ПЦР диагностика спермы на HSV 2 типа

Молекулярно-биологический анализ спермы с помощью метода ПЦР, который позволяет обнаружить в организме пациента фрагменты генетического материала вируса простого герпеса 2 серотипа (HSV-2), проводится для диагностирования герпетической инфекции и оценивания успешности проводимой противовирусной терапии.

Вирус простого герпеса 2 (ПЦР спермы)

Вирус простого герпеса (ВПГ, HSV, Herpes simplex virus) 2 типа называется ано-генитальным герпес вирусом – местом локализации его поражений является область анального отверстия и мочеполовых органов. При определенных обстоятельствах данный возбудитель инфекции поражает и другие части человеческого тела, установлены случаи системного поражения.

Передается HSV-2 при незащищенной интимной близости. Клиническое течение инфекционного процесса характеризуется:

генитальными симптомами – появлением болезненных пузырьковых высыпаний на кожных покровах в зоне промежности, ануса, ягодиц, наружных и внутренних гениталий, нижних конечностей;
атипичными признаками – поражение кожных покровов имеет вид продольных трещин, фурункулов или эритемы;
частыми рецидивами заболевания;
малигнизацией – злокачественным перерождением клеток цервикального канала у женщин и простаты у мужчин;
снижением функции репродуктивной системы.

Реакция человеческого организма на инфицирование генитальным герпес вирусом индивидуальна и зависит от присутствия в циркулирующей крови иммунных антител к HSV I типа. Продолжительность инкубационного периода при первичном заболевании составляет приблизительно 10 дней.

Затем появляются характерные множественные высыпания, сопровождающиеся:

сильным зудом;
учащением мочеиспускания;
увеличением лимфоузлов в паховой области;
слабостью;
повышением температуры;
головной и мышечной болью.

Длится инфекционный процесс в среднем около недели. При рецидиве вируса пациент отмечает неприятные ощущения в мочеполовых органах за несколько дней до появления сыпи. Наиболее опасно инфицирование вирусом генитального герпеса беременной женщины – он провоцирует формирование многоводия, повышает вероятность выкидыша и развития неонатального герпеса, имеющего неблагоприятный для новорожденного младенца прогноз.

Когда делают анализ

Проведение анализа спермы на вирус простого герпеса 2 типа методом ПЦР необходимо при:

наличии у пациента герпетиформных высыпаний в ано-генитальной области;
ВИЧ-инфекции, лимфо-пролиферативных патологиях, иммунодефиците;
клиническом разграничении инфекционно-воспалительных процессов в мочеполовых органах;
нарушении мужской фертильности.

Правила подготовки к анализу

За двое суток до тестирования пациенту следует отказаться от посещения бани, сауны, принятия горячей ванны, интимных контактов и употребления спиртных напитков. Собирание образца спермы производят в утренние часы, до мочеиспускания, путем мастурбации в стерильную емкость.

Для выявления фрагментов ДНК герпес вируса 2 типа используют методику полимеразной цепной реакции.

Важность исследования

Герпесная инфекция 2 типа в большинстве случаев распространяется на область анального отверстия, в мочеполовую систему. В некоторых случаях она лишь локализуется в очаге поражения, не провоцируя воспаления. Однако такие пациенты являются переносчиками инфекции, поэтому могут заражать полового партнера. В случае развития патологического процесса вирус может приводить к осложнениям:

обширные воспалительные процессы в уретре, мочевом пузыре, внутренних половых органах;
снижение сперматогенеза или образование сперматозоидов со сниженной активностью и неправильной структурой;
оплодотворение яйцеклетки дефектным сперматозоидом, что приводит к развитию эмбриона с внутренними нарушениями;
внутриутробное заражение плода, так как микроорганизм может проникать через плаценту за счет небольших размеров, что приводит к неправильному росту и формированию внутренних органов, отставанию в развитии;
хроническая, рецидивирующая инфекция, которая трудно поддается лечению;
системное поражение организма, так как вирус способен проникать через кровоток во внутренние орган и ткани, в том числе нервную систему.

Для исключения перечисленных осложнений необходимо установить точный диагноз. Только так врач сможет назначить правильные методы терапии, которые будут сдерживать развитие вируса и предупреждать рецидивы. Для этого необходимо использовать лабораторный анализ. Наиболее оптимальным из них считается ПЦР методика, так как она определяет вирус по ДНК. Ни один другой лабораторный анализ не предоставляет схожие сведения.

Также важность ПЦР методики по обнаружению HSV-2 заключается в выявлении точной концентрации вируса. Это важная информация, особенно для носителей. Вирус может присутствовать в организме многих людей в спящем виде, не вызывая негативные симптомы. Но если он начинает активно размножаться, появляются признаки инфекционно-воспалительного процесса.

Для чего необходим анализ

Цель лабораторной диагностики через ПЦР методику сводится к получению следующей информации:

наличие или отсутствие HSV-2 без клинической симптоматики, то есть выявление носительства вируса;
выявление причин негативных симптомов со стороны мочеполовой системы, чтобы установить дифференциальный диагноз с другими патологиями, проявляющимися схожими признаками;
степень тяжести патологии в зависимости от степени увеличения концентрации вирусов и проявления симптомов в совокупности;
потребность в назначении специфических действующих веществ лекарств, которые обладают влиянием только на вирус герпеса;
эффективность назначаемых методов терапии, чтобы врач мог поменять действующие вещества или дозы препаратов.

Через исследование можно не только установить присутствие вируса герпеса, но и его точный вид. Каждый из них обладает отличающимся действием на организм пациента, приводит к разной симптоматике. Врач сможет составить адекватный прогноз и рассчитать риски осложнений в зависимости от вида вируса герпеса и состояния организма.

Особенности анализа

В случае назначения ПЦР для выявления HSV-2 необходимо учитывать ряд параметров:

для оценки состояния половой системы у мужчины сдают образец спермы, причем ее количество может быть даже небольшим, это повлияет на чувствительность диагностики;
при сборе биоматериала допустимо использовать только стерильные контейнеры из аптеки, для этих целей не применяют посторонние емкости, так как в них могут содержаться посторонние микроорганизмы и вещества даже после обработки;
при выполнении первого этапа теста задействован врач-лаборант, который смешивает биоматериал с реагентами, чтобы получить достаточное количество ДНК герпесной инфекции для дальнейшей диагностики;
на втором этапе используют автоматический аппарат, который определяет разновидность ДНК и проводит расчет точного количества вируса;
за счет применения лабораторного оборудования данные получаются достоверными, поэтому при их использовании можно провести дифференциальную диагностику;
в большинстве случаев результаты анализа приходят на следующий день, так как лаборант сразу начинает выполнять исследование, при высокой загруженности клиники период может увеличиваться, но не более 3 дней.

Важно помнить, что исследование выявляет лишь наличие или отсутствие HSV-2. Если пациенту требуется определить другие виды инфекции, понадобятся дополнительные анализы. Часто герпес ослабляет иммунитет, поэтому в мочеполовую систему могут проникать и другие микроорганизмы, из-за чего многим пациентам требуется комплексная диагностика.

Метод проведения

Подготовленный образец спермы отправляют в лабораторию в стерильном контейнере, поэтому внутрь не проникают посторонние компоненты. Врач-лаборант выполняет следующие этапы диагностики:

перемещение биоматериала в термостат или инкубатор, где температуру повышают до 96°, чтобы разъединить цепочки ДНК до отдельных нитей через разрушение водородных связей;
снижение температуры биоматериала до 72°;
введение двух различных реагентов, чтобы в биоматериал попал праймер и ДНК-зонд, они необходимы для выделения участка генетического материала, подлежащего определению;
копирование выделенной генетической информации, так можно отследить наличие вируса, даже если в образце содержатся его остатки;
очередное снижение температуры, чтобы подготовить образец для оценки на аппарате;
перемещение обработанного образца в фотокалориметр, на котором задают длину волны, характерную для HSV-2;
подключение аппарата, который определяет наличие или отсутствие вируса и его точную концентрацию при помощи пропускания световых лучей, которые отражаются только от HSV-2.

После завершения диагностики распечатывают бланк и передают пациенту. Но расшифровкой должен заниматься уролог, инфекционист, репродуктолог.

Расшифровка анализа

Заключение исследования «геномный материал HSV-2 не обнаружен» считается отрицательным результатом анализа спермы, который опровергает инфицирование пациента генитальным герпесом.

Положительный результат свидетельствует о наличии герпетического инфекционного процесса.