Антитела к возбудителю паракоклюша

Серологический анализ выявления антител к возбудителю паракоклюша

Выявление антител к возбудителю паракоклюша представляет собой лабораторное серологическое исследование, направленное на диагностику заболевания. Анализ позволяет провести качественное обследование на определения специфических иммуноглобулинов к возбудителю инфекции и высчитать титр антител, указывающий на степень тяжести и стадию течения болезни.

Паракоклюш - это инфекционное заболевание, которое поражает дыхательные пути. Возбудителем инфекции является паракоклюшная палочка (Bordetella parapertussis). Она по строению похожа на палочку коклюша, но имеет более слабые патогенные свойства. Заболевание передается воздушно-капельным путем и чаще возникает в детском возрасте, что связано с возрастными особенностями иммунной системы. Источником заражения может быть больной человек или бактерионоситель без клинических проявлений болезни. Снижение иммунитета в пожилом возрасте и при иммунодефицитных состояниях способствует развитию паракоклюша и определяет тяжесть течения болезни.

По сравнению с коклюшем, паракоклюш имеет легкое течение и слабую выраженность симптомов. В пароксизмальную стадию заболевания редко возникает приступообразный кашель. Обычно больных беспокоит сухой кашель без спазматических приступов. Общая интоксикация выражена незначительно, выздоровление наступает быстрее, чем при коклюше.

Появление в крови специфических антител обнаруживают через 7-14 дней после возникновения первых симптомов болезни. К основным антигенам, взаимодействующим с anti-Bordetella parapertussis относят: липоолигосахарид , коклюшный токсин, филаментозный гемагглютинин, белок пертактин и фимбриальные антигены. Все классы иммуноглобулинов вырабатываются в ответ на инфекцию. Титр защитных антител постепенно снижается после вакцинации АКДС и после заболевания в течение первых трех лет.

Кому назначается анализ на антитела к паракоклюшу?

Исследование рекомендовано лицам, нуждающимся в обследовании после тесного контакта с зараженным паракоклюшем; людям, которые получили направление от врача на дополнительную лабораторную диагностику в комплексе проведения микробиологических, клинических анализов при выявлении паракоклюша; пациентам с продолжительным кашлем на фоне отсутствия подтверждения диагноза «паракоклюш» бактериологическим тестом; лицам, нуждающимся в ретроспективной диагностике и эпидемиологических исследованиях; вакцинированным людям, желающим проверить степень выработки иммунитета в результате иммунизации; детям с симптомами приступообразного кашля, не проходящего в течение 6-7 дней.

Когда сдавать анализ?

Анализ выявления антител к возбудителю паракоклюша назначают при :

• диагностики паракоклюша;
• дифференциальной диагностики заболеваний коклюша и паракоклюша;
• оценивании эффективности вакцинации и ревакцинации АКДС.

Оптимальный период для серологического исследования паракоклюша – с 21 по 42 день с момента первых признаков болезни. Анализ нецелесообразно проводить в течение 12 месяцев со дня иммунизации. Важно учитывать, что у малышей до 3 месяцев жизни личные антитела не синтезируются, однако могут обнаруживаться иммуноглобулины матери, которые, в большинстве случаев, диагностируются в низких концентрациях.

Важно! У детей возрастом до 6 лет, прошедших вакцинацию от коклюша, для анализа пригодны лишь пробы, отобранные в динамике (парные образцы), в частности впервые забор биоматериала осуществляется не раньше 3 недель с момента инфицирования.

Особенности подготовки к анализу

Кровь на исследование следует сдавать утром на голодный желудок. Допускается забор биоматериала на анализ и в другое время, однако с момента ночного голодания должно пройти не менее 6 часов. Подслащённые соки, вода с газом, кофе, чай, различные напитки могут искажать результаты диагностики, потому пить их перед исследованием запрещено.

Нежелательно сдавать кровь и после физиотерапевтической, ректальной, ультразвуковой диагностики и рентгенографии. За сутки-двое до предполагаемого обследования необходимо исключить употребление алкоголя, жареной и жирной пищи.

Непосредственно перед сдачей крови рекомендуется воздержаться от переживаний, физических нагрузок, стресса. За 15-20 мин до процедуры желательно успокоиться и в состоянии расслабления подождать в приёмной лаборатории своей очереди.

Самые высокие титры антител определяются через 8-10 недель от начала проявления симптомов болезни. Таким образом, серологическое определение антител полезно в случае давней клинической картины и, возможно, в случае атипичного течения болезни, если год назад не проводилась вакцинация.

Диагностика количества IgG антител не подходит для контроля иммунной защиты после вакцинации, поскольку она в течение 12 месяцев обычно падает до очень низких значений либо до показателей ниже предела обнаружения. Отрицательный титр не исключает наличия иммунитета.

Методика серологического исследования

Для диагностики паракоклюша используют РНГА (реакцию непрямой гемагглютинации). Она наиболее эффективна в пароксизмальную стадию при возникновении кашля. В этот период инфекции больные чаще обращаются за медицинской помощью.
Методика основана на выявлении специфических иммуноглобулинов посредством добавления в сыворотку крови эритроцитарных (латексных) антигенов. На их поверхности адсорбированы паракоклюшные антигены, приготовленные в лабораторных условиях. Фасеточный осадок на дне пробирки свидетельствует о позитивной реакции крови, а осадок в виде пуговки опровергает присутствие паракоклюшных антител.

Специфика исследования

Анализ на выявление в венозной крови иммуноглобулинов к возбудителю паракоклюша необходим для обнаружения инфекции и анализа накала иммунной системы после профилактической иммунизации.

В процессе РПГА специалист осуществляет систематическое разбавление анализируемых проб в ячейках лабораторных планшеток в соотношении 1:10 или 1:20, после чего добавляет к ним обычные эритроциты, утяжелённые антигеном патогена (паракоклюшным диагностикумом) и выдерживает в термостате 2 часа. Результат диагностики оценивается по внешней структуре и форме осадка: в случае положительных значений (при наличии иммуноглобулинов к возбудителю) эритроцитам свойственно склеиваться между собой и образовывать так называемый «перевёрнутый зонтик», в случае отрицательных – «пуговку».

Нахождение иммуноглобулинов к B.parapertussis способствует подтверждению паракоклюша на позднем этапе болезни, в частности после 3-й недели с момента попадания инфекции в организм. Для уточнения диагноза необходимо протестировать две пробы крови, отобранные для анализа в динамике (с перерывом в 14 дней). Увеличение концентрации антител более чем в 4 раза во второй пробе в сравнении с начальным значением свидетельствует о заражении.

Интерпретация результатов анализа

В крови здорового человека не обнаруживают специфические иммуноглобулины к паракоклюшу.

Присутствие антител к паракоклюшной палочке свидетельствует в пользу инфекции.

Обследования путем РНГА редко проводят новорожденным детям, пожилым людям и пациентам с иммунодефицитами. Сложность интерпретации анализа при низкой реакции иммунной системы затрудняет диагностику. В таких случаях прибегают к другим методам лабораторных исследований (бакпосев, ПЦР).

Серологическое исследование на выявлении антител к паракоклюшу позволяет диагностировать заболевание до развития осложнений и назначать эффективную терапию.

Референсные значения

Наиболее важными признаками острой инфекции являются обнаружение антител IgA против B. parapertussis и / или высокий уровень антител к коклюшному токсину.

Показатели нормы:

В случае клинического подозрения паракоклюша рекомендуется определение всех трёх разновидностей антител к B. parapertussis. При использовании данной комбинации тестов дополнительное нахождение иммуноглобулинов класса IgM не будет в дальнейшем способствовать повышению чувствительности анализа.

Из-за близкого родства между B. pertussis и B. parapertussis серологическое различие между этими двумя видами можно провести только по наличию или отсутствию антител против коклюшного токсина.

Причины недостоверных результатов анализа

Негативный результат характерный для здоровых людей либо лиц, заразившихся не позднее 3-х недель перед обследованием. Позитивный результат возможен у пациентов, инфицированных паракоклюшем или недавно переболевших людей.

Важность исследования

Анализ ориентирован на диагностику иммуноглобулинов IgG, lgM, lgA к клеточным антигенам и токсину Bordetella parapertussis. Появление антител класса IgG отмечается в процессе иммунной реакции на бактерию паракоклюша вслед за иммуноглобулинами IgM. Данные антитела способны сохраняться намного дольше остальных разновидностей иммуноглобулинов, подтверждая наличие иммунитета к инфекции.

Титр IgG к паракоклюшу и его токсину сложно сопоставить с напряжённостью иммунной системы, так как данные относительно пороговых значений IgG, важных для формирвания протективного иммунитета, отсутствуют.

В сравнении с иммуноглобулинами IgA антитела IgM, IgG образуются как при естественном заражении, так и после профилактической иммунизации. У новорожденных и пациентов с иммунодефицитом серологическое исследование имеет ограниченные показатели.