Chlamydia trachomatis (ПЦР диагностика спермы)

ПЦР диагностика спермы на Chlamydia trachomatis

ПЦР диагностику спермы на Chlamydia trachomatis проводят для постановки точного диагноза при скрытых формах хламидиоза, во время дифференциального диагностирования инфекций, передающихся половым путем, при лечении бесплодия, проверки эффективности рекомендуемой терапии. Своевременное проведение анализа ПЦР позволяет обнаружить недуг на начальных стадиях, когда выявить возбудителя с помощью стандартных серологических реакций невозможно. Степень точности исследования варьируется от 80 до 97%.

Chlamydia trachomatis - внутриклеточный паразит, который ввиду содержания РНК, ДНК и клеточной оболочки, относится к бактериям. Это один из четырех подвидов грамотрицательных бактерий рода Chlamydia.
Этот подвид паразитирует в эпителиальных клетках слизистых оболочек и конъюнктивы, а также эпителии, выстилающем внутренние поверхности мочеполовых органов. Заразиться хламидиозом можно половым путем. Следует отметить, что при отсутствии лечения недуг переходит в хроническую форму, что влечет воспалительные заболевания органов таза и даже бесплодие.

Симптомы хламидиоза

У мужчин хламидиоз часто протекает практически бессимптомно. Только 50% больных отмечали появление таких проявлений:

• покраснение кожи вокруг наружного отверстия мочеиспускательного канала, которое может сохраняться несколько месяцев, не доставляя особого дискомфорта больному;
• необильные прозрачные выделения;
• только через 2-3 недели после инфицирования в моче могут появиться белесые нити гноя;
• процесс мочеиспускания может начинаться и/или оканчиваться кровянистыми выделениями;
• болезненные ощущения в мочеиспускательном канале;
• дискомфорт в нижней части живота, уретре;
• отечность мошонки;
• иногда - температура тела поднимается до 38, появляется апатия и мышечная слабость.

При появлении таких симптомов следует обратиться к урологу.

Важность исследования

После контакта с половым партнером, зараженным хламидиями, всегда происходит распространение инфекции по половым путям. Поэтому микроорганизм сосредоточен в сперме, что можно выявить в ходе ПЦР-анализа. Если микроорганизм продолжит размножаться в половых путях, это приведет к осложнениям:

• эпидидимит – воспаление придатка яичка, которое приводит к болевому синдрому в области мошонки, сопутствующему покраснению, отеку;
• бесплодие с нарушением сперматогенеза, так как при длительном воспалительном процессе структура яичек замещается соединительнотканными волокнами, формируются спайки в семявыводящих путях;
• болезнь Рейтера – воспаление в конъюнктиве, уретре, суставах, кожных покровах, что связано с обильным распространением хламидии;
• простатит – переход инфекционно-воспалительного процесса на предстательную железу, что сопровождается болью, затрудненностью мочеиспускания, посторонними выделениями из уретры, нарушением потенции (если воспаление не купировать на ранних этапах, оно перейдет в хронический процесс, вызвав гиперплазию простаты);
• стриктура уретры – сужение мочеиспускательного канала, сопровождающееся затрудненностью мочеиспускания;
• ослабление либидо в совокупности со сниженной потенцией или полным ее отсутствием (развивается эректильная дисфункция).

Чем раньше провести лабораторную диагностику при помощи ПЦР исследования, тем выше шанс своевременного обнаружения заражения хламидией и назначения правильной терапии.

Важность проведения именно ПЦР исследования обусловлена его достоверностью. Ни один другой тест не способен выявить хламидии в образце спермы с такой точностью, как ПЦР. Именно на основе этого анализа можно провести дифференциальную диагностику, установить точный диагноз. После этого сразу можно приступать к терапии, направленную на уничтожение именно хламидиоза. Это обеспечивает назначение более правильных антибиотиков и быстрое устранение негативной симптоматики.

Для чего необходим анализ

Полимеразную цепную реакцию для обнаружения хламидии трахоматис назначают для получения следующих данных:

• наличие или отсутствие хламидиоза при появлении негативной клинической симптоматики;
• оценка риска развития хламидиоза в профилактических целях, такой тест рекомендуется сдавать всем мужчинам, которые не пользуются барьерными методами контрацепции при частых сменах половых партнеров;
• определение потребности в назначении антибактериальных средств, направленных именно против хламидии (если требуется выявить максимальную чувствительность микроорганизма или предыдущее лечение не привело к эффекту, положительный результат ПЦР исследования свидетельствует о прямом показании для проведения микробиологического анализа для подбора действующих веществ антибиотиков);
• отслеживание качества проведенной терапии, в данном случае необходимо выждать небольшое время, чтобы из половых путей устранились любые следы микроорганизма, что увеличит гарантию на получение достоверных данных.

Потребность назначения анализа определяет лечащий врач. Но также любой пациент может пройти его самостоятельно в профилактических целях, чтобы выявить риск наличия хламидии.

Особенности анализа спермы на Chlamydia trachomatis

Для ПЦР методики по выявлению хламидиоза характерны следующие особенности:

• потребность в сборе минимального количества биоматериала, даже в нем будет обнаружен малейший генетический фрагмент возбудителя инфекции;
• потребность в соблюдении полноценной стерильности с момента сбора до непосредственного проведения теста;
• выявление патогенного микроорганизма за счет идентификации его генетического материала в виде ДНК;
• проведение дифференциальной диагностики хламидиоза с любыми другими типами половых инфекций за счет достоверности результатов по выявлению генетического материала;
• суть теста сводится к многократному увеличению генетического фрагмента возбудителя, чтобы создать достаточное количество образца, исследуемого на анализаторе;
• отсутствие вреда для пациента при выполнении теста, за счет чего его можно назначать многократно в процессе лечения или после завершения терапии;
• максимальный период выполнения анализа составляет 2-3 дня, после чего сразу можно перейти к лечению при получении положительных данных.

В отличие от микробиологического теста, при использовании ПЦР-анализа результаты приходят намного быстрее.

Показания к назначению анализа

Для проведения ПЦР-методики по обнаружению хламидии трахоматис свойственны следующие показания:

• профилактическое обследование при отсутствии негативной симптоматики;
• появление признаков, свидетельствующих о половой инфекции;
• продолжительное отсутствие зачатия ребенка;
• планирование беременности или экстракорпорального оплодотворения;
• случайный половой контакт, при котором не использовался барьерный метод контрацепции;
• выявление хламидиоза у полового партнера.

Тест назначают многие лечащие врачи – терапевты, урологи, инфекционисты, гинекологи.

Методика ПЦР определения Chlamydia trachomatis

ПЦР - лабораторный метод исследования, основанный на процессе амплификации, то есть способности воссоздавать требуемое число копий искомой цепи ДНК при ее выявлении в исследуемом биоматериале. В данном случае, сперма помещается в емкость амплификатора.

ПЦР исследования циклично повторяется несколько шагов:

1. Денатурация ДНК на две отдельные цепочки с помощью воздействия высоких температур.
2. Отжиг: после остывания исследуемого образца добавляют раствор двух праймеров (заданные последовательности азотистых оснований, специфично распознающих и связывающихся с заданными последовательности ДНК микроорганизмов).
3. Элонганция: добавляется фермент ДНК-полимераза и достраивается цепь ДНК от праймера, который присоединился на 2-ой стадии. То есть, на участке присоединения праймера формируется еще одна комплементарная цепи ДНК микроорганизма.

Этот процесс повторяется до 40 циклов, благодаря чему формируется огромное количество ДНК-копий. После этого определяют их наличие в исследуемом биоматериале. Естественно, обнаружить эти копии можно только, если искомая ДНК была в образце.

Подготовка к исследованию

Особой подготовки к ПЦР диагностике не требуется. Биоматериалом для проведения исследования является сперма. За месяц до сдачи анализов следует прекратить антибактериальную терапию. За 3 дня до забора образца запрещено вступать в половые отношения, а за 24 часа - личную гигиену допускается проводить только теплой водой без применения любых гигиенических средств. К тому же после последнего мочеиспускания должно минуть не менее 3 часов.

Интерпретация результатов анализа

Нормальным считается отрицательный результат, что свидетельствует об отсутствии ДНК Chlamydia trachomatis в исследуемом образце спермы.

Отрицательный результат лабораторного анализа возможен в следующих случаях:

• отсутствие инфекции на данный момент;
• успешно проведенное лечение антибактериальными средствами, которые полностью устранили микроорганизм из половых путей.

Положительный результат бывает двух видов:

• большой объем микроорганизма – наличие инфекционно-воспалительного процесса с явной клинической симптоматикой, которая указывает на первопричину в виде размножения хламидии;
• небольшой объем микроорганизма – присутствие хламидии в образце биоматериала, но высокий процент вероятности развития воспалительного процесса вследствие заражения другими возбудителями.

Хламидии не входят в условно-патогенную микрофлору. Их выявление – прямое показание для проведения специфической антибактериальной терапии.