коих резкое снижение иммунной защиты, нарушение гормонального фона, сахарный диабет, длительная терапия антибактериальными препаратами. Передается гарднереллез половым путем.

Симптомы гарднереллеза

Как правило, колонизация Gardnerella vaginalis на половых органах мужчин проходит практически бессимптомно. Мужчина в таком случае становится носителем бактерии, ввиду чего может заразить свою партнершу.
Гарднереллез у мужчин обычно проявляется признаками уретрита:

• дискомфортные ощущения, боль во время мочеиспускания;
• жидкие необильные выделения из мочеиспускательного канала, которые имеют характерный запах «тухлой рыбы»;
• выделения обнаруживаются утром, чаще при сдавливании головки члена.

Методика выявления Gardnerella vaginalis методом ПЦР

ПЦР - это полимеразная цепная реакция, с помощью которой выявляется ДНК возбудителя недуга, в данном случае Gardnerella vaginalis. Образец помещают в пробирку амплификатора, в котором циклично повторяются процессы расщепления ДНК с помощью праймеров и репликация заданного участка ДНК микроорганизма. После этого с помощью ИФА подтверждается присутствие данного патогена в исследуемом образце.

Как правильно сдать анализ

Перед сдачей анализа спермы методом ПЦР мужчинам нельзя мочиться не менее 2-х часов до забора биоматериала. За сутки до исследования нельзя принимать любые антибактериальные и противогрибковые препараты, а также исключить употребление алкогольных напитков и половые контакты. Личную гигиену рекомендуется проводить только теплой водой. 

Метод ПЦР относится к разряду наиболее достоверных по обнаружению Gardnerella vaginalis. Это объясняется высокой чувствительностью тест-системы по отношению к ДНК возбудителя, если их концентрация в образце превышает норму. В заключении указывается либо «положительно», либо «отрицательно».
 
Положительный результат подтверждает наличие ДНК Gardnerella vaginalis в сданном образце в количестве, значительно превышающем норму. Врач назначит соответствующее лечение.
Отрицательный результат подтверждает отсутствие ДНК возбудителя в сперме.
Оценивать полученные результаты должен исключительно специалист. Только врач сможет назначить эффективную терапию либо дополнительное обследование при отрицательном результате на фоне сохранения симптоматики недуга.

Важность исследования

Gardnerella vaginalis размножается у обоих полов, но чаще клиническая симптоматика проявляется у женщин. У мужчин можно обнаружить баланопостит с развитием воспалительного процесса в головке полового члена. В большинстве случаев симптомы отсутствуют, что становится благоприятным фоном для распространения патогенного микроорганизма по мочеполовой системе. Так как диагностика и лечение отсутствуют, развиваются осложнения:

• воспаление уретры;
• воспаление предстательной железы с риском развития доброкачественной гиперплазии, что негативно сказывается на половой сфере и может приводить к нарушению мочеиспускания;
• цистит, то есть воспаление мочевого пузыря, которое приводит к сильной боли в нижней части живота и нарушению мочеиспускания;
• эпидидимит – воспаление яичек, которое может привести к нарушению сперматогенеза и высокому риску бесплодия;
• баланопостит – воспаление головки полового члена, которое сопровождается выделениями, болью.

Если у пациента снижена функция иммунитета, патогенные микроорганизмы могут активно развиваться в определенном очаге тканей, вокруг которых образуется капсула. Это вызывает абсцесс с обильным накоплением гнойного содержимого. Осложнение встречается редко, так как обычно быстро уничтожается иммунитетом.

Перечисленные осложнения можно исключить, если провести лабораторное обследование в профилактических целях или при выявлении негативной симптоматики. Урологи чаще назначают ПЦР-методику за счет следующих важных данных:

• вычисление Gardnerella vaginalis по определению ДНК, что делает тест специфичным;
• получение результатов лабораторного анализа не более, чем через 3 суток (обычно данные можно получить уже на следующие день за счет быстрого исследования через автоматический анализатор);
• возможность проведения дифференциальной диагностики гарднереллеза с другими видами инфекций.

На основе полученной информации подбирают антибактериальные средства, к которым у инфекции будет максимальная степень чувствительности. Так врач назначает оптимальное лечение, которое уничтожит патогенные микроорганизмы и устранит сопутствующие симптомы.

Для чего необходим анализ

ПЦР для выявления ДНК Gardnerella vaginalis выполняют для выявления следующих данных:

• определение причин негативной симптоматики после заражения Gardnerella vaginalis, которая распространяется по мочеполовой системе;
• дифференциальная диагностика Gardnerella vaginalis с другими видами инфекции, если симптомы не специфичны или отсутствуют;
• оценка потребности в проведении антибактериальной терапии, так как ее выполняют только при доказанной инфекции;
• выявление эффективности проведенной терапии, о положительном результате можно судить, если патогенные микроорганизмы исчезают из биоматериала.

Даже если в биоматериале выявлено минимальное количество инфекции, это показание для проведения антибактериальной терапии. Она может быстро размножаться в мочеполовой системе, усиливая воспаление в тканях. Поэтому необходимо устранить инфекцию на ранних этапах развития.

Особенности анализа

Для ПЦР методики по выявлению Gardnerella vaginalis характерны следующие особенности, которые требуется учитывать врачу и пациенту:

• допустимо использовать разные виды биологического материала, но для оценки состояния половой системы рекомендуется выбрать сперму;
• в случае подтверждения положительного результата по выявлению Gardnerella vaginalis у мужчины необходимо проверить полового партнера, чтобы не допустить рецидива после лечения;
• полученный биоматериал предварительно обрабатывают, чтобы из минимального количества генетического материала инфекции получить оптимальный объем, который можно изучить на анализаторе для выявления вида микроорганизма;
• как только обработка биоматериала закончилась, используют анализатор, в качестве которого обычно используют фотокалориметр, оценивающий не только наличие или отсутствие инфекции, но и ее точную концентрацию (эти данные потребуются для оценки степени тяжести инфекции и эффективности терапии);
• даже если пациент предоставил минимальное количество биоматериала, анализатор сможет вычислить микроорганизм, чтобы судить о наличии или отсутствии Gardnerella vaginalis;
• в случае назначения повторного анализа после завершения терапии рекомендуется выждать 2-3 недели, чтобы данные получились более достоверными, а врач мог судить о выздоровлении или потребности в назначении дополнительных препаратов.

В отличие от других исследований, ПЦР диагностика предоставляет сведения не о напряженности иммунитета в ответ на проникновение микроорганизмов, а определяет сам возбудитель инфекции.

Метод проведения анализа

Полученный образец спермы передают в лабораторию в стерильных условиях, чтобы не допустить проникновения посторонних микроорганизмов и иных веществ. Врач-лаборант выполняет следующие действия, чтобы провести ПЦР методику:

• первоначальное нагревание биоматериала до 96°, в таких условиях водородные связи между цепочками ДНК разрушаются, поэтому можно выделить отдельные нити;
• охлаждение биоматериала, чтобы добавить реагент;
• внесение реагента на основе праймеров, которые выделяют фрагмент ДНК микроорганизма, подлежащего исследованию;
• добавление ДНК-зонда, который будет обнаружен лабораторным анализатором;
• копирование полученного биоматериала до тех пор, пока не будет получен достаточный объем, подлежащий исследованию;
• внесение обработанного биоматериала в фотокалориметр, который программируют на определенную длину волны, идентифицирующую микроорганизм;
• расчет микроорганизма в случае его выявления.

В конце исследования аппарат распечатает бланк, где будет указана информация по наличию или отсутствию Gardnerella vaginalis. В случае определения микроорганизма дополнительно проводится расчет его точной концентрации.