Антитела к шигеллам Флекснера

Серологическое исследование антител к шигеллам Флекснера

Серологический анализ антител к шигеллам Флекснера проводят с целью выявления бактериальной дизентерии. Острый инфекционный процесс в толстом кишечнике, возбудителем которого являются патогенные микроорганизмы рода Shigella, называется бактериальной дизентерией. Это заболевание вызывают грамотрицательные палочки Shigella sonnei и Shigella flexneri, попадающие в человеческий организм фекально-оральным путем.

Наиболее высокой контагиозностью обладают шигеллы Флекснера, которые присутствуют в экскрементах больного человека в острой фазе инфекции, а также спустя некоторое время после выздоровления. Для заражения дизентерией достаточно попадания в организм незначительного количества живых бактерий. Чаще всего инкубационный период длится пару дней, инфекционный процесс развивается быстро и характеризуется:

• кровавой диареей;
• лихорадкой;
• тенезмами;
• болью в суставах;
• болезненным мочеиспусканием;
• раздражением глаз.

После попадания в организм возбудителей инфекции иммунная система человека продуцирует специфические антитела, направленные на подавление патологического процесса. Их наличие можно обнаружить в циркулирующей крови уже спустя 7 дней после появления первых признаков инфекции. Именно поэтому для точного диагностирования дизентерии используют серологический скрининг, позволяющий обнаружить в крови пациента антитела к шигеллам Флекснера.

Патогенез

Шигеллы Флекснера имеют среднюю устойчивость к факторам внешней среды. При температуре в 60 градусов их гибель наступает в течение 10-20 минут, а при кипячении они погибают мгновенно.  Бактерии могут продолжительный период времени сохраняться в молоке и продуктах на его основе, овощах и фруктах, выживают в почве, открытых водоемах. 

Шигеллы Флекснера, вместе с зараженной пищей или водой попадают в пищеварительную систему. Далее они внедряются в прямую кишку, делая ее склонной к появлению участков кровоизлияний, язв и эрозий, а также провоцируя развитие воспалительной реакции. Бактерии нарушают нормальное пищеварение и разрушают естественный баланс кишечной флоры.

Когда назначают анализ

Основными показаниями для проведения иммунологического исследования является:

• диагностика заражения Shigella flexneri;
• выявление переболевших бактерио-носителей;
• дифференциальное диагностирование бактериальной дизентерии, патологий эндокринной системы, злокачественных опухолей толстой и прямой кишки.

Серологический скрининг, направленный на обнаружение антител к шигеллам Флекснера назначают квалифицированные гастроэнтерологи, инфекционисты, терапевты и педиатры. Проведение анализа необходимо для обследования лиц, находившимися в контакте с носителями бактериальной дизентерии, переболевшими в течение последнего года данной патологией или иными кишечными инфекциями, происхождение которых было не установлено. Также исследование может быть назначено по эпидемиологическим показаниям. С профилактической целью данный анализ рекомендуется проходить работникам ферм, птицефабрик и прочих животноводческих хозяйств.

Подготовка к анализу

Накануне анализа на антитела к к шигеллам Флекснера пациенту нужно соблюдать простые условия:

• воздержаться от переедания, курения, приема алкоголя;
• сократить физические и психоэмоциональные перегрузки;
• сдавать кровь натощак, до выполнения других медицинских манипуляций;
• отказаться от употребления жирной пищи как минимум за двое суток до проведения анализа. Содержащиеся в ней жировые частицы, способные проникать в кровоток, могут вызвать хилез крови, препятствующий выполнению серологического исследования;
• перед анализом требуется выдержать не менее чем восьмичасовой период голодания. Ужин перед тестированием должен быть предельно легким, следует включать в него только низкокалорийные продукты.; 
• в назначенную дату исследования разрешается пить обычную воду. При проведении анализа в отношении детей до 5 лет, обследуемых обязательно нужно поить кипяченой водой (за полчаса до тестирования ребенок небольшими порциями должен выпить в общем объеме 250-300 мл воды); 
• исследование проводится не ранее чем через 14 дней после приема антибиотиков и по прошествии не менее 7 дней после прохождения массажа, физиотерапии или инструментальных видов диагностики;
• перед сдачей крови обследуемому рекомендуется посидеть 10-15 минут, успокоиться и расслабиться.

Методика проведения анализа

Биологический материал - плазма венозной крови, забор производят в утреннее время в лабораторных условиях. Для обнаружения иммунных антител используют реакцию непрямой гемагглютинации. Ее принцип заключается в постепенном двукратном разведении исследуемой пробы биоматериала и добавлении в каждый образец стандартных эритроцитов, содержащих антигены шигелл Флекснера. По истечении определенного время итог теста оценивает квалифицированный серолог - о наличии в образцах специфических антител свидетельствует образование агглютининов.

Расшифровка результата анализа

Анализ полуколичественный, его результат выдается в значениях:

• «негативно» - свидетельствует об отсутствии заражения шигеллами Флекснера;
• «позитивно» - указывает на текущее инфицирование, в итоге теста указывается титр выявленных антител.

Условно-значимым титром считается уровень антител более 1:200, рекомендуется проведение повторного анализа спустя неделю. Увеличение титра более, чем в 4 раза позволяет утверждать о бактериальной дизентерии.

Расшифровывает результаты лечащий врач, который для постановки диагноза опирается также на клиническую картину и сведения, полученные при проведении иных методов лабораторной диагностики. В случае необходимости может быть назначено проведение дополнительного обследования.

Положительный результат серологического скрининга может указывать как на острую, так и на хроническую бактериальную дизентерию, а также на бактерионосительство. Кроме того, положительные значения могут быть получены в период выздоровления пациента, так как антитела продолжают циркулировать в крови. При острой дизентерии условно-значимый титр антител к шигеллам Флекснера остается в значении, превышающем норму, на протяжении более двух месяцев.

Отрицательный результат указывает на отсутствие иммунитета к бактериальной дизентерии, однако не позволяет с точностью исключить возможное инфицирование шигеллами Флекснера. Это обусловлено тем, что отрицательные значения могут быть получены ввиду раннего проведения тестирования (в начальный период заражения), до момента формирования надлежащего иммунного ответа и выработки соответствующих специфичных антител. По этой причине при получении отрицательного результата и при наличии клинической картины, характерной для бактериальной дизентерии, тестирование рекомендуется провести повторно, с временным интервалом в две недели.

Кроме того, отрицательный результат серологического исследования может иметь место при тестировании образца крови, изъятого у лиц, страдающих патологиями иммунной системы, которые сопровождаются нарушением иммунного ответа. В таких ситуациях результат считается ложноотрицательным, поскольку при фактически протекающей бактериальной дизентерии положенные антитела не вырабатываются.

Причины получения недостоверного результата

Серологический скрининг относится к числу точных, информативных методов лабораторной диагностики. Вместе с тем нельзя полностью исключать вероятность получения искаженных результатов исследования. 

Недостоверность итоговых значений может быть обусловлена:

• несоблюдением обследуемым рекомендаций врача по подготовке к забору образца крови (особенно проведение исследования на фоне приема антибактериальных препаратов);
• ошибками медицинского персонала, совершенными в процессе получения пробы биологического материала и его последующей транспортировки. Например, использование нестерильной пробирки, не соблюдение правил хранения отобранной крови и т.д.;
• нарушение установленной методики проведения серологического анализа (не проведение центрифугирования).

Указанные ошибки способны явиться причиной получения ложноположительных или с равной долей вероятности ложноотрицательных значений.

Медицинская значимость исследования

Обнаружение в крови антител к шигеллам Флекснера и диагностика бактериальной дизентерии позволяют провести необходимую терапию и тем самым, избежать развития осложнений.   Отсутствие своевременного лечения может привести к ряду негативных последствий. Так, продолжительная диарея, характерная для дизентерии, часто осложняется выпадением прямой кишки, появлением анальных трещин, развитием геморроя.  Часто на фоне дизентерии возникает дисбактериоз. В особенности заражение шигеллами Флекснера представляет опасность для детей, поскольку после инфицирования в 4% случаев наблюдается развитие конъюнктивита, артрита или уретрита.