Анализ крови на Toxocara IgG (титр)

Серологический анализ крови на Toxocara IgG – лабораторное иммуноферментное исследование, цель которого – выявление антител класса IgG к антигенам возбудителя токсокароза.

Токсокароз – паразитарная инфекция, вызываемая круглым червем (нематодой), а именно ─ токсокарой. Источником заболевания служат домашние животные (собаки и кошки), а также дикие представители семейства Псовых (волки, лисицы), которые выделяют яйца гельминта в окружающую среду с испражнениями. Заражение происходит в результате проглатывания яиц или при контакте с больным животным. Клиническая картина зависит от вида токсокароза. Глазная форма характеризуется развитием увеитов, кератитов, папиллитов, абсцессов стекловидного тела и других офтальмологических воспалительных заболеваний. При висцеральной форме в патологический процесс вовлекаются дыхательная и сердечно-сосудистая система, страдает пищеварительный тракт и головной мозг, развиваются лимфоаденопатия и аллергия.

IgG – специфические антитела, отвечающие за вторичный гуморальный иммунитет. Они составляют большую часть белков плазмы, поэтому их легче всего выявить. Иммуноглобулины класса G начинают вырабатываться несколько позже, но в то же время и циркулируют в крови намного дольше, сохраняя специфический иммунитет и защищая организм от повторного инфицирования.

IgG антитела появляются примерно через 4-6 недель после инфицирования токсокарозом. Своей предельной концентрации они достигают по прошествии двух-трех месяцев, а далее их уровень идет на спад. После выздоровления антитела IgG продолжают сохранятся в крови длительное время. Серологический анализ на антитела к токсокарам выступает высокоинформативным исследованием, проводимым для подтверждения диагноза токсокароз.

Показания к проведению анализа на Toxocara

Серологический анализ крови на Toxocara с определением титра IgG назначают в следующих случаях:

дифференциальная диагностика токсокароза с другими гельминтозами;
профилактическое обследование лиц, входящих в группу риска (животноводы, кинологи, ветеринары, фермеры);
резкое одностороннее снижение остроты зрения;
обследование детей с лихорадкой неясного генеза и эозинофилией в крови;
диагностика токсокароза при наличии косвенных симптомов заболевания: лихорадка неуточненного генеза, увеличение размеров печени, кожные высыпания, общее недомогание, желудочно-кишечные расстройства, признаки поражения легких, эозинофилия крови;
при наличии эпидемиологического анамнеза: при употреблении сырых или недостаточно термически обработанных мясных продуктов, возможно инфицированных токсокарами, при контакте с собаками, в отсутствии данных об их дегельминтизации, или почвой, содержащей личинки токсокар;
профилактическое обследование пациентов с геофагией (пищевое отклонение при котором отмечается желание к употреблению земли, глины, песка) и копрофагией (психическое расстройство, сопровождающееся желанием к употреблению фекалий).

Ограничения к проведению исследования

Анализ крови на наличие антител к токсокарам не рекомендуется выполнять:

после антибактериальной терапии. Необходимо выждать две недели, исчисляемые с момента последнего приема антибиотиков;
после массажа, инструментальной диагностики (рентген, флюорография), физиотерапевтических процедур. Следует подождать одну неделю после их прохождения.

Подготовка к сдаче анализа

Подготовка стандартная и несложная. Анализ сдают натощак. От момента последнего приема пищи должно пройти 8 часов. Накануне следует отказаться от употребления жирных и жареных блюд, а также алкоголя и сладких газированных напитков. Стараться избегать физической нагрузки и психоэмоционального перенапряжения. Непосредственно утром перед сдачей анализа воздержаться от курения.

Методика проведения анализа

Выявление антител IgG класса к Toxocara в исследуемой крови проводится методом ИФА – иммуноферментного анализа. Данный способ лабораторной диагностики основан на присущей иммуноглобулинам и соответствующим им патогенам способности вступать в особое взаимодействие, результат которого выражается в формировании комплексов «антиген-антитело».

Биологический материал сдается в медицинском центре. Квалифицированный лаборант выполняет забор крови из локтевой вены. Манипуляция безопасна, проводится в соответствии с санитарными нормами, правилами асептики и антисептики. Кровь переносится в пробирку, ее исследование осуществляется в несколько этапов:

Центрифугирование. Цельная венозная кровь непригодна для иммуноферментного анализа. Необходимо исследовать плазму крови, так как именно в ней находятся все антитела. Для этого кровь центрифугируют, то есть располагают в специальном приборе, осуществляющем ее высокоскоростное (около 1000 оборотов в минуту) вращение. При таком воздействии кровь распадается на фракции.
Работа с полистироловым планшетом. При проведении исследования используется специальный рабочий планшет. Плазму крови, используя стерильный медицинский шприц, распределяют по лункам, которым оснащен планшет. Также в лунки вносят конъюгат – синтезируемую в искусственных условиях молекулу, в составе которой отмечаются антигены к токсокарам.
Инкубация. Для формирования иммунных комплексов необходимо создать оптимальные температурные условия. С этой целью используется прибор для инкубации, который искусственно воспроизводит температуру человеческого тела.
Фотокалориметр. Определить наличие антител к Toxocara и в случае обнаружения установить их титр позволяет специальный прибор – фотокалориметр, который просвечивает исследуемую плазму с внесенным в нее конъюгатом.

Расшифровка результатов

Референсные значения находятся в рамках диагностического титра 1:100. В зависимости от полученных данных результаты анализа могут трактоваться следующим образом:

отрицательный (коэффициент позитивности пробы (КП) < 1,0);
слабоположительный (сомнительный) – титр находится в рамках от 1:200 до 1:400;
положительный (титр от 1:800 и выше).

Следует учитывать, что отрицательный результат не может однозначно говорить об отсутствии заболевания. Такие результаты могут свидетельствовать о раннем инфицировании, когда еще антитела G не успели выработаться в достаточном количестве, или слабом иммунитете.

Положительный результат подтверждает наличие инфекции или перенесенный в прошлом токсокароз, а также может говорить о его скрытом течении в организме. Но прежде чем поставить окончательный диагноз, специалист проводит комплексное обследование и собирает эпидемиологический анамнез.

Риск получения ложных данных

Несмотря на высокую точность серологического скрининга, его информативность и достоверность, не исключается вероятность получения искаженных результатов. Так, ложноположительные, а равно и ложноотрицательные значения, могут возникнуть вследствие:

ненадлежащей подготовки к исследованию, несоблюдением рекомендаций специалиста, проведение анализа в период временных ограничений;
нарушений при заборе венозной крови, при ее хранении или транспортировки (загрязнение пробирки, длительный период хранения);
ошибки, допущенные в ходе выполнения иммуноферментного анализа (применение цельной крови, просроченного конъюгата).

Ложноотрицательные результаты могут быть получены у лиц, имеющих патологии иммунной системы, при которых наблюдаются нарушения иммунного ответа вплоть до его полного отсутствия. Ложноотрицательные результаты могут встречаться у пациентов с глазной формой токсокароза по причине слабого антигенного воздействия.

Важные замечания

В отличие от иных гельминтозов, для диагностики токсокароза не применяется анализ кала, так ее информативность сведена к нулю. Это связано с тем, что Toxocara, внедряясь в организм человека, не способны достигать своего половозрелого состояния, ввиду чего обнаружить взрослых особей или их яйца при исследовании фекалий невозможно.

Для повышения информативности исследования, выявления формы токсокароза рекомендуется проводить наряду с настоящим анализом и исследование на наличие в крови антител IgМ класса к токсокарам. Так как IgМ антитела формируются раньше, то это позволяет распознать заболевание при отрицательном результате исследования на IgG антитела, вызванным ранним инфицированием.

Анализ на установления титра IgG антител к Toxocara, проводимый в динамике, позволяет оценивать эффективность проводимых лечебных мероприятий. На их эффективность указывает снижение титра выявленных антител.

При интерпретации результатов и постановке диагноза обязательно учитывается эпидемиологический анамнез пациента: контакт с почвой, песком, собаками, факты употребления сырого или недостаточно термически обработанного мяса, а также клиническая картина заболевания.

Профилактика токсокароза сводится преимущественно к соблюдению требований гигиены, отказа от контакта с собаками, данные о дегельминтизации которых не известны.