Вирус Варицелла-Зостер (ПЦР спермы)

ПЦР диагностика спермы на вирус Varicella Zoster

Анализ спермы методом ПЦР проводится для выявления ДНК вируса Varicella Zoster в образце биологической жидкости.

Вирус Varicella Zoster или вирус герпеса 3-го типа является представителем семейства герпес вирусов, который провоцирует развитие ветряной оспы, опоясывающего лишая. Инфицирование возможно бытовым либо воздушно-капельным путем. Половым путем не передается, однако при вторичном заражении концентрация вирусных частиц возрастает во всех биологических жидкостях, включая сперму. Поэтому при невозможно проведения анализа крови, назначается исследование эякулята. Вирус поражает спинномозговые сенсорные ганглии, в которых сохраняется на протяжении всей жизни до тех пор, пока снизится иммунная защита.

Когда делают анализ

Анализ спермы на вирус Varicella Zoster рекомендуется в рамках проведения диагностики заболеваний органов мочеполовой системы, которые могут быть спровоцированы вирусом герпеса 3-го типа. Также результаты анализа используются при дифференциальной диагностике дерматологических патологий, ассоциированных с VZV.

Исследование рекомендуется при появлении следующих симптомов:

• лихорадка;
• признаки интоксикации;
• везикулезные высыпания;
• общее недомогание;
• высыпания на спине, которые сопровождаются сильной невралгической болью.

Важность исследования

Вирус герпеса 3 типа или Varicella Zoster вызывает распространенные заболевания в виде ветрянки, опоясывающего лишая. В норме эти болезни благополучно переносятся большинством пациентов, не вызывают осложнений. Однако патологии могут вызвать осложнения, поэтому врачи рекомендуют проводить вакцинацию. Введение вакцины не рекомендуется в случае, если пациент уже переболел этими заболеваниями. В таких случаях требуется подтверждение содержания вируса в системном кровотоке в прошлом (если результат не предоставляет достоверной информации, дополнительно рекомендуется выявить остатки микроорганизма в сперме). Благодаря полученной информации можно провести вакцинацию, чтобы исключить следующие осложнения:

• миелит, энцефалит острого или хронического типа, так как в большинстве случаев вирус поражает именно ЦНС;
• ретинит – воспаление сетчатки глаз;
• некроз сетчатки глаз, который приводит к полной слепоте;
• офтальмологический герпес, который может привести к проблемам со зрением;
• поражение ЖКТ, сердечно-сосудистой системы;
• вирусное поражение зрительного, лицевого нерва, что может привести к хроническому болевому синдрому, нервному тику, нарушению зрения;
• присоединение вторичной бактериальной инфекции во время вирусной патологии, что чаще характерно для участков сыпи на коже (например, могут развиться фурункулы);
• пневмония, провоцирующая обширные участки воспаления с последующим фиброзом и развитием дыхательной недостаточности.

Важность исследования заключается в выявлении ветряной оспы у пациентов с размытой клинической симптоматикой. Например, если сыпь появляется на ограниченных участках тела или отсутствует. За счет постановки дифференциального диагноза врач сможет назначить правильные методы терапии, исключив назначение некачественных средств, которые не вызовут эффект, могут привести к побочным действиям.

Для чего необходим анализ

Определение герпеса 3 типа или Varicella Zoster необходимо для получения важной информации:

• дифференциальная диагностика герпеса различного вида;
• дифференциальная диагностика ветряной оспы, опоясывающего лишая с другими типами инфекции в случае размытой клинической симптоматики;
• определение носителей вируса, которые ранее контактировали с зараженным пациентом, но у самих признаки инфекции не появились;
• выявление наличия или отсутствия ранее пережитой инфекции для оценки потребности назначения вакцинации, препятствующей заражению герпесом 3 типа или Varicella Zoster;
• подготовка к беременности естественным путем или к экстракорпоральному оплодотворению, так как в этом случае в биоматериале не должно содержаться любых типов инфекций, в том числе герпетических;
• отслеживание результата проведенной вакцинации, чтобы оценить степень распространения введенного препарата (дополнительно может потребоваться иммунологическое исследование, чтобы оценить реакцию иммунитета в ответ на внедрение вакцины).

Так как у каждого пациента ответная реакция организма на внедрение вируса может быть различна, лучше всего выбирать именно лабораторное исследование различных биологических жидкостей, в том числе спермы.

Методика проведения анализа

Обнаружение ДНК вируса Varicella Zoster проводится методом ПЦР в режиме «реального времени», что позволяет выявить возбудителя при латентном течении инфекции с поражением нервных ганглиев.

Основу метода составляет многократное увеличение концентрации ДНК-звеньев возбудителя заболевания в образце биоматериала, в данном случае сперме. Образец помещают в емкость амплификатора. Предварительно здесь закрепили энзим ДНК-полимеразу, который прикрепляется к специфичному для данного штамма вируса участку генетического материала.

После этого пробирку нагревают до 95 градусов, что стимулирует процесс репликации ДНК. Один цикл амплификации длится 3 минуты. Для воссоздания достаточного количества копий генома достаточно 30-40 циклов. Визуально образованные ДНК определяются методом электрофореза.

Больному нужно подготовиться к анализу. Сбор биоматериала следует проводить в медучреждении в специально оборудованной комнате. Образец спермы обследуемый получает путем мастурбации. Предварительно следует тщательно вымыть руки, помыть половой орган водой. За неделю до манипуляции рекомендуется прекратить прием антибактериальных, противовирусных, гормональных препаратов. Нельзя мочиться на протяжении 2-х часов до сбора биоматериала. Также рекомендуется отказаться от коитуса в течении 3-х дней до процедуры.

Особенности анализа

Для ПЦР диагностики по выявлению герпеса 3 типа или Varicella Zoster выделяют ряд особенностей:

• обычно для оценки вирусной инфекции проводят диагностику венозной крови, лишь в некоторых случаях назначают сбор спермы;
• биоматериал должен быть только свежим, недопустимо хранение в холодильнике или в морозильной камере;
• с момента сбора вплоть до непосредственной диагностики биоматериал должен храниться в стерильных условиях;
• подготовительные процедуры биоматериала осуществляет врач-лаборант, так как вирус невозможно идентифицировать в первоначальной форме, предварительно необходимо добавить специфические реагенты, воздействовать температурами разных режимов, провести многократное копирование ДНК;
• само исследование проводится при помощи полуавтоматического оборудования, поэтому можно не только отследить наличие вируса, но и его точную концентрацию в биоматериале;
• обычно результаты приходят уже на следующий день, поэтому у врача появляется возможность быстро назначить методы терапии при подтверждении инфекции или провести вакцинацию для ее предотвращения;
• если вирус был подтвержден при первичном исследовании, повторная диагностика не требуется, так как у пациента сохраняется пожизненный иммунитет;
• в случае выявления положительной динамики после введения вакцины в дальнейшем может потребоваться повторное обследование пациента, так как искусственный иммунитет может со временем ослабевать спустя многие годы, что требует повторного введения вакцины.

Диагностика спермы ПЦР оборудованием не несет угрозы для самочувствия пациента, поэтому методика не имеет ограничений. Но ее рекомендуется выполнять только после предварительной подготовки, чтобы увеличить достоверность данных.

Важные критерии

В процессе подготовки, диагностики и расшифровки полученных данных необходимо учитывать следующие критерии:

• даже если в сперме была обнаружена ДНК герпеса 3 типа или Varicella Zoster, это не свидетельствует о том, что негативная клиническая симптоматика проявляется из-за ветряной оспы или опоясывающего лишая, необходимо дополнительно учитывать клиническую симптоматику;
• в случае получения отрицательных результатов можно судить об отсутствии заражения вирусом или неэффективности проводимой вакцинации, так как ПЦР оборудование может обнаружить даже малейшие фрагменты микроорганизма.

При отсутствии заражения или вакцинации всегда приходит отрицательный результат лабораторного теста. Именно поэтому лечащий врач в большинстве случаев назначает ПЦР методику, чтобы получить достоверные и информативные данные, без риска ложноотрицательных и ложноположительных результатов.

Расшифровка анализа

Метод ПЦР качественный, поэтому результаты обследования выдаются в форме: «обнаружено» или «не обнаружено».

Положительный результат с обнаружением ДНК вируса наблюдается при заражении вирусом Varicella Zoster (возможно появление симптомов ветряной оспы) и реактивации вирусной инфекции в виде опоясывающего лишая.

Отрицательный результат анализа подтверждает отсутствие инфицирования. Однако при появлении симптомов, свойственных герпетической инфекции рекомендуется пройти дополнительное обследование.