Серологические исследования: Chlamydia trachomatis IgA, IgG, IgM

Хламидиоз или хламидийная инфекция - это совокупность патологических процессов и заболеваний, которые вызывают бактерии рода Chlamydia. Эти микроорганизмы являются внутриклеточными паразитами - в ходе эволюции они утратили ряд обменных функций, которые необходимы для самостоятельной жизнедеятельности, и способны к размножению только внутри других клеток.

Хламидийную инфекцию у человека вызывают 4 типа бактерий, чаще всего - Chlamydia trachomatis, которая инфицирует клетки, выстилающие слизистую мочевыводящего и цервикального канала, задней стенки носоглотки, прямой кишки, а также глаз и дыхательных путей новорожденных малышей. Заражение происходит при незащищенной половой близости и во время родов.

Любой инфекционный процесс, вызванный хламидиями, сопровождается образованием иммуноглобулинов А, М и G к специфическому липосахариду (антигену рода Chlamydia). По их появлению и концентрации в крови судят о стадии хламидиоза. Первыми иммунная система вырабатывает IgM и IgA, свидетельствующие об острой инфекции. Спустя 21 день в крови появляются специфичные к возбудителю IgG, которые сохраняются в человеческом организме много лет и свидетельствуют о заражении Chl. Trachomatis.

Серологический скрининг позволяет выявить наличие специфических иммуноглобулинов и определить уровень их концентрации. Исследование играет важную роль в диагностировании хламидийной инфекции при уретрите, цервиците, аднексите, простатите, эрозивно-язвенном поражении слизистых глаз, рта и гениталий, воспалении дыхательных путей, уретро-окуло-синовиальном синдроме.

Цель анализа

При заражении бактерией хламидия трахоматис происходит активное инфицирование организма. Важно не только определить патогенный микроорганизм, но и степень реакции иммунитета. От этого фактора будет зависеть лечение. Например, если антител недостаточно, пациенту назначают более агрессивное лечение. Также своевременное проведение исследования помогает в достижении следующих целей:

диагностика острой стадии болезни, когда требуется подобрать оптимальное лечение в зависимости от выявленного возбудителя и титра антител;
выявление хронической инфекции, при которой не всегда проявляются симптомы, но пациент остается переносчиком микроорганизма;
определение этапов выздоровления, когда больше не требуется лечение, у пациента сохраняется специфический иммунитет;
диагностика пациентов разной возрастной категории, в том числе новорожденных;
выявление пациентов, которым срочно требуется назначение антибактериальных препаратов.

Сам пациент не сможет определить конкретные цели и пути их решения при помощи лабораторного анализа. Этим занимается врач-инфекционист, терапевт, педиатр.

Характеристики иммуноглобулинов разных групп

Серологическое исследование направлено на определение иммуноглобулинов 3 групп.

IgM. Это иммуноглобулины острой фазы, которые начинают вырабатываться на 3-5 день после первичного инфицирования. Они сохраняются максимально до 3 недель, затем полностью исчезают.
IgA. Это тоже иммуноглобулины острой фазы, которые вырабатываются в меньшем количестве, помогают первому типу антител бороться с патогенным микроорганизмом.
IgG. Наиболее стойкие антитела, которые вырабатываются на 3-4 неделю после заражения микроорганизмом. Они сохраняются продолжительно, вплоть до 2 месяцев после заражения chlamydia trachomatis.

Действие сохранившихся иммуноглобулинов не стойкое. Всегда есть риск повторного заражения бактерией, но в этом случае инфекция будет протекать намного легче, так как в кровотоке уже находятся защитные клетки, которые начинают реагировать мгновенно.

Показания для проведения анализа

Исследование назначают специалисты - урологи, гинекологи, терапевты при:

наличии у пациента симптомов хламидиоза: неприятных ощущений в области гениталий - зуда, жжения, боли при половом контакте;
выявлении причин бесплодия (обследуют обоих партнеров);
установлении стадии хламидийной инфекции;
появлении у новорожденного малыша признаков пневмонии/конъюнктивита;
наличии у будущей мамы воспаления половых органов и мочеиспускательного канала;
лечении хламидиоза антибактериальными препаратами (для установления его эффективности).

Методика проведения анализа

Биоматериал для исследования - венозная кровь, забор проводят в лечебном учреждении с 8 до 11 часов.
Пациенту нужно:

Проводить скрининг до применения медикаментов.
Накануне отбора биоматериала исключить физическую нагрузку и употребление спиртного.
Ужинать не позднее 22 часов.
С утра не завтракать, не курить, не пить кофе.

Для проведения скрининга используют иммуноферментный анализ, позволяющий обнаружить иммунные антитела к антигенам Chlamydia trachomatis. Методика основана на специфической реакции - антитело и соответствующий ему патоген.

Особенности анализа

Перед проведением исследования врач напоминает пациенту о некоторых особенностях его выполнения. Это требуется для качественной подготовки, правильной интерпретации данных.

Запрет приема антибиотиков в течение 1 месяца до анализа. Большинство антибактериальных препаратов имеют широкий спектр действия, то есть направлено на уничтожение перечня бактерий. Принятый препарат может подавить активность возбудителя, что вызовет уменьшение количества иммуноглобулинов острой стадии. В итоге анализ будет расшифрован неверно.
Назначение анализов в динамике. Лучше проводить исследование несколько раз. В первую очередь оно рекомендовано в острую стадию инфицирования, затем его назначают через 2 недели. Так можно отследить, помогает ли лечение, насколько быстро наступает этап выздоровления.
Симптоматика заражения chlamydia trachomatis схожа с другими видами инфекции. Некоторые из них повышают те же виды иммуноглобулинов. Поэтому рекомендовано проводить не только с серологический анализ, но и ПЦР тест для выявления точного типа возбудителя.

При подозрении на инфекцию требуется комплексная диагностика, важно одновременно собрать анамнез, осмотреть пациента, назначить лабораторно-инструментальные тесты.

Этапы серологического анализа

За основу серологических тестов берут иммуноферментный анализ. Это исследование, выявляющее точный титр антител в минимальном объеме биологической жидкости. Для его проведения берут венозную кровь из локтевой ямки в кабинете медицинской сестры. В пробирке сразу размещен антикоагулянт, поэтому кровь продолжительно содержится в жидком виде, не сворачивается. Дальше ее отправляют в лабораторию, где анализ проводят по этапам.

Получение плазмы при помощи центрифугирования. Пробирки вставляют по кругу в аппарат, после включения он прокручивает их на высоких оборотах. Снизу пробирок оказываются форменные элементы, которые придают жидкости красный оттенок. Сверху остается плазма, в ней находятся искомые антитела.
Размещение плазмы на планшете. Для этого применяют лабораторный шприц, которым отмеряют по 1 мл жидкости. Ее переносят в лунки планшета, где на дне уже находится реагент. Это конъюгат с содержанием меченых антигенов. После смешивания реагента и конъюгата должны образоваться иммунные комплексы «антиген-антитело», которые будет выявлять дальнейший анализ.
Инкубация. Методика проводится в аппарате, который слегка повышает температуру плазмы, чтобы иммунные комплексы соединились быстрее. Для этого достаточно нескольких минут.
Применение фотокалориметра. Это полуавтоматический анализатор, который подсчитывает точное количество антител при помощи проведения лучей определенного диапазона. После подсчета данные печатаются на бланке, который подкрепляют к результатам анализа. Его выдают пациенту или лечащему врачу.

На бланке записан точный титр каждого вида иммуноглобулинов, но сам пациент не сможет понять, что именно это означает. Поэтому бланк передают врачу, который скажет, есть ли в организме инфекция, насколько сильно она развивается, какое лечение применять.

Интерпретация результата анализа

Результат меньше 0,79 Ед/л считается отрицательным - инфицирование отсутствует. Сомнительным результатом считают концентрацию IgA, IgG, IgM от 0,8 до 1,09 Ед/л. Титр выше 1,11 Ед/л считается положительным результатом и свидетельствует о заражении хламидиями.

При получении сомнительных результатов серологического маркера иммунного ответа, нужно повторить серологическое исследование через 15 дней и дополнить его прямой методикой выявления ДНК возбудителя - проведением Полимеразной Цепной Реакции.

Причины разных результатов

Положительный результат появляется в следующих случаях:

острая стадия инфекции;
переход патологии в хроническую стадию;
повторное заражение инфекцией.

Причины отрицательных результатов:

отсутствие заражения;
большой период после выздоровления, свыше 2 месяцев;
первые 3 дня после инфицирования.

Сомнительные данные появляются в случае, если иммуноглобулины присутствуют, но их титр слишком мал. Это показание для назначения повторного анализа.

Иммуноферментный анализ позволяет выявить точный титр любого вида иммуноглобулинов при помощи полуавтоматического анализатора. Если все этапы исследования пройдены правильно, данные будут точны и достоверны.