Toxoplasma gondii (ПЦР спермы)

ПЦР диагностика спермы на Toxoplasma gondii

Анализ спермы методом ПЦР дает возможность с высокой точностью выявить ДНК Toxoplasma gondii, который является возбудителем токсоплазмоза. Этот метод позволит определить форму заболевания, а также устойчивость микроорганизма к воздействию антибактериальных препаратов.

Toxoplasma gondii относится к классу простейших. Ввиду этого, развитие микроорганизма возможно исключительно внутри клеток организма-хозяина. Основными переносчиками инфекции являются кошки и другие кошачьи. Они выделяют с фекалиями ооцисты, которые очень устойчивы к воздействию условий внешней среды. Попадая в организм промежуточного хозяина, которым является человек, ооцисты поражают клетки мышечной и нервной ткани. Заражение происходит при употреблении плохо обработанных термически мясных продуктов, овощей, а также в случае несоблюдения гигиенических норм во время контакта с домашними котами.

Когда делают анализ

Анализ на выявление Toxoplasma gondii назначается при подозрении на развитие токсоплазменной инфекции. При этом мужчина может жаловаться на повышение температуры тела до 38, поражение глаз инфекционной природы, частые приступы головной боли, неврологические нарушения.

Помимо этого, обследование рекомендуется при подозрении на бактерионосительство, выявлении иммунодефита, планировании беременности (сдают анализ оба супруга), положительном иммуноанализе крови на антитела к возбудителю для подтверждения установленного ранее диагноза.

Важность исследования

Токсоплазмоз может развиваться у обоих полов, но в мужском организме распространяется не только по внутренним органам и тканям, но также в сперму. Здесь ее можно выявить при помощи ПЦР исследования, чтобы оценить риски для состояния половой системы. В случае отсутствия диагностики и лечения микроорганизм активно размножается и распространяется, вызывая поражение ЦНС, органов зрения, сердечно-сосудистой системы. Токсоплазма опасна для беременной женщины и плода в случае половой связи с зараженным мужчиной. Это чревато следующими осложнениями:

• энцефалит, менингит, паралич, психиатрические патологии;
• снижение функции зрения, близорукость, нарушение трофики зрительного нерва с высоким риском слепоты;
• миокардит, перикардит, аритмия, сердечная недостаточность;
• внутриутробное заражение плода с высоким риском неврологических патологий (микроцефалия, гидроцефалия, нарушение психомоторных функций), нарушения роста и развития многих отделов организма, самопроизвольного аборта, преждевременных родов.

Несмотря на высокую опасность токсоплазмы, микроорганизм можно своевременно устранить при помощи антибактериальной терапии. Тогда осложнения исключаются. Но для подбора оптимальных препаратов необходимо провести первичную диагностику. Наиболее эффективным анализом считается ПЦР, так как во время диагностики микроорганизм отслеживают по ДНК, которая специфична именно для него, среди других вирусов и бактерий не встречается. Поэтому полученные результаты всегда информативные, по ним можно устанавливать диагноз и сразу же приступить к терапии без потребности назначения других анализов.

Для чего необходим анализ

ПЦР анализ назначают для выявления наличия или отсутствия токсоплазмы в образце спермы. При расшифровке лечащим врачом (уролог, инфекционист) удается выявить и другую информацию:

• исключение других патологий, которые могут приводить к схожим признакам;
• оценка потребности в назначении дополнительных анализов для выявления других видов инфекции, так как они могут сочетаться между собой (например, если лечение токсоплазмозы завершено, но признаки сохраняются);
• потребность в назначении специфической антибактериальной терапии, действенной именно в отношении токсоплазмы;
• оценка реакции токсоплазмы в ответ на антибактериальные препараты, в случае положительной динамики микроорганизм уничтожается, поэтому при повторном исследовании не должно выявляться даже его малейших фрагментов;
• выявление пациентов с бессимптомным носительством, при котором признаки не проявляются, но токсоплазма может передаваться половому партнеру за счет инфицированной спермы;
• проверка спермы на разные виды патогенных микроорганизмов, в том числе токсоплазмы, если пара готовится к беременности или экстракорпоральному оплодотворению.

Лечащий врач определяет потребность в назначении ПЦР диагностики для выявления токсоплазмы. Но сам пациент может проходить это исследование самостоятельно, в целях профилактики. Например, при ежегодной диспансеризации для оценки состояния половой сферы.

Правила подготовки к анализу

Мужчине следует подготовиться к обследованию. Сбор спермы нужно проводить непосредственно в медицинском учреждении в специально оборудованной комнате. В случае сбора эякулята дома, доставить контейнер с биоматериалом в лабораторию следует в течение часа.

Сбор биоматериала возможен только в процессе мастурбации. Любой половой контакт исключен, поскольку образец будет загрязнен, что исключает возможность получения точных результатов. Мужчине следует тщательно вымыть руки мылом, пенис нужно помыть теплой водой без использования гигиенических средств. Запрещены сексуальные отношения на протяжении 3 дней до манипуляции. Также следует воздержаться от мочеиспускания в течение 2-х часов. Прием любых лекарственных препаратов нужно закончить за неделю до обследования.

Изучение спермы проводится методом ПЦР. Для этого эякулят пипеткой переносится в пробирку амлификатора. Этот прибор обеспечивает цикличный нагрев и охлаждение содержимого, что катализирует процесс репликации специфического участка генома. Число ДНК-копий подсчитывает с помощью спектрофотометра.

Особенности анализа

Для ПЦР исследования по выявлению токсоплазмы характерны особенности, о которых нужно помнить врачу и пациенту:

• токсоплазму можно обнаружить во многих биологических жидкостях и тканях, но при оценке ее влияния на половую сферу рекомендуется сдавать именно сперму;
• пациент собирает биоматериал самостоятельно, но осуществляет это в стенах клинического учреждения, чтобы медперсонал доставил образец биоматериала в лабораторию сразу после получения;
• при выборе ПЦР методики необходимо провести тест быстрее, чтобы оценить содержание микрофлоры до ее изменения под влиянием внешних и внутренних факторов (это гарантия получения достоверной информации);
• исследовать ДНК микроорганизма в первоначальном виде невозможно, необходимо добавить реагенты для выделения и увеличение количества генетического материала, только после этого приступают к самой идентификации на анализаторе;
• применение правил предварительной подготовки обязательно, без них можно получить ложноотрицательные данные;
• тест безопасный, так как не требует проведения инвазивных процедур для взятия биоматериала;
• обычно период диагностики составляет не больше 3 дней, в большинстве случаев результаты приходят ранее указанного срока;
• повторные исследования можно проводить без ограничений, чаще в профилактических целях или для оценки терапии;
• положительный результат инфицирования спермы мужчины – это показание для обследования полового партнера, которому тоже необходимо пройти ПЦР диагностику.

ПЦР выполняют по этапам, в несколько стадий. Несмотря на это, все действия проводят быстро, результат всегда остается достоверным.

Метод проведения

Пациент самостоятельно собирает сперму в специальном отделении клиники. Ее передают медсестре, которая отправляет образец в лабораторию. Там сразу приступают к этапам ПЦР:

• размещение образца спермы в амплификатор, чтобы повысить температуру до значений, при которых водородные связи в ДНК начнут разрушаться, что приведет к образованию отдельных нитей;
• внесение в биоматериал праймера и ДНК-зондов по очереди в период понижения температуры, чтобы они смогли соединиться с нитями ДНК (по этим компонентам будет производиться диагностика на аппарате);
• увеличение числа выделенного генетического материала для получения достаточного объема генетической информации, которую можно идентифицировать на аппарате;
• фотокалориметрия, в процессе которой аппарат выявляет микроорганизм (в данном случае это токсоплазма), высчитывает точную концентрацию.

Благодаря методике можно не только определить содержание микроорганизма, но и вычислить его точный объем. Так изучают степень тяжести патологии, нарастание или уменьшение микроорганизмов в ответ на применение препаратов.

Расшифровка анализа

Результаты анализа выдаются в форме: «обнаружено» или «не обнаружено». Положительный результат с выявлением генетического материала возбудителя подтверждает инфицирование токсоплазмозом, активную форму течения недуга.

Отрицательный результат анализа наблюдается при:

• отсутствии заражения;
• латентной форме недуга, при которой неактивные цисты Toxoplasma gondii находятся в клетках, что подтверждает носительство инфекции;
• если после заражения прошло менее недели, то есть численность паразитов еще не увеличилась до концентраций, которые можно определить с помощью ПЦР.

В зависимости от полученных результатов врач назначит антибактериальную терапию. По ее окончанию следует сдать анализ повторно.