Антитела к тромбоцитам

Алексеев Андрей Викторович
Алексеев Андрей Викторович Врач клинической лабораторной диагностики,

Аутоиммунные антитела: АТ к тромбоцитам


Тромбоцитами называют форменные клетки крови, которые принимают непосредственное участие в формировании кровяного сгустка. При некоторых патологических процессах (врожденных аномалиях, аутоиммунных патологиях, инфекционных заболеваниях) в человеческом организме происходит выработка аутоиммунных анти-тромбоцитарных антител, которые способны спровоцировать уничтожение тромбоцитов клетками макрофагической системы, тем самым нарушить функцию и снизить количество тромбоцитов в циркулирующей крови. Клиническим признаком этого явления является геморрагический синдром - подкожные кровоизлияния, кровоточивость слизистых, внутренние кровотечения.
Тромбоциты, антитела к тромбоцитам
Важное значение в диагностировании патологических состояний, протекающих с такой клинической картиной, отведено лабораторным методикам – клиническому анализу, коагулограмме (оценивании свертывания крови). Определение наличия аутоиммунных антител к тромбоцитам является ведущим анализом для клинического разграничения геморрагических синдромов.

Анализ определения антител к тромбоцитам необходим при:
  • нарушении тромбоцитопоэза (процесса образования тромбоцитов);
  • болезни Верльгофа (доброкачественной тромбоцитопении);
  • снижении образования тромбоцитов вследствие применения антибактериальных, анальгезирующих, диуретических препаратов;
  • злокачественных гематологических патологиях.

Антитела к тромбоцитам

Патологические иммунные механизмы, ведущие к образованию антитромбоцитарных антител, вызывают разрушение белых кровяных пластинок. В результате могут развиваться несколько типов расстройств:

  • иммунная тромбоцитопеническая пурпура, которая может принимать острое или хроническое течение;
  • тромбоцитопения новорожденных, обусловленная действием материнских антител;
  • иммунная тромбоцитопения, вызванная лекарственной терапией.

В отдельных случаях антитела могут повреждать мегакариоциты, являющиеся предшественниками тромбоцитов, или нарушать их созревание. Однако у существенной доли обследованных пациентов отмечается рост показателя мегакариоцитов.

Антитела к тромбоцитамАутоантитела к тромбоцитарным антигенам относятся к классам G и M. Эти иммунноглобулины взаимодействуют с антигенами, при этом агрегированные молекулы антител вызывают активацию системы комплемента. Это ведет к образованию цитотоксического мембраноатакующего комплекса, который вызывает деструкцию тромбоцита. Цитотоксические реакции могут реализовываться и другим путем – с помощью так называемой антителозависимой клеточной цитотоксичности. Различные типы лейкоцитов (моноциты, нейтрофилы, макрофаги и другие) прикрепляются к тромбоцитам, повреждают их клеточные мембраны и вызывают лизис клеток-мишеней. Первоначально иммунный ответ на антигены тромбоцитов развивается в селезенке. Затем в течение нескольких недель происходит накопление Т и В-лимфоцитов, играющих роль клеток памяти. Сенсибилизированные тромбоциты разрушаются вследствие фагоцитоза или цитолизиса, опосредованного активацией комплемента.

В процессе разрушения тромбоцитов задействованы органы ретикулоэндотелиальной системы: селезенка, печень, костный мозг. Деструкция тромбоцитов происходит преимущественно в селезенке, поскольку именно в ней секретируется значительная доля антител. В этом органе находится селезеночный пул тромбоцитов (примерно треть от их общего количества). Помимо перечисленного, в селезенке замедлен кровоток, что ведет к усилению процесса фагоцитоза. В печени продуцируется заметно меньше аутоантител, нет постоянного пула тромбоцитов, ускорена циркуляция крови. Однако при высоком содержании антитромбоцитарных антител фагоцитоз тромбоцитов происходит и в печени. Поскольку аутоантитела направлены также к антигенам мегакариоцитов, в костном мозге могут одновременно происходить подавление тромбоцитопоэза и разрушение тромбоцитов. Внутрикостномозговая элиминация тромбоцитов диагностируется, если при повышенной их продукции в костном мозге в кровоток поступает только половина образовавшихся кровяных пластинок.

Когда назначают анализ на антитела?


Анализ на выявление аутоиммунных антител к тромбоцитам назначают терапевты и гематологи при появлении у пациентов:
  • петехиальных высыпаний на кожных покровах;
  • частых носовых кровотечений;
  • продолжительных обильных менструаций;
  • повышенной кровоточивости слизистой рта;
  • тромбоцитопении;
  • увеличения длительности кровотечения при нормальном времени свертываемости.

Как определяют антитела к тромбоцитам?


Биологический материал для исследования – плазма без фибриногена, отбор производят из вены в лабораторном центре утром.

Как определяют антитела к тромбоцитамНакануне процедуры пациенту необходимо:
  1. Отменить прием медикаментов.
  2. Исключить употребление спиртного, физические нагрузки.
  3. Ужинать не позже 20 часов.
  4. Утром нельзя пить чай и кофе, завтракать, курить.
Для проведения анализа используют методику непрямой иммунофлюоресцентной реакции, основанной на выявлении образования иммунного комплекса (антитело - антиген) с использованием маркерного субстрата.


Методы определения антитромбоцитарных антител

Для подтверждения диагноза требуется проведение иммунологического исследования. В крови пациентов определяют антитромбоцитарные тромбоцитоассоциированные (TpA-IgG) или сывороточные антитела. Во многих случаях у пациентов имеется несколько разных видов антитромбоцитарных антител. Выявить их можно с помощью одного из лабораторных методов:

  • радиоиммунологический анализ (РИА);
  • иммуноферментный анализ (ИФА);
  • метод Диксона;
  • иммунофлюоресцентный метод;
  • методы, использующие меченный I125 C3-фрагмент комплемента и меченный I125 стафилококковый протеин А;
  • метод тромбоагглютинации.

Методы определения антитромбоцитарных антителС помощью этих диагностических методик можно определять сывороточные иммуноглобулины (непрямой метод), и антитела на поверхности кровяных пластинок (прямой метод).

Методы иммуноферментного анализа и иммунофлюоресценции – одни из самых эффективных. Ограничением методик является необходимость в дорогостоящем оборудовании и реактивах. Альтернативой этим методам стал твердофазный антиглобулиновый тест, обладающий высокой специфичностью. Идентифицировать антитела можно при помощи иммобилизации тромбоцитарных антигенов специфическими моноклональными антителами. Этот метод считается «золотым стандартом», в нем используются моноклональные мышиные антитела, специфичные к тромбоцитарным гликопротеинам. Таким способом можно не только выявить антитела, но и провести фенотипирование редких антигенов. Недостаток метода – возможность получения ложноотрицательных результатов, что осложняет диагностику иммунных тромбоцитопений. Методика не подходит для скрининга из-за трудоемкости. Еще один высокоэффективный метод осуществляется с помощью проточной цитофлуориметрии. Этим способом определяют антитромбоцитарные иммуноглобулины разных классов (M, G и А). Методика обладает высокой специфичностью и чувствительностью.

Расшифровка анализа


Титр ауто-антител к тромбоцитам ниже 1:20 считают «отрицательным результатом».

Повышение титра означает наличие анти-тромбоцитарных антител в периферической крови пациента – «положительный результат». Явление характерно для:
  • идиопатической (первичной иммунной) или посттрансфузионной (связанной с лечебной гемотрансфузией) тромбоцитопенической пурпуры;
  • системных заболеваний;
  • тяжелых инфекционных патологий - СПИДа, вируса Эпштейна-Барр, сепсиса, мононуклеоза;
  • бактериальной рефрактерности к тромбоцитам.