Серологическое исследование: АТ к цитомегаловирусу класса IgG (Anti-Cytomegalovirus-IgG) и IgM (Anti-Cytomegalovirus-IgM)

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) - принадлежит к семейству вирусов герпеса и проникает в организм через биологические жидкости (моча, слюна, кровь, половой секрет), а также передается малышу от инфицированной мамы - в периоды беременности, родов или кормления. Чаще всего клинические признаки цитомегаловирусной инфекции напоминают проявление мононуклеоза, пациенты жалуются на повышение температуры, боль в горле, увеличение лимфоузлов. В дальнейшем возбудитель сохраняется у человека до конца жизни в неактивном состоянии, а в периоды ослабления иммунитета снова начинает размножаться. Вирус опасен для беременных женщин развитием врожденных патологий у малыша (микроцефалия, церебральный кальциноз, глухота, снижение интеллекта). При иммунодефиците цитомегаловирус имеет тяжелые клинические проявления и может быть причиной летального исхода.

Один из способов борьбы организма с вирусом - это выработка специфических иммуноглобулинов. В крови первыми появляются антитела IgM (спустя 5-6 дней после заражения), они являются маркером острой стадии инфекции, затем их уровень постепенно снижается. В периоды обострения скрытой инфекции, концентрация IgM снова повышается. Антитела IgG появляются спустя 10-14 дней после заражения и являются маркером «иммунной памяти» к вирусу, по динамике их титра можно судить о развитии инфекционного процесса. Основная роль в диагностировании первичного цитомегаловируса отведена серологическим исследованиям – определению специфичных к Cytomegalovirus антител IgG и IgM.

Цель анализа

Цитомегаловирус может находиться в системном кровотоке большинства людей из-за высокой контагиозности. После его инфицирования вырабатываются специфические антитела, которые не дают развиться повторному заражению вирусом в организме хозяина. Особенно опасна такая инфекция для беременных женщин, так как она просачивается через плацентарный барьер, вызывая нарушение развития плода. Анализ рекомендуется выполнять в период подготовки или после наступления беременности для следующих целей:

выявление пациентов, у которых сохраняются защитные антитела против цитомегаловируса, поэтому для них не требуется использовать методы профилактики;
своевременное обнаружение цитомегаловирусной инфекции для быстрого назначения лечения до развития осложнений;
определение отсутствия антител у беременных женщин, из-за чего им рекомендуют соблюдать ряд профилактических мер для препятствия заражения в этот период;
дифференциальная диагностика различных заболеваний, которые схожи по клинической симптоматике с цитомегаловирусом, но требуют иной терапии.

Назначение на анализ обычно получают у лечащего врача. Если женщина беременна, его рекомендует гинеколог. В ином случае его можно получить у терапевта, педиатра, инфекциониста.

Показания для проведения анализа

Исследование назначают специалисты - инфекционисты, гинекологи, терапевты при наличии у пациента симптомов мононуклеоза и цитомегаловируса (воспаления пищевода и толстого кишечника, неврологических расстройств).

Скрининг также проводят при:

планировании беременности (обоим родителям);
ВИЧ-инфекции и онкологических патологиях;
лихорадке неясного происхождения и отрицательных тестах на вирус Эпштейна-Барр;
выявлении на УЗИ нарушений развития ребенка.

Обследование новорожденного малыша назначается при:

желтухе и анемии;
увеличении селезенки, печени;
нарушениях зрения/слуха;
неврологических расстройствах.

Методика проведения анализа

Биоматериал для исследования - сыворотка крови, забор проводят из вены в лечебном учреждении.

Пациенту важно:

Сдавать анализ до применения лекарственных средств.
Накануне отменить спортивные тренировки.
Ужинать не позже 23 часов, исключить жирную пищу и спиртное.
В день отбора крови не завтракать, не пить кофе или чай, не курить.

Для выполнения скрининга используется «сендвич»-методика твердофазного хемилюминесцентного иммуноферментного анализа. В ее основе лежит выявление формирования иммунного комплекса - специфического связывания антител с патогеном. Использование твердой фазы упрощает процесс разделения звеньев соединения за счет исключения одного компонента на твердой фазе и удаление веществ, которые не принимают участие в реакции.

Особенности исследования

Иммунохемилюминисцентный иммуноферментный анализ имеет ряд особенностей, о которых рекомендуется знать пациенту и врачу перед его выполнением.

Обычно анализ назначают при планировании беременности, а также после ее наступления. Но его может пройти любой другой пациент, чтобы знать, было ли заражение патогеном в прошлом или болезнь развивается в острой стадии.
Перед проведением теста не рекомендуется принимать антибиотики или противовирусные лекарства. Они подавляют инфекцию, прогрессирующую в организме, поэтому антитела начинают вырабатываться в меньшем количестве. В итоге результаты теста будут недостоверными.
Благодаря анализу можно выявить иммуноглобулины класса М или G. Но лучше всего определять их вместе, чтобы оценить динамику и стадию развития заболевания.

Если у пациента нет иммунодефицита, в его организме может находиться вирус Эпштейна-Бар или мононуклеоз. Это наиболее распространенная патология, из-за которой происходит частое инфицирование различными микроорганизмами, в том числе цитомегаловирусом.

Этапы анализа

В отличие от обычного иммуноферментного анализа, при «сендвич»-методике твердофазного имммунохемилюминисцентного типа проведение этапов немного отличается. Первоначально требуется осуществить забор венозной крови из локтевой ямки. Ее размещают в пробирке с антикоагулянтом, чтобы она продолжительно сохранялась в жидком виде. Сразу после забора ее доставляют в лабораторию, где начинают последовательные этапы исследования.

Центрифугирование. В приборе устанавливают пробирки по кругу, чтобы они были распределены равномерно. Их прокручивают на 1.000 оборотах. В конце венозная кровь разделяется на 2 фазы. Первая опускается на дно, имеет красный оттенок, так как в ней сосредоточены форменные элементы. Вторая фаза оказывается на поверхности. Это полупрозрачная, слегка желтая жидкость, содержащая иммуноглобулины и другие мелкие компоненты.
Подготовка планшета. В нем содержатся лунки из полистирола, которые обладают сорбирующими свойствами. Отбирают небольшое количество плазмы, распределяя по 1 мл в лунки. Ожидают до 15-30 минут, чтобы произошла взаимосвязь антител вместе с поверхностью лунок.
Отмывка. Этот этап проводится с целью устранения остатка антител, которые не связались с твердой фазой лунки.
Инкубация. Размещают образцы в приборе, где немного повышают температуру. Методика помогает быстрее образоваться комплексам «антиген-антитело».
Добавляют антитела, меченные ферментами. Они соединяются с уже образовавшимися иммунными комплексами, чтобы сформировать соединение «антитело-антиген-меченое антитело». В таком состоянии планшет оставляют на период от 30 минут до 5 часов, чтобы комплексы стали прочными.
Отмывка. Смывают лишние частицы, которые не успели связаться в комплексы, из-за чего остались в единичном варианте. Это помогает устранить остатки меченых антител.
Подсчет в фотокалориметре. Благодаря добавлению меченых компонентов комплексы приобретают специфическое окрашивание. Именно его распознает прибор при помощи просвечивания световыми лучами. Конечный результат подсчитывает сам аппарат, распечатывая его на бланке. Его передают лечащему врачу или пациенту.

Интенсивность окраски антител зависит от количества созданных иммунных комплексов. Чем их больше, тем она ярче, поэтому прибору будет легче распознавать искомые данные.

Интерпретация результата анализа

Показатель нормы: от 0 до 0,89 Ед/л - результат отрицательный, отсутствие Cytomegalovirus-инфекции.
Титр от 0,9 до 1,09 считается сомнительным результатом, острая инфекция возможна, скрининг нужно повторить через 12-14 дней.
Концентрация свыше 1,11 Ед/л считается положительным результатом и свидетельствует о заражении цитомегаловирусом или повторном инфицировании другим типом вируса.

Для подтверждения присутствия в крови человека различных вирусов (виремии) можно использовать ПЦР-технологии для выявления ДНК Cytomegalovirus.

Причины полученных результатов

При получении отрицательных результатов можно судить о следующих данных:

отсутствие заражения цитомегаловирусной инфекцией в настоящий момент;
первые 3 суток после заражения инфекцией, когда ни один из видов иммуноглобулинов еще не успел выработаться.

Для исключения второго фактора врачи рекомендуют проводить анализ через 2-3 недели повторно. Так можно своевременно выявить ее на ранних стадиях.

Положительный результат свидетельствует о следующих данных:

наличие инфекции в острой стадии, когда резко поднимается титр IgM;
наличие ранее перенесенной инфекции, при которой сохраняется высокий титр IgG.

Обычно в результатах указывают лишь определённое количество иммуноглобулинов. Поэтому сам пациент не сможет понять, что именно означают эти цифры. Расшифровкой должен заниматься лечащий врач, который дает направление на анализ.

Иммунохемилюминисцентный анализ проводится на основе «сендвич» – методики, при взаимосвязи антител с мечеными антигенами. Так создаются комплексы, которые быстро находит и определяет фотокалориметр. Данные получаются более достоверными, точными, ошибки могут появляться только при неправильной подготовке.

МЕДИЦИНСКИЕ АНАЛИЗЫ

Cytomegalovirus IgG и IgM