Анализ на стронгилоидоз

Серологические исследования: Strongiloides IgG

Диагностика стронгилоидоза проводится с использованием серологического анализа, позволяющего обнаружить в крови пациента специфические антитела IgG, которые вырабатывает иммунная система человека в ответ на проникновение в организм Strongiloides. Cтронгилоидозом называется одно из разновидностей паразитарных заболеваний, которое вызывает специфический крупный круглый гельминт из вида Strongyloides - кишечная угрица.

Источник заражения - больной человек, гельминтоз передается алиментарным способом - при тесном контакте с инфицированным, через зараженную воду, пищу, почву. Попадая в организм человека, личинки стронгилид проникают в кровеносную и лимфатическую систему и по циркулирующей крови разносятся к пищеварительным органам и легким.

Очень часто болезнь протекает без выраженных клинических признаков. Ранняя стадия инвазии характеризуется аллергической реакцией, которая проявляется папуллезными зудящими высыпаниями на кожных покровах. Перемещение личинок паразита в легкие вызывает развитие пневмонии, протекающей с одышкой, приступами удушья, выделением с кашлем крови. На более поздних стадиях стронгилоидоза наблюдаются нарушения органов пищеварительного тракта, больные жалуются на тошноту, болевые ощущения в животе, тяжелую диарею. У пациентов со сниженным иммунитетом развиваются патологические состояния, несущие угрозу жизни.

Антитела IgG класса появляются в русле крови по прошествии примерно 14-20 дней с момента инфицирования возбудителем стронгилоидоза. Своего максимума они достигают в острую фазу инфекционного процесса, после чего их уровень медленно идет на спад. Невысокий титр IgG-антител сохраняется и после выздоровления пациента, циркулируя в крови на протяжении 6-12 месяцев.

Когда назначают анализ

Практикующие специалисты - терапевты, инфекционисты, гастроэнтерологи, пульмонологи, иммунологи назначают проведение серологического анализа при:

• наличии у пациента клинических признаков стронгилоидоза;
• решении вопроса о проведении иммуно-супрессивного лечения пациентов с нарушениями со стороны пищеварительного тракта неясной этиологии;
• обследовании пациентов по эпидемиологическим показаниям (наличие контактов с больным стронгилоидозом, пребывание в тропиках).

Кому показано проведение анализа

Проведение исследования назначают квалифицированные терапевты, инфекционисты, гастроэнтерологи, пульмонологи. Показанием к выполнению анализа является наличие у пациента следующих патологических симптомов, указывающих на вероятное инфицирование стронгилоидозом:

• зудящие высыпания на кожном покрове;
• нарушение стула;
• тошнота, нередко приводящая к рвоте;
• спастический кашель;
• суставная и мышечная боль;
• желтизна кожи и склер.

В особенности тестирование необходимо проходить лицам, у которых наряду с патологической симптоматикой, по результатам общего анализа крови установлено повышение концентрации эозинофилов в пределах 6-15%. При этом стоит учитывать, если инфицирование стронгилоидозом произошло в период приема иммуноугнетающих лекарственных средств, то уровень эозинофилов может оставаться в корректных значениях. Также на поражение организма стронгилоидозом может указывать увеличение печени и селезенки.

Подготовка к анализу

Накануне анализа крови на Strongiloides пациенту рекомендуется:

• воздержаться от курения, приема алкогольных напитков, переедания;
• снизить физическую активность;
• сдавать кровь натощак, до выполнения других медицинских манипуляций;
• два дня до исследования, во избежание хилеза крови, запрещается употреблять жирные продукты;
• перед анализом следует выдержать восьмичасовой период голодания. В последний прием пищи следует употреблять низкокалорийные, легко усваиваемые организмом продукты. В день анализа допустимо только пить обычную воду;
• 10 минут до процедуры получения образца крови обследуемому рекомендуется посидеть, чтобы нормализовалось дыхание, пульс;
• сдавать кровь после курса антибиотиков следует не раньше, чем через 2 недели с момента завершения терапии;
• после инструментальных видов диагностики, а также после массажа или физиотерапевтического лечения проводить исследование можно спустя как минимум одну неделю;
• при приеме каких-либо препаратов необходимо сообщать врачу наименование медикамента и его дозировку.

Методика проведения анализа

Для проведения серологического исследования используют биологический материал - плазма венозной крови. Забор производят в утреннее время в лабораторных условиях. Для обнаружения в исследуемом образце биоматериала антител класса G к антигенам Strongyloides используют методику полуколичественного иммуноферментного анализа.

Иммуноферментный анализ базируется на способности антител вступать во взаимодействие с антигенами и формировать иммунные комплексы. Исследование крови выполняется в несколько этапов:

• Центрифугирование. Находящаяся в пробирке проба крови центрифугируется, то есть помещается в специальную аппаратуру, где происходит ее вращение на скорости 1000 оборотов в одну минуту. Данная манипуляция, в ходе которой кровь распадается на фракции, необходима для свободного отделения плазмы крови, которая содержит в себе антитела и является объектом выполнения исследования.
• Работа с планшетом. При помощи шприца производится забор плазмы крови и ее дальнейшее распределение по лункам специального планшета. В лунки также вносится конъюгат – искусственно синтезируемая молекула, содержащая антигены к Strongyloides. В случае, если в плазме крови имеются IgG антитела к возбудителю стронгилоидоза, то произойдет их взаимодействие с антигенами, выражающееся в формировании комплекса «антиген» - «антитело».
• Инкубация. Для создания оптимальных условий для формирования иммуннокомплекса рабочий планшет помещают в прибор для инкубации. Особенность данного оборудования заключается в установленном в нем температурном режиме, который максимально приближен к температуре тела человека.
• Фотокалориметр. На завершающей стадии исследования рабочий планшет отправляется в специальный аппарат – фотокалориметр. В нем происходит просвечивание исследуемой биологической жидкости, выявление искомых антител и установление их уровня. Итоговые значения выдаются прибором на специальном бланке.

Расшифровка результата анализа

Итог серологического анализа выявления Strongiloides выдается в значениях:

• «отрицательно» - отсутствие инфицирования личинками стронгилид;
• «положительно» - в результате указывается коэффициент позитивности (диагностически значимый титр - более 1,01), который свидетельствует об инвазии кишечной угрицей.

Отрицательный результат не всегда свидетельствует об отсутствии инфицирования организма возбудителем стронгилоидоза. Он также может иметь место при раннем проведении тестирования, в начальный период заражения, когда IgG-антитела еще не сформировались. Также отрицательный результат может явиться следствием патологий работы иммунной системы. Так, при нарушении иммунного ответа, при инфицировании стронгилоидозом иммунная система не вырабатывает соответствующие антитела. В таком случае результат считается ложноотрицательным.

Положительный результат может указывать как на острый стронгилоидоз (на фоне характерной клинической симптоматике и нарастании уровня антител при повторном исследовании с интервалом в 14 дней), так и характерен для хронической инвазии, вызванной Strongyloides.

Сомнительным считается результат, при котором выявленная концентрация IgG-антител близка к пограничным значениям для положительного или отрицательного результата. В таком случае требуется повторное тестирование по прошествии 2-3 недель. Если при повторном анализе получены аналогичные значения, то результат считается отрицательным.

Важные замечания

Иммуноферментный анализ на IgG-антитела к Strongyloides целесообразно проводить в качестве скрининга. При этом положительный результат требует проведения дополнительного обследования с целью непосредственного установления гельминта, явившегося возбудителем стронгилоидоза.

На результаты исследования может оказать влияние поражение организма иными гельминтами, относящимися, наряду с кишечной угрицей, к классу круглых червей (острицы, аскариды, свиной цепень), поскольку в таком случае возникает вероятность перекрестной реакции антител указанных гельминтов и антигенов в реактиве, применяемом для выявления возбудителя стронгилоидоза.

Серологический анализ не используется для мониторинга эффективности терапии, поскольку IgG-антитела продолжают циркулировать в крови после выздоровления.

При отрицательном результате, в случае наличия характерной симптоматики, показано повторное исследование через 10-14 дней.