Серологический анализ на антитела lgM к гепатиту D

HDV является вирусным заболеванием, протекающим в результате биологических свойств патогена наподобие супер- либо коинфекции при HBV, для которого, как правило, характерно осложнённое течение, часто заканчивающееся летальным исходом. lgM иммуноглобулины к гепатиту D образовываются в острой фазе «дельта-инфекции». Исходя из быстроты и продолжительности выздоровления, при гепатите D возникает исчезновение вирусного возбудителя из печени, а вслед за ним и исчезновение антител lgM к HDV.

Анализ направлен на поиск специфических lgM иммуноглобулинов к дельта-гепатиту. Как правило, исследование назначается с целью выявления острой инфекции в организме и вероятного её перетекания в хроническую форму.

Anti-HDV lgM принято считать основным индикатором острой формы течения гепатита D. Именно по наличии antibodies IgM to Hepatitis D в крови диагностируется активность развития патологического процесса. В случае хронической формы болезни данный тип иммуноглобулинов обнаруживается в плазме на протяжении всей репликационной фазы HDV.

Определение lgM антител способствует быстрой дифференциации острого течения инфекции от хронического. Как и в случае изолированной разновидности инфекции гепатита В, при одновременном заражении дельта-гепатитом и гепатитом В выработка поверхностного антигена HBsAg происходит, в большинстве случаев, по истечении 8 недель после попадания вируса в человеческий организм, после чего становится возможным обнаружение индикаторов репликации гепатита D, а также преходящее в течение 21-28 дней возникновение lgM иммуноглобулинов к HDV.

Анализ используется при дифференциальной диагностике:

различных типов гепатитов;
острой формы HDV;
вирусного происхождения гепатита D по типу одновременного заражения организма разными разновидностями гепатита (коинфекции) и вторичного инфицирования новым вирусом (HDV) в условиях длящегося инфекционного процесса HBV (суперинфекции);
хронической формы дельта-гепатита на протяжении всей фазы репликации в печёночных клетках гепатита D.

Метод ИФА, применяемый для диагностики anti-HDV IgM, весьма специфичен, поскольку обнаруживает лишь те иммуноглобулины, которые продуцируются иммунной системой пациента как ответная защитная реакция на развитие HDV. Иные защитные белки этот тест не выявляет. Так как в лабораторных условиях воссоздаётся взаимосвязь структурной совокупности «антиген-антитело» при помощи добавления лишь для выполнения теста на определение гепатита В сцепляющего конъюгата, вероятность получения неправдивых результатов (ложноотрицательных либо ложноположительных) минимальна.

Когда назначают анализ?

Серологический анализ крови на Гепатит D anti-HDV IgM показан при:

хронических патологиях печени, в т. ч. при циррозе, хроническом HBV неустановленной этиологии;
скачкообраном (нехарактерном) течении гепатита В, вызванного вирусной инфекцией;
свойственных суперинфицированию симптомах (спленомегалии, гепатомегалии, яркой желтушной окраске кожи, энцефалопатии, затруднённом волнообразном развитии болезни, отравлении, геморрагическом синдроме);
быстропрогрессирующей (фульминатной) разновидности вирусного гепатита;
необходимости проведения обследования людей, находящихся в контакте с инфицированными гепатитом D лицами;
обострении болезни у пациентов, у которых ранее был диагностирован гепатит В;
свойственной коинфицированию симптоматике (пожелтение кожного покрова, озноб, приступы тошноты, суставные боли, повторяющаяся цикличность заражения, снижение аппетита).

В качестве биоматериала для обнаружения lgM иммуноглобулинов к HDV используется артериальная либо венозная кровь. Взятие образца может производиться с артерии или вены. Для проведения теста из отобранной пробы извлекают плазму, которая может содержать необходимые для выявления антитела.

Правила сдачи анализа

Во избежание получения ложных результатов диагностики накануне сдачи крови на anti-HDV lgM важно соблюдать определённые рекомендации:

проходить обследование утром на голодный желудок (последний приём пищи должен быть не ранее 8 часов);
за 72 часа до манипуляции исключить употребление алкоголя;
воздержаться от исследования сразу же после сеансов физиотерапии, рентгена, сонографии, флюорографии;
не питаться жирной едой за сутки до диагностики;
за 15-20 минут до манипуляции выпить 1,5-2 стакана чистой столовой воды без газа;
за 24 до исследования воздержаться от приёма медикаментов (при невозможности отказа от приёма лекарств важно оповестить об этом диагноста лаборатории и обозначить данный факт в специальном бланке анализа);
исключить в день обследования занятия спортом;
избегать накануне и в день проведения исследования стрессов, эмоциональных потрясений;
за 5-10 минут до взятия крови на анализ удобно расположиться (принять сидячее положение), успокоиться, расслабиться;
за полчаса до теста не курить.

Метод анализа

Иммуноферментный метод способствует выявлению в кровяной плазме иммуноглобулинов lgM к HDV. Тест базируется на воздействии «антиген-антитело» со своеобразным ферментом-индикатором, реагирующим с иммунной реакцией организма. Он позволяет проводить качественные и количественные исследования на наличие в диагностируемом образце крови специфических антител класса М к гепатиту.

Проба венозной крови отбирается натощак в вакутейнер (специальную вакуумную ёмкость с жёлтой крышкой, предварительно заполненную разделительным гелем). Осуществив забор образца крови в вакуумную систему с гелевым разделителем, лаборант переворачивает её 5-6 раз, осуществляя при этом перемешивание биоматериала с гелем. Далее производится маркировка пробирки: на ней обозначаются фамилия, инициалы пациента, порядковый номер пробы, специальный код лабораторного центра, проводящего исследование (особое внимание уделяется данным; все сведения должны совпадать с информацией, обозначенной в бланке-направлении). По завершении манипуляции пробирка с биоматериалом и разделительным гелем, предназначенная для дальнейшего получения сыворотки (закрывающаяся жёлтой крышкой) оставляется при комнатной температуре на столе на 25-30 минут, затем центрифугируется.

Бланк результатов анализа содержит информацию относительно отсутствия (негативные значения) или наличия (позитивные значения) специфических lgM иммуноглобулинов. Кроме того, не считая обнаружения данного типа антител, доктор может рекомендовать лабораторные тесты, способные дополнительно выявлять антиген HBs, антитела lgG к HDV, а также общие иммуноглобулины к HBV.

Расшифровка анализа

Нормативные значения: anti-HDV lgM к дельта гепатиту не обнаружены.

Отрицательные значения характерны для:

острой формы HDV;
хронического течения дельта-гепатита на протяжении всего этапа самовоспроизведения вируса HDV в печёночных клетках (по рекомендации врача пациенту может быть назначен вспомогательный лабораторный тест исследования РНК вируса гепатита D ПЦП диагностикой).

Положительные результаты наблюдаются при:

отсутствии острой инфекции HDV;
инкубационной фазе болезни;
поздней стадии инфицирования, когда на фоне присутствия в организме lgG иммуноглобулинов к гепатиту D в крови не обнаруживаются lgM антитела к HDV;
давнем заражении (с момента выздоровления после перенесённого инфицирования прошло больше 12 месяцев).

На достоверности результатов могут сказываться: продолжительное хранение пробы крови до момента поступления её в диагностический центр, стадия болезни, для которой характерный синтез определённых типов иммуноглобулинов к гепатиту дельта, нарушение рекомендаций относительно взятия образца биоматериала и дальнейшей его обработки в лаборатории (замораживания, теплового воздействия), усугубление патологического процесса, подтверждённое либо опроверженное размножение гепатита D на фоне наличия / отсутствия в клетках печени специфических ииммуноглобулинов к HDV.

Анализ на anti-HDV lgM к вирусному дельта-гепатиту рекомендуется проводить после обнаружения HBs-антигена к вирусному HBV.

Репликация HDVугнетает размножение в печёночных клетках HBV, вследствие чего в ходе выполнения диагностики наблюдается феномен интерференции вирусов. Данный факт препятствует обнаружению в крови пациента многих серологических индикаторов.